生物活性浓缩物,其生产方法和某些还含有硫酸软骨素的药物组合物技术

生物活性浓缩物，其特征在于它是一种含１０％活性物质的水溶液，包含７－９％的抗透明质酸酶且抗炎的粘多糖聚合物和加有１－３％的重组且抗透明质酸酶的硫酸软骨素，其ｐＨ值在４－６之间，抗透明质酸酶活性在４５０－７５０Ｉ．Ｕ．／ｍｌ之间，并呈淡黄至浅棕色，在冻干状态下它含最低９３％的活性物质，活性物质包含６５－８４％的粘多糖聚合物和９－２８％的硫酸软骨素，呈淡黄至浅棕色，且含通常的防腐剂。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
生物活性浓缩物，其生产方法和某些还含有硫酸软骨素的药物组合物
本专利技术涉及一种生物活性浓缩物，其生产方法和治疗变性疾病、风湿病、关节病和其它相关疾病的药物组合物。
技术介绍
一种抗透明质酸酶物质的配合物衍生于含有氨基酸、总糖、糖原、硫酸软骨素、苯酚、降血压物质的天然产品如小鱼，抗透明质酸酶活性最低为50I.U/ml。生产此配合物的方法在于用0.5％苯酚溶液分两阶段处理海鱼24小时，合并的提取物在最高40℃真空浓缩，再用等体积96c乙醇处理，除去沉淀物，所得的上清液用硅藻土处理、过滤，在最高40℃真空浓缩，然后用提取溶剂处理，除去溶剂后，用苯酚处理至4.5-5.5％的值。含一种抗透明质酸酶生物活性提取物、苯酚和偏亚硫酸氢钠的药物组合物也被开发出来。这些药物有赖于一种物质即天然活性成分的配合物，其比例与正常的起作用的比例接近，通过从动物组织提取而生产或在细胞和微生物培养物中生物合成，这种配合物的作用是取代，代替在结缔组织中由于各种原因引起失衡和导致疾病的天然配合物的功能，或甚至使其恢复正常。已经确立了提取和调节方法，以使活性物质的损失和降解尽可能低，并且当原料成分的比例与治疗人类疾病所需的不同时，可通过提取物的适当复配或通过治疗程序加以平衡。现在，已知导致疾病的机理是由于关节正常活动所依赖的正常成分的生物合成和破坏失衡。生物体组织中的细胞包埋于基础物质中并于其中演化。该基础物质-->-一种生物结构的普通化合物-充满所有间隙并把每一个固定的细胞与其相邻者隔开。细胞外环境组成的变化对细胞的行为有深刻的影响，而反过来，细胞具有强大的调节其中间环境的作用。细胞间质是一种配合物凝胶，含水、电解质类、代谢产物类、溶解的气体、酶类、痕量元素、脂肪类、蛋白质类、糖类。这种物质由于富含某些长链酸性粘多糖聚合物，尤其是葡萄糖胺聚糖和相关的蛋白聚糖而具有高粘性，在微观水平上由胶原纤维的三维网状结构而增强(Cameron，E.和Pauling，L.-The Encyclopaedia of Ignorance，p377-385，Pergamon Press，Oxford，1982)。发现于所有关节处的滑液的作用不仅是用来润滑活动结构，而且用来消散能量。这种功能是由滑液组合物实现的，其中葡萄糖胺聚糖(GAC)和蛋白聚糖(PG)如透明质酸和硫酸软骨素由于其螺旋结构而导致高粘性，当运动频率低时表现为粘稠样，当运动频率高时表现为弹性样(Ogston，A.G.和Stanier，J.E.(1953)-生理学杂志(J.Physiol)，199，124)。弹性是由于在pH＝2.5时存在非常浓的透明质酸，它在盐溶液中形成一种粘弹性糊状物(Balasz，E.A.，胞内基质的化学和细胞生物学(Chemistry and Molecular Biology of the Intercellular Matrix)，第II和III卷，Academic Press，New York，1970)。就其粘性而论，滑液在不同年龄表现类似，但在高运动频率时吸收的能量是不同的，在年轻人中滑液吸收77％的能量，而在老年人中只能通过弹性贮藏吸收52％的能量。在受疾病侵袭的关节中(骨关节病)，滑液是粘性而不是弹性的。这种滑液的稠度为健康老年人的七分之一。这些滑液中透明质酸的浓度低，导致低粘度指数，而蛋白质的浓度高。浓度变化的负面影响在某些病例中可能较低，粘度指数可达30倍。而且，在关节、腱、眼玻璃体中-流质区(滑液，玻璃体液)是与固体基质(关节软骨、腱、筋膜、玻璃体)相邻的。在流体基质中的粘弹性大分子化合物-透明质酸-穿透固体基质的表面。从流变学上讲，两种基质的主要区别是固体基质中存在胶原纤维-->而在流体基质中不存在。1-2μ的表面层是由透明质酸和蛋白质构成。这一层可由在细胞间质中发现的过量透明质酸酶的作用而除去或破坏。10-15μ厚的下层含典型的胶原纤维，而且原纤维间隙被大致等量的透明质酸和硫酸软骨素充满。根据专业领域已知的资料(Cameron，E.和Pauling，L.-TheEncyclopaedia of Ignorance，p377-385，Pergamon Press，Oxford，1982和Balasz，E.A.和Sweeney，D.B.-1968-视网膜脱落的新的且有争论的方面(New and Controversial Aspects of Retinal Detachement)，p371，Ed.McPerson，Harpen和Row，New York)，本专利技术的目的在于生产一种各成分的配合物，其中粘多糖聚合物和蛋白聚糖以透明质酸和硫酸软骨素的形式参与其中，还有它们的片断，肝素和抗坏血酸，它们都是被最近的研究证实，对恢复变性疾病中结缔组织正常功能有贡献的物质。这些疾病改变了包埋细胞的基础物质，恶化了基础物质和这些细胞间的现存关系。“正常”平衡的条件是对每一部分-基础物质和细胞-保持其自身的功能，因为任何变化，例如由细胞过量分泌的透明质酸酶的作用而引起的透明质酸解聚导致的基础物质粘度降低，会伴随着疾病的发生。另一种恢复平衡的途径与一种叫做抗透明质酸酶的抗酶有关(透明质酸酶终究是一种与结缔结构有同样功能的酶类)，它与硫酸软骨素、肝素和抗坏血酸一起阻止或限制透明质酸的解聚。已知有某些尝试来制备基于从含有抗透明质酸酶的原料，如牛的气管、牛和羊的睾丸、脐带、小海鱼等提取得到的抗透明质酸酶的药物。尽管当时很重要(专利RO/82273-1982和由the Institute ofChemical and Pharmaceutical Research-Bucharest起草的“技术报告(Technological Reports)”，No.84740/1977和No.5160/1979)，这些尝试代表了一种只部分地解决了生产方法和得到的药物组成的问题的基本可选途径。专利技术公开根据本专利技术，生物活性浓缩物是一种活性物质-10％水溶液，包含-->7-9％的抗透明质酸酶且抗炎的粘多糖聚合物和加有1-3％的重组(restitutive)且抗透明质酸酶的硫酸软骨素，它具有pH＝4-6，抗透明质酸酶活性为450-750I.U./ml，呈淡黄至浅棕色；冻干状态下它含至少93％的活性物质，活性物质包含65-84％的粘多糖聚合物和9-28％的硫酸软骨素，呈淡黄至浅棕色并含有通常的防腐剂(conservant)。生物活性浓缩物的生产方法在于用含0.5％苯酚，pH＝2-4的酸性水溶液分两阶段处理来自动物的软骨结缔组织，如牛和羊的气管、脐带、未成年动物的腱、肠、睾丸或海洋生物，第一阶段用1∶3.5-4的比例，第二阶段用1∶1.5的比例，两阶段的提取都需24小时，在0-4℃温度下每3小时搅拌30分钟，然后第一阶段得到的提取物与第二阶段得到的合并，并用Ca(OH)2溶液调节至pH＝4.5-5，让其在0-4℃静置8小时，然后过滤，得到的溶液在最高45℃温度下真空蒸发浓缩至浓缩比值为7∶1，此后溶液通过弱离子(ion-weak)阴离子交换柱，随后以1∶4的比例用提取溶剂脱脂6-10次，直至残余的脂质不超过1-5％。最后一次脱脂过程以同样的比例用正己烷进行，然后产生的水溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.生物活性浓缩物，其特征在于它是一种含10％活性物质的水溶液，包含7-9％的抗透明质酸酶且抗炎的粘多糖聚合物和加有1-3％的重组且抗透明质酸酶的硫酸软骨素，其pH值在4-6之间，抗透明质酸酶活性在450-750I.U./ml之间，并呈淡黄至浅棕色，在冻干状态下它含最低93％的活性物质，活性物质包含65-84％的粘多糖聚合物和9-28％的硫酸软骨素，呈淡黄至浅棕色，且含通常的防腐剂。2.生产生物活性浓缩物的方法，通过在24小时内用0.5％苯酚溶液分两阶段处理一种有机原料，合并的提取液真空浓缩，用96c乙醇脱蛋白质，通过一种有机溶剂如提取溶剂脱脂，其特征在于来自动物的软骨结缔组织-牛和羊的气管、脐带、未成年动物的腱-以及肠、睾丸或海洋生物用含0.5％苯酚且pH＝2-4的酸性水溶液进行两阶段处理，第一阶段以1∶3.5-4的比例，第二阶段以1∶1.5的比例，两阶段的提取都需24小时，在0-4℃温度下每3小时搅拌30分钟，然后第一阶段得到的提取物与第二阶段得到的合并，用Ca(OH)2溶液调节至pH＝4.5-5，然后让其在0-4℃下静置8小时，然后过滤，得到的溶液在内部温度最高45℃下真空蒸发浓缩至达到7∶1的浓缩比值，溶液通过弱离子阴离子交换柱，然后用提取溶剂以1∶4的比例脱脂6-10次，直到残余脂质不超过1-5％，最后一次脱脂过程用正己烷以同样的比例完成，然后得到的水溶液真空浓缩直至体积为原溶液体积的70％；经过滤后，所得上清液用96c乙醇处理以脱蛋白质，直至醇浓度达到50％，然后在0-5℃放置12小时，再过滤，浓缩醇溶液以除去醇，直到达到与进行脱蛋白质的溶液相比为70％的体积，蛋白质沉淀物用硫酸铵梯度处理，低分子量蛋白质级分与除去醇的水溶液合并；组胺杂质通过连续地用磷酸三钠溶液、氯化钙和氢氧化钠处理最后的溶液直至pH＝8.5而除去，然后过滤，产生的溶液通过弱离子阳离子交换柱，pH值调节回4-6，然后加入硫酸软骨素至1-3％的浓度。3.根据权利要求2的方法，其特征在于所用的原料可以是新鲜、冷...

【专利技术属性】
技术研发人员：I·曼萨图，D·E·阿里赞，V·伊奥尼塔曼萨图，M·卡拉萨瓦，M·帕纳特，I·G·斯卡拉特，
申请(专利权)人：S·C·泰曼公司，
类型：发明
国别省市：