一种降低慢病毒整合风险的表达盒及其应用和产品制造技术

技术编号:46593820 阅读:1 留言:0更新日期:2025-10-10 21:27
本发明专利技术提供一种降低慢病毒整合风险的表达盒及其应用和产品属于基因工程技术领域。本发明专利技术基于现有技术进行进一步优化,对表达盒进行了反向装配,通过polyA序列的优化选择,发现本发明专利技术的载体可以提高单个拷贝的基因表达量,以较低的慢病毒整合拷贝数实现相同表达效果,从而进一步降低病毒整合带来的风险。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程,具体涉及一种降低慢病毒整合风险的表达盒及其应用和产品


技术介绍

1、β-地中海贫血是世界上最常见的单基因常染色体隐性遗传性疾病之一,是由于β珠蛋白基因或其调控序列缺陷导致β-珠蛋白链合成减少或障碍,进而致使α/β-珠蛋白比例失调无法产生足够的血红蛋白所引起。β-地中海贫血的临床表现与α/β-珠蛋白链失衡的程度密切相关。大多数β0/β0基因型患者和部分βe/β0基因型患者几乎不产生β链,常常表现为输血依赖型β-地中海贫血,临床症状尤为严重,每年需要>100 ml/kg的浓缩rbc(红细胞)或进行≥8次输血。中、重度β-地中海贫血在婴幼儿期就表现为严重的低红色素小细胞性贫血,总hb(血红蛋白)≤7g/dl。

2、公开号为cn114457119a的中国专利中公开了一种β-珠蛋白重组慢病毒载体pccl-sin-cppt-lcr2.7k-phbb-ci-βa-t87q-rbpa的设计,由于其基因表达盒方向和病毒包装主质粒启动子转录方向一致,其细胞转导优于常规反向表达盒,总体基因表达水平相当,因此单个病毒拷贝提供的蛋白表达量本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种含目的蛋白表达盒的表达载体,其特征在于,所述表达载体上包括目的蛋白表达盒,所述的目的蛋白表达盒由基因片段1-5组成,按5’-3’方向顺序为基因片段1-基因片段2-基因片段3-基因片段4-基因片段5;所述的表达载体为LVV慢病毒载体;

2.权利要求1所述的表达载体的构建方法,其特征在于,包括将权利要求1中所述的目的蛋白表达盒插入到表达载体上。

3.包括权利要求1所述的表达载体的细胞。

4.通过权利要求1所述的表达载体转染细胞制备得到的慢病毒。

5.权利要求1所述的表达载体或权利要求2所述的构建方法或权利要求3所述的细胞或权利要求4所述...

【技术特征摘要】

1.一种含目的蛋白表达盒的表达载体,其特征在于,所述表达载体上包括目的蛋白表达盒,所述的目的蛋白表达盒由基因片段1-5组成,按5’-3’方向顺序为基因片段1-基因片段2-基因片段3-基因片段4-基因片段5;所述的表达载体为lvv慢病毒载体;

2.权利要求1所述的表达载体的构建方法,其特征在于,包括将权利要求1中所述的目的蛋白表达盒插入到表达载体上。

3.包括权利要求1所述的表达载体的细胞。

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【专利技术属性】
技术研发人员:董文吉赵忠亮陈志川姜宇刘子瑾赵珊珊马元晖
申请(专利权)人:中吉智药南京生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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