治疗神经疾病的方法和组合物技术

本发明专利技术在需要它的个体中提供用于治疗包括视网膜和视神经损伤的神经疾病，对个体产生神经有益作用的方法和组合物。方法包括给予个体治疗有效量的己糖，例如甘露糖。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

技术介绍
成熟哺乳动物的神经，如视神经，损伤后通常不会再生。视网膜神经节细胞(RGCs)在损伤的神经末端引发萌芽反应，但此生长夭折了，细胞很快开始死亡(Ramony Cajal，1991)。虽然如此，RGCs可以通过周围神经移植物再生长的轴突(Aguayo等，1991)，甚至如果晶状体损伤了，通过视神经本身(Fischer等，2000；Leon等，2000)或者如果将周围神经片段植入玻璃体而再生(Berry等，1996)。后面的操作导致眼内出现激活的巨嗜细胞，并且最近显示玻璃体内巨嗜细胞活性足以允许RGCs通过视神经再生其轴突(Leon等，2000；Yin等，2003)。在培养物中，巨嗜细胞来源的蛋白与玻璃体中的组成小分子一起，刺激成熟鼠RGCs以依赖cAMP的方式再生轴突(Yin等，2003)。与哺乳动物不同，鱼和两栖动物终生可以再生它们的视神经(Jacobson，1991)。在培养物中，金鱼RGCs最强大的轴突促进因子是由视神经的非神经元细胞分泌的亲水小分子(＜500道尔顿)。该分子被称为AF-1(Schwalb等，1995；Schwalb等，1996)。理解哺乳和非哺乳动物神经元再生的相关因素会帮助开发治疗神经元疾病可能的疗法。周围和中枢神经系统疾病是广泛存在的，并且对这些情况中的很多疾病缺乏有效的治疗干预。神经疾病可能是由于神经元损伤引起的，例如机械损伤或毒性化合物引起的损伤，神经元不正常的生长或发育引起，或神经元活性的错误调节(例如下调或上调)引起。本领域需要可以提高神经元或部分神经系统能力的方法和组合物，以抵抗伤害、再生和维持需要功能，这可以用来治疗神经疾病。专利技术概述本专利技术提供对有神经学状况的个体产生神经有益作用的方法和组合物，该作用包括提高神经元存活，轴突生长，神经元再生或使个体神经功能正常化。在某一方面，本专利技术提供包括给予个体治疗有效量的己糖(例如甘露糖)或己糖衍生物，因此对个体产生神经有益作用的方法。在另一实施方案中，本专利技术通过给予需要该治疗的个体有效量的己糖或己糖衍生物，对个体神经疾病，包括视网膜和视神经损伤提供治疗。在另一实施方案中，本专利技术进一步包括给予个体cAMP调节剂和/或巨嗜细胞衍生的因子。在某一方面，根据本专利技术将己糖或己糖衍生物给予个体以便己糖接触个体中枢神经系统的神经元。例如，可以通过将己糖导入脑室、腰椎区域或小脑延髓池，将己糖给予个体的脑脊液，进入鞘内空间。在这些情况下，可以将己糖局部给予皮层神经元或视网膜神经节细胞以产生神经有益作用。在某一实施方案中，药学可接受的制剂提供持续的释放，给个体提供至少一周有效量的己糖；或在另一实施方案中，在将药学可接受的制剂最初给予个体后至少一个月。实现本专利技术制剂持续释放的方法包括使用缓慢释放的聚合物胶囊，生物学易蚀的基质，或输送己糖或本专利技术其他治疗化合物的输液泵。输液泵可以置入皮下、颅内或其他医疗需要的位置。在某些实施方案中，可以使用输液泵通过导管将本专利技术的治疗因子或组合物运送到脑脊液或局部需要输送的位置，例如神经元损伤部位或神经变性部位。可以将包括己糖衍生物和药学可接受载体的药物组合物按说明包装，使用药物组合物用于治疗神经疾病。在某一实施方案中，药物组合物进一步包括cAMP调节剂和/或巨嗜细胞衍生的因子。本专利技术的其他特征和优点将在以下详细描述和权利要求中显示清楚。附图简述附图说明图1A-B显示来自鼠玻璃体液的低分子因子的轴突促进作用。图1A显示将正常鼠玻璃体中或晶状体损伤一周后玻璃体中的分子提取到盐水中，通过超滤分离出小于3kDa的分子，使用金鱼视网膜神经节细胞检测轴突促进作用。当为最初浓度的1.25％或5％时，低分子量的提取物象肌苷一样诱导同样多的生长，并且与晶状体是否损伤无关。通过减掉单独培养基中的生长水平，然后除以阳性对照的净生长而将生长数据标准化。图1B说明细胞存活。任何操作没有改变每200X显微镜视野中视网膜神经节细胞的数目。图2显示低分子量玻璃体衍生因子的特点。来自玻璃体提取物的低分子量因子(VE＜3)诱导的轴突生长被嘌呤类似物6-巯鸟嘌呤(6-TG))完全抑制但不被嘌呤转运的抑制物NBTI影响。这些制剂对金鱼视神经条件培养基来源的小分子因子AF-1诱导的生长产生相似的作用。相反，肌苷刺激的生长仅被6-TG部分抑制，而被NBTI完全阻断。图3A-C显示玻璃体诱导因子在鼠视网膜神经节细胞中以依赖cAMP的方式刺激轴突生长。图3A显示轴突生长。来自玻璃体的低分子量因子自身对培养中的鼠视网膜神经节细胞具有小但是显著的轴突促进作用。加入毛喉素(forsk)或PKA拮抗剂Sp-cAMP-s大大加强此作用。6-TG强烈抑制此生长。将结果标准化为在单独的培养基中生长的对照培养物中见到的生长水平(8-12％范围的细胞轴突延长长度＞两倍细胞直径)。图3B显示细胞存活。检测的试剂中没有一个改变RGC的存活。与阴性对照相比**p＜0.01；与PKA拮抗剂单独处理的培养物中的生长相比p＜0.001；与VE＜3加PKA拮抗剂处理的培养物中的生长相比p＜0.01。图3C显示5％浓度的VE＜3产生接近最大的反应。与阴性对照相比**p＜0.01；与阴性对照或单独用PKA拮抗剂处理的细胞相比***p＜0.001。图4显示提高细胞内cAMP水平不促进金鱼RGCs的轴突生长。毛喉素或Sp-cAMP-s单独都不不刺激金鱼RGCs的轴突生长和降低AF-1诱导的生长水平。PKA拮抗剂Rp-cAMP-s或H-89(5μM)不降低AF-1诱导的生长，尽管更高浓度的H89(20μM)可以。**p＜0.01(与单独使用AF-1引起的生长相比下降显著)。图5A-F说明分离小的玻璃体衍生的生长因子。图5A和B显示反相HPLC。浓缩来自牛玻璃体的低分子量因子，用95％的乙醇提取，在C-18反相柱上进行HPLC。轴突促进活性在最早的峰洗脱。图5C和D显示凝胶过滤层析。在G-10 Sephadex柱上，轴突促进活性作为包含高水平214nm吸收的物质的连贯的峰洗脱。图5E和F显示正相层析。使用HPLC在LC-NH2正相柱上分离来自凝胶过滤柱包含轴突促进活性的峰。轴突促进活性在大多数214nm吸收的成分之后洗脱出(箭头)。在所有病例中进行金鱼视网膜神经节细胞生物检测。图6A-E显示通过质谱鉴别轴突促进因子。图6A和B显示来自LC-NH2柱的不诱导轴突生长的(6A)和相邻的刺激轴突生长的(6B)m/z范围为140到220的组分进行阴离子状态下的快速原子轰击质谱。质谱在甘油存在下进行。只有活性组分包含m/z＝179.2(b中的箭头)的峰。因为阴离子状态的离子质量代表减去一个质子的质量，活性组分中物质的实际质量预计为180。图6C和D显示来自LC-NH2不诱导轴突生长的(6C)和相邻的刺激轴突生长的(6D)m/z范围为230到300的组分进行阳离子状态下的快速原子轰击质谱。质谱在甘油存在下进行。只有活性组分包含m/z＝273.12和255.13的峰(箭头)。因为阳离子状态的离子质量代表增加一个质子的质量，并且因为这些离子可能包括甘油加合物(质量＝92)，出现在活性组分中的物质的实际质量可能是180.13和162.12。图6E显示来自(6D)进行了MS/MS分析，m/z＝273物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗有需要的个体的神经疾病的方法，其包括给予个体治疗有效量的己糖。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：LI贝诺维茨，
申请(专利权)人：儿童医疗中心有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]