间变性淋巴瘤激酶嵌合抗原受体和使用方法技术

本发明专利技术提供的是间变性淋巴瘤激酶嵌合抗原受体(ALK CARs)。本发明专利技术还提供编码ALK CARs的多核苷酸、包含ALK CAR的工程化免疫细胞、其药物组合物以及用于施用其的试剂盒。本发明专利技术还提供通过施用ALK CAR、或包含ALK CAR的工程化免疫细胞、或其药物组合物来治疗患有疾病的受试者的方法。试者的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】间变性淋巴瘤激酶嵌合抗原受体和使用方法
[0001][相关申请案的对照参考][0002]本申请主张于2020年1月28日提出申请的美国临时专利申请案第62/966,748的号的优先权，其内容以参考方式全部并入本文。

技术介绍

[0003]间变性淋巴瘤激酶(ALK)是胰岛素受体超家族中的一种受体酪氨酸激酶，在大脑和神经系统的发育中起重要作用。ALK由蛋白酶体加工成肽，通过与抗原加工
‑
1和
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2(TAP1和TAP2)相关的转运蛋白转运至内质网，并与HLA I类分子结合。ALK在成年期由正常组织最低限度地表达。然而，ALK是由肿瘤异常表达，例如非小细胞肺癌(NSCLC)、间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)和神经母细胞瘤。更罕见的是，ALK是由B细胞淋巴瘤、甲状腺癌、结肠癌、乳腺癌、炎性成肌纤维细胞瘤(IMT)、肾癌、食管癌和黑色素瘤所表达。因此，ALK是跨不同类型癌症的理想共享抗原。ALK可能通过与其他基因形成融合基因，通过获得额外的基因拷贝或通过基因突变而成为致癌物质。
[0004]几种ALK酪氨酸激酶抑制剂(TKI)可用于治疗ALK重排的NSCLC，包括克唑替尼(crizotinib)、色瑞替尼(ceritinib)、阿来替尼(alectinib)、布格替尼(brigatinib)和劳拉替尼(lorlatinib)。不幸的是，通过多种机制，对这些药物的耐药性会在1至2年内发生。一旦患者对可用的ALK抑制剂产生耐药性，由于这类人群对PD
‑
1通路抑制剂的反应率非常低，他们通常会接受细胞毒性化学治疗而不是免疫治疗。尽管PD
‑
1抑制剂如帕博利珠单抗(pembrolizumab，可瑞达)和纳武单抗(nivolumab，欧狄沃))已经彻底改变肺癌的治疗，尤其是与吸烟相关的癌症，但大多数ALK阳性肺癌患者对这些免疫治疗没有反应。因此，显然需要在ALK阳性癌症中开发额外的ALK靶向治疗。
[0005][以参考方式并入][0006]本说明书中所提及的所有出版物、专利和专利申请案均以参考方式并入本文，其程度与单独的出版物、专利或专利申请案被具体且单独地指示以参考方式并入的程度相同。除非另有说明，否则本说明书中所提及的出版物、专利和专利申请案整体是以参考方式并入本文。

技术实现思路

[0007]如下所述，本专利技术的特征在于间变性淋巴瘤激酶嵌合抗原受体(ALK CAR)。本专利技术还提供包含ALK CAR的工程化免疫细胞、编码ALK CAR的多核苷酸、其药物组合物以及用于施用其的试剂盒。本专利技术还提供通过施用ALK CAR、包含ALK CAR的工程化免疫细胞或编码ALK CAR的多核苷酸或其药物组合物来治疗患有疾病的受试者的方法。
[0008]本专利技术的一个方面提供一种间变性淋巴瘤激酶嵌合抗原受体(ALK CAR)，包含：胞外结合域，其包含重链互补决定区1(HCDR1)、重链互补决定区2(HCDR2)和重链互补决定区3(HCDR3)，其各自包含与表4中所述的抗ALK抗体的HCDR1、HCDR2和HCDR3序列至少80％相同的氨基酸序列，其中，所述胞外结合域特异性结合至间变性淋巴瘤激酶(ALK)多肽或其抗体
结合片段；跨膜域；和至少一个信号传送域。
[0009]在一些实施方案中，所述胞外结合域包含表4中所述的抗ALK抗体的HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列。在一些实施方案中，所述胞外结合域还包含轻链互补决定区1(LCDR1)、轻链互补决定区2(LCDR2)和轻链互补决定区3(LCDR3)，其各自包含与表3中所述的抗ALK抗体的LCDR1、LCDR2和LCDR3序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述胞外结合域包含表3中所述的抗ALK抗体的LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列。
[0010]在另一方面，本专利技术提供一种间变性淋巴瘤激酶嵌合抗原受体(ALK CAR)，包含：胞外结合域，其包含重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包含与表2中所述的抗ALK抗体的VH至少80％相同的氨基酸序列，其中，所述胞外结合域特异性结合至间变性淋巴瘤激酶(ALK)多肽或其抗体结合片段；和跨膜域；和至少一个信号传送域。
[0011]在一些实施方案中，所述胞外结合域包含表2中所述的抗ALK抗体的VH。在一些实施方案中，所述胞外结合域还包含轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包含与表1中所述的抗ALK抗体的VL至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述胞外结合域包含表1中所述的抗ALK抗体的VL。在一些实施方案中，所述VH包含人类框架区。在一些实施方案中，所述VL包含人类框架区。
[0012]在一些实施方案中，ALK CAR包含接头。在一些实施方案中，所述接头是柔性肽接头。在一些实施方案中，所述接头是(Gly4Ser)
n
。在一些实施方案中，所述ALK CAR包含报导基因。在一些实施方案中，所述报导基因是绿色荧光蛋白(GFP)。在一些实施方案中，所述胞外结合域是scFv。
[0013]在一些实施方案中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨基酸序列SYWMN、QIYPGDGDTNYNGKFKG和YYYGSKAY，和VL CDR氨基酸序列RASENIYYSLA、NANSLED、KQAYDVPFT。
[0014]在一些实施方案中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨基酸序列SYWMH、RIDPNSGGTKYNEKFKS和DYYGSSYRFAY，和VL CDR氨基酸序列SVSQGISNSLN、YTSSLHS和QQYSKLPLT。
[0015]在一些实施方案中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨基酸序列NYWMH、YINPSSGYTKYNQKFKD和DYYGSSSWFAY，和VL CDR氨基酸序列KASQNVGTNVA、SASYRYS和QQYNSYPYMYT。
[0016]在一些实施方案中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨基酸序列SYWVN、QIYPGDGDTNYNGKFKG和SRGYFYGSTYDS，和VL CDR氨基酸序列RASESVDNYGISFMN、AASNQGS和QQSKEVPWT。
[0017]在一些实施方案中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨基酸序列SYWMH、YIKPSSGYTKYNQKFKD和DYYGSSSWFAY，和VL CDR氨基酸序列KASQNVGTNVA、SASYRYS和QQYNSYPYMYT。
[0018]在一些实施方案中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨基酸序列SYAMS、YISSGGDYIYYADTVKG和ERIWLRRFFDV，和VL CDR氨基酸序列KASQNVGTAVA、SASNRFT和QQYSSYPLT。
[0019]在一些实施方案中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨基酸序列SYWMH、YINPSSGYTKYNQKFKD和DYYGSSSWFAY，和VL CDR氨基酸序列KASQNVGTNVA、SASYRYS和QRYNSYPY本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种间变性淋巴瘤激酶嵌合抗原受体(ALK CAR)，包含：胞外结合域，其包含重链互补决定区1(HCDR1)、重链互补决定区2(HCDR2)和重链互补决定区3(HCDR3)，其各自包含与表4中所述的抗ALK抗体的HCDR1、HCDR2和HCDR3序列至少80％相同的氨基酸序列，其中，所述胞外结合域特异性结合至间变性淋巴瘤激酶(ALK)多肽或其抗体结合片段；跨膜域；和至少一个信号传送域。2.根据权利要求1所述的ALK CAR，其中，所述胞外结合域包含表4中所述的抗ALK抗体的HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列。3.根据权利要求1或2中任一项所述的ALK CAR，其中，所述胞外结合域还包含轻链互补决定区1(LCDR1)、轻链互补决定区2(LCDR2)和轻链互补决定区3(LCDR3)，其各自包含与表3中所述的抗ALK抗体的LCDR1、LCDR2和LCDR3序列至少80％相同的氨基酸序列。4.根据权利要求3所述的ALK CAR，其中，所述胞外结合域包含表3中所述的抗ALK抗体的LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列。5.一种间变性淋巴瘤激酶嵌合抗原受体(ALK CAR)，包含：胞外结合域，其包含重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包含与表2中所述的抗ALK抗体的VH至少80％相同的氨基酸序列，其中，所述胞外结合域特异性结合至间变性淋巴瘤激酶(ALK)多肽或其抗体结合片段；和跨膜域；和至少一个信号传送域。6.根据权利要求5所述的ALK CAR，其中，所述胞外结合域包含表2中所述的抗ALK抗体的VH。7.根据权利要求5或6中任一项所述的ALK CAR，其中，所述胞外结合域还包含轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包含与表1中所述的抗ALK抗体的VL至少80％相同的氨基酸序列。8.根据权利要求7所述的ALK CAR，其中，所述胞外结合域包含表1中所述的抗ALK抗体的VL。9.根据权利要求5或6中任一项所述的ALK CAR，其中，所述VH包含人类框架区。10.根据权利要求7或8中任一项所述的ALK CAR，其中，所述VL包含人类框架区。11.根据权利要求1至10中任一项所述的ALK CAR，还包含接头。12.根据权利要求11所述的ALK CAR，其中，所述接头是柔性肽接头。13.根据权利要求11或12中任一项所述的ALK CAR，其中，所述接头是(Gly4Ser)
n
。14.根据权利要求1至13中任一项所述的ALK CAR，还包含报导基因。15.根据权利要求14所述的ALK CAR，其中，所述报导基因是绿色荧光蛋白(GFP)。16.根据权利要求1至15中任一项所述的ALK CAR，其中，所述胞外结合域是scFv。17.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨基酸序列SYWMN、QIYPGDGDTNYNGKFKG和YYYGSKAY，和VL CDR氨基酸序列RASENIYYSLA、NANSLED、KQAYDVPFT。18.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨
基酸序列SYWMH、RIDPNSGGTKYNEKFKS和DYYGSSYRFAY，和VL CDR氨基酸序列SVSQGISNSLN、YTSSLHS和QQYSKLPLT。19.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨基酸序列NYWMH、YINPSSGYTKYNQKFKD和DYYGSSSWFAY，和VL CDR氨基酸序列KASQNVGTNVA、SASYRYS和QQYNSYPYMYT。20.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨基酸序列SYWVN、QIYPGDGDTNYNGKFKG和SRGYFYGSTYDS，和VL CDR氨基酸序列RASESVDNYGISFMN、AASNQGS和QQSKEVPWT。21.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨基酸序列SYWMH、YIKPSSGYTKYNQKFKD和DYYGSSSWFAY，和VL CDR氨基酸序列KASQNVGTNVA、SASYRYS和QQYNSYPYMYT。22.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨基酸序列SYAMS、YISSGGDYIYYADTVKG和ERIWLRRFFDV，和VL CDR氨基酸序列KASQNVGTAVA、SASNRFT和QQYSSYPLT。23.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH CDR氨基酸序列SYWMH、YINPSSGYTKYNQKFKD和DYYGSSSWFAY，和VL CDR氨基酸序列KASQNVGTNVA、SASYRYS和QRYNSYPYMFT。24.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH氨基酸序列QVQLQQSGAELVKPGASVKISCKASGYAFSSYWMNWVKQRPGKGLEWIGQIYPGDGDTNYNGKFKGKATLTADKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYFCASYYYGSKAYWGQGTLVTVSA，和VL氨基酸序列DIQMTQSPASLAASVGETVTITCRASENIYYSLAWYQQKQGKSPQLLIYNANSLEDGVPSRFSGSGSGTQYSMKINSMQPEDTATYFCKQAYDVPFTFGSGTKLEIKR。25.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH氨基酸序列QVQLQQPGAEFVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGRGLEWIGRIDPNSGGTKYNEKFKSKATLTVDKPSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCARDYYGSSYRFAYWGQGTLVTVSA，和VL氨基酸序列AIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCSVSQGISNSLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSSLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEPEDIATYYCQQYSKLPLTFGAGTKLELKR。26.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH氨基酸序列QVQLQQSGAELAKPGASVKLSCKASGYTFTNYWMHWVKQRPGQGLEWIGYINPSSGYTKYNQKFKDKATLTADKSSSTAYMQLSSLTYEDSAVYYCARDYYGSSSWFAYWGQGTLVTVSA，和VL氨基酸序列DIVMTQSQRFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKALIYSASYRYSGVPDRFTGSGSGTDFTLTVSNVQSEDLAEYFCQQYNSYPYMYTFGGGTKLEIKR。27.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH氨基酸序列QVQLQQSGAELVKPGASVKISCKASGYAFSSYWVNWVKQRPGKGLEWIGQIYPGDGDTNYNGKFKGKATLTADKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYFCARSRGYFYGSTYDSWGQGTTLTVSS，和VL氨基酸序列DIVLTQSPASLAVSLGQRATISCRASESVDNYGISFMNWFQQKPGQPPKLLIYAASNQGSGVPARFSGSGSGTDFSLNIHPMEEDDTAMYFCQQSKEVPWTFGGGTKLEIKR。28.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH氨基酸序列QVQLQQSGAELAKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGYIKPSSGYTKYNQKFKDKATLTA
DKSSSTAYMQLSSLTYEDSAVYYCARDYYGSSSWFAYWGQGTLVTVSA，和VL氨基酸序列DIVMTQSQRFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKALIYSASYRYSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLAEYFCQQYNSYPYMYTFGGGTKLEIKR。29.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH氨基酸序列DVKLVESGEGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSSYAMSWVRQTPEKRLEWVTYISSGGDYIYYADTVKGRFTISRDNARNTLYLQMSSLKSEDTAMYYCTRERIWLRRFFDVWGTGTTVTVSS，和VL氨基酸序列DIVMTQSQKFMSTSVGDRVSITCKASQNVGTAVAWYQLKPGQSPKLLIYSASNRFTGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNMQSEDLADYFCQQYSSYPLTFGSGTKLEIKR。30.根据权利要求1至16中任一项所述的ALK CAR，其中，所述抗ALK抗体包含VH氨基酸序列QVQLQQSGAELAKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGYINPSSGYTKYNQKFKDKATLTADKSSSTAYMQLSSLTFEDSAVYYCARDYYGSSSWFAYWGQGTLVTVSA，和VL氨基酸序列DIVMTQSQKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGHSPKALIYSASYRYSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLAEYFCQRYNSYPYMFTFGGGTKLEIKR。31.根据权利要求1至30中任一项所述的ALK CAR，其中，所述跨膜域是选自由CD8、CD137(4
‑
1BB)和CD28所组成的群组。32.根据权利要求31所...

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：儿童医疗中心有限公司，
类型：发明
国别省市：