【技术实现步骤摘要】
本申请涉及狼疮性肾炎检测，特别是涉及一种狼疮性肾炎生物标志物及其应用。
技术介绍
1、狼疮性肾炎(ln)是系统性红斑狼疮(sle)的常见后果，其以显著的死亡率为特征。大约50％的sle患者有发展成ln的风险。目前，ln的治疗主要涉及免疫抑制疗法，通常采用环磷酰胺或麦考酚酸酯联合糖皮质激素。然而，这些治疗方法伴随着一系列不良反应，使治疗依从性具有挑战性，并导致治疗失败和难治性ln。在10年内，有超过10％的ln患者发展成终末期肾脏疾病。早期诊断和干预对于降低终末期肾脏疾病的风险和改善患者预后至关重要。发现新的与ln相关的生物标志物和治疗靶点对于提高患者的治疗结果和预后至关重要。
2、目前，肾脏活检是ln诊断的金标准，但可能导致侵入性损伤，因此需要探索非侵入性方法。考虑到sle的全身性特点，多个器官受累和存在各种阳性自身抗体，基因表达分析外周血细胞已成为ln生物标志物的宝贵来源；并且，因外周血细胞的易获取性而备受关注。从外周血中开发可靠的ln相关候选生物标志物能为诊断和监测疾病进展提供一种更少侵入性和更易获得的方法。
3、因此，研发新的与ln相关的生物标志物和治疗靶点对于早期诊断、提高患者治疗结果和预后具有重要意义。
技术实现思路
1、本申请的目的是提供一种新的狼疮性肾炎生物标志物及其应用。
2、本申请采用了以下技术方案：
3、本申请的第一方面公开了col6a3作为狼疮性肾炎生物标志物或治疗靶点的应用。
4、本申请的第二方面公
5、需要说明的是，本申请的关键在于研究发现了一个新的与ln相关的生物标志物和治疗靶点，即col6a3，对于提高患者的治疗结果和预后至关重要。接收者操作特征分析进一步验证了col6a3的诊断价值，在内部队列中的接收者操作特征曲线下面积值为0.879，在管状体和肾小球外部队列样本中分别为0.802和0.915。此外，qpcr实验验证了scrna-seq和蛋白质组学研究中获得的结果。这些结果证明了col6a3是可以作为生物标志物和治疗靶点，推动了ln的个体化医学策略。本申请的狼疮性肾炎生物标志物col6a3，尤其适用于从系统性红斑狼疮的患者中特异性的检测狼疮性肾炎患者，能够有效的替换目前狼疮性肾炎的诊断金标准肾脏活检，从而避免由此导致的侵入性损伤。
6、还需要说明的是，本申请将col6a3作为狼疮性肾炎生物标志物，可以是col6a3核酸或者col6a3核酸编码蛋白，例如根据col6a3核酸表达水平，或col6a3核酸编码蛋白表达水平，诊断狼疮性肾炎。其中，col6a3核酸表达水平可以通过检测dna、rna或mrna判断；col6a3核酸编码蛋白表达水平可以通过检测col6a3核酸编码蛋白与其特异性多肽相互结合的水平表征。本申请中，分析对象可以是采集的样本，例如通过检测采集的样本中的col6a3核酸表达水平或col6a3核酸编码蛋白表达水平，诊断狼疮性肾炎；或者，根据现有数据直接分析col6a3核酸表达水平或col6a3核酸编码蛋白表达水平，以此诊断狼疮性肾炎。因此，col6a3在制备狼疮性肾炎诊断试剂中的应用主要是指，针对col6a3核酸或者col6a3核酸编码蛋白设计特异性的检测试剂。
7、本申请的第三方面公开了一种用于狼疮性肾炎诊断的试剂，该试剂为检测col6a3核酸的试剂和/或检测col6a3核酸编码蛋白的试剂。
8、需要说明的是，本申请的关键在于研究发现col6a3可以作为狼疮性肾炎生物标志物；因此，可以将检测col6a3核酸的试剂和/或检测col6a3核酸编码蛋白的试剂作为狼疮性肾炎诊断的试剂。
9、本申请的一种实现方式中，检测col6a3核酸的试剂包括针对col6a3核酸设计的特异性引物和/或探针，检测col6a3核酸编码蛋白的试剂包括特异性结合或识别col6a3核酸编码蛋白的多肽。
10、需要说明的是，本申请的特异性引物是指针对col6a3核酸设计的引物，例如基因测序法的引物、聚合酶链式反应法的引物、等温扩增反应法的引物，或其他能够检测col6a3核酸的引物；特异性探针是指针对col6a3核酸设计的探针，例如实时荧光定量pcr探针、基因芯片检测探针、探针杂交法的特异性探针，或其他能够检测col6a3核酸的探针。
11、本申请的一种实现方式中，col6a3核酸包括col6a3基因、截取自col6a3基因的dna片段、col6a3基因或其dna片段对应的rna、mrna、mirna或lncrna；多肽包括抗体、抗原结合片段、单链抗体和与col6a3基于编码蛋白特异性结合的配体中的至少一种。
12、需要说明的是，本申请的关键在于检测col6a3水平，检测对象可以是col6a3核酸，包括各种dna或rna，也可以是col6a3核酸编码蛋白。检测对象是col6a3核酸编码蛋白时，可以通过各种与之特异性结合的多肽进行检测，例如包括但不仅限于抗体、抗原结合片段、单链抗体、与col6a3核酸编码蛋白特异性结合的配体等。
13、本申请的一种实现方式中，检测col6a3核酸的试剂包括col6a3核酸特异性引物对和参考基因特异性引物对；col6a3核酸特异性引物对的上下游引物为seq id no.1和2所示序列，参考基因特异性引物对的上下游引物为seq id no.3和4所示序列；
14、seq id no.1：5’-ctgttcctctttgacggctca-3’
15、seq id no.2：5’-ccttgacatcatcgctgtactga-3’
16、seq id no.3：5’-agatccctccaaaatcaagtgg-3’
17、seq id no.4：5’-ggcagagatgatgaccctttt-3’。
18、需要说明的是，seq id no.1和2所示序列的col6a3核酸特异性引物对，和seq idno.3和4所示序列的参考基因特异性引物对，是本申请的一种实现方式中，具体采用的针对col6a3核酸设计的双重实时荧光pcr检测引物组合。可以理解，在本申请的专利技术构思基础上，不排除还可以设计出更多的引物组合，在此不作具体限定。
19、本申请的第四方面公开了一种用于狼疮性肾炎诊断的试剂盒，其特征在于：含有本申请的用于狼疮性肾炎诊断的试剂。
20、本申请的一种实现方式中，本申请的试剂盒还含有实时荧光pcr反应混合液。
21、需要说明的是，本申请的试剂盒，其关键在于针对col6a3核酸设计的特异性引物和/或探针，或者特异性结合或识别col6a3核酸编码蛋白的多肽；为了使用方便，检测col6a3核酸的试剂还可以包括与具体采用的检测方法相对应的常规试剂或组件，例如基因测序法、聚合酶链式反应法、等温扩增反应法、基因芯片法、探针杂交法、凝胶电泳法、rna印迹法、核酸质谱法或液相色谱法的常本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.COL6A3作为狼疮性肾炎生物标志物或治疗靶点的应用。
2.COL6A3在制备狼疮性肾炎诊断试剂中的应用。
3.一种用于狼疮性肾炎诊断的试剂，其特征在于：所述试剂为检测COL6A3核酸的试剂和/或检测COL6A3核酸编码蛋白的试剂。
4.根据权利要求3所述的试剂，其特征在于：所述检测COL6A3核酸的试剂包括针对COL6A3核酸设计的特异性引物和/或探针，所述检测COL6A3核酸编码蛋白的试剂包括特异性结合或识别COL6A3核酸编码蛋白的多肽。
5.根据权利要求4所述的试剂，其特征在于：所述COL6A3核酸包括COL6A3基因、截取自COL6A3基因的DNA片段、COL6A3基因或其DNA片段对应的RNA、mRNA、miRNA或LncRNA；
6.一种用于狼疮性肾炎诊断的试剂盒，其特征在于：含有权利要求3-5任一项所述的试剂。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于：还含有实时荧光PCR反应混合液。
8.一种评估或筛选狼疮性肾炎治疗剂的方法，其特征在于：包括对经治疗剂处理后的样本进行COL
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述COL6A3水平包括核酸水平或蛋白水平。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：所述核酸水平为DNA、RNA或mRNA的表达水平，所述蛋白水平为作为标志物的COL6A3核酸编码蛋白与其特异性多肽相互结合的水平。
...【技术特征摘要】
1.col6a3作为狼疮性肾炎生物标志物或治疗靶点的应用。
2.col6a3在制备狼疮性肾炎诊断试剂中的应用。
3.一种用于狼疮性肾炎诊断的试剂，其特征在于：所述试剂为检测col6a3核酸的试剂和/或检测col6a3核酸编码蛋白的试剂。
4.根据权利要求3所述的试剂，其特征在于：所述检测col6a3核酸的试剂包括针对col6a3核酸设计的特异性引物和/或探针，所述检测col6a3核酸编码蛋白的试剂包括特异性结合或识别col6a3核酸编码蛋白的多肽。
5.根据权利要求4所述的试剂，其特征在于：所述col6a3核酸包括col6a3基因、截取自col6a3基因的dna片段、col6a3基因或其dna片...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄晓彦，王梅英，牟丽莎，蒲祖辉，陆赢，
申请(专利权)人：北京大学深圳医院，
类型：发明
国别省市：
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