从黄花蒿中提取抑藻活性成分的方法及抑藻方法技术

本发明专利技术公开了一种从黄花蒿中提取抑藻活性成分的方法及抑藻方法，属于水体污染控制领域。为解决现有抑藻技术成本高、生态风险大、存在二次污染等问题，本发明专利技术公开了一种从陆生植物黄花蒿中提取和制备抑藻剂的方法。本发明专利技术的制备方法包括如下步骤：将烘干、粉碎后的黄花蒿使用石油醚、乙酸乙酯分级提取，石油醚提取液用稀酸洗涤后，使用稀碱反萃取得到有效成分和乙酸乙酯提取液依次用稀酸、稀碱洗涤后所得的有效成分合并，得到抑藻剂。此方法具有简单易行，成本低廉等优点，可以广泛应用于池塘、水库、湖泊等水体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于水体污染控制领域，特别涉及一种从天然植物黄花蒿中提取的抑藻活性成分的方法。
技术介绍
目前，控制水体藻华的方法主要有物理法，化学法和生物法，其中最常使用的方法 是化学法。 现有的化学除藻剂，主要是硫酸铜，机理是利用铜离子的毒性去干扰藻类光合反 应系统，使之无法正常进行光合作用，而最终达到灭杀藻类的目的。然而，铜离子是重金属 离子，不具有选择性，在杀藻的同时被其他水生植物和动物吸收或摄取，造成水体中的其他 生物的死亡，或者在生物体内累积最终给生态环境和人类健康造成破坏。 植物所产生的化感物质抑藻效果明显，环境友好，因此其作为新型的抑藻剂成为 趋势。在实际使用中，主要有两种方法一、将植物体绑扎后直接投放于水体，如大麦秸秆、 某些落叶等；二、从植物体中分离出化感物质，然后施用于水体。然而植物体直接投放于水 体不仅会破坏景观水体的美观效果，而且易产生二次污染，特别是当植物秸秆失去抑藻活 性后，大量的腐败潮湿的秸秆难于处理，限制了此方法的大规模使用；目前，抑藻的化感物 质的来源主要为各种大型的水生植物，由于水生植物受到环境条件所限，不易大范围的种 植和收获，限制了化感物质的提取，而且从水生植物体中分离化感物质也有具有分离成本 高，难度大等特点，不易在实际中使用。
技术实现思路
为了克服现有的植物抑藻在实际使用中存在的分离困难、成本高的缺点，本专利技术 提供一种，来源广泛、抑藻效果好、成本 低。 本专利技术的技术方案为一种从黄花蒿中提取抑藻活性成分的方法，采用有机溶剂 分级提取黄花蒿的活性成分，然后再经过酸和碱萃取、洗涤得到抑藻剂，具体步骤为 第一步，将洗净、烘干粉碎的黄花蒿使用低级烷烃溶剂提取2 5次，过滤，使用稀 酸洗涤滤液，再使用稀碱萃取酸洗后的滤液1 4次，取水相调节pH值在2 3之间，然后 再使用Cl C4的有机溶剂萃取，将萃取后的有机溶剂层浓縮得到抑藻活性成分一 ； 第二步，将第一步萃取后的黄花蒿残体使用Cl C4的有机溶剂提取1 3次，过 滤后使用稀酸洗涤滤液，然后再用稀碱洗涤，然后将洗涤后的滤液浓縮得到抑藻活性成分 所述的低级烷烃溶剂为石油醚或者正己烷。所述的Cl C4的有机溶剂为乙酸乙 酯、乙醚或者氯仿中的任意一种。所述的稀酸为质量百分比浓度为0.5 5%的盐酸或者硫 酸。所述的稀碱为质量百分比浓度为1 5%的氢氧化钠或者氢氧化钾。提取方法为超声 波辅助提取或索氏提取法。所述的黄花蒿为花期时的黄花蒿的地上部分。 使用从黄花蒿中提取的抑藻活性成分抑藻时，可以将抑藻活性成分一和抑藻活性 成分二分开或者合并作为抑藻剂使用，使用时浓度为50-200mg/L。 有益效果 1.本专利技术采用天然植物材料，环境亲和性强，使用中无二次污染。黄花蒿作为一种中药材，在我国分布广泛，种植普遍，原料易得，并且扩展了黄花蒿的使用范围。 2.该提取方法简单易行，提取的活性成分作为抑藻剂使用廉价无毒，成本低廉，有利于实际推广使用。 3.使用时不受地域、节气、温度等的限制。 附图说明 图1为藻类抑制剂制备工艺流程图。具体实施方式 实施例1 : 采集花期的黄花蒿地上部分，于8(TC烘干48小时，粉碎。称取粉碎后的黄花蒿 300g，在300W、40KHz的超声波中辅助作用下，使用1. 5L的石油醚提取两次，每次3小时。过 滤，将石油醚提取液合并，然后使用1L 0.5-5% wt盐酸溶液洗涤一次。酸洗后的石油醚提 取液使用2L的1_5%氢氧化钠溶液萃取两次，水相合并后用浓盐酸酸或者硫酸调pH = 2 3，使用0. 5L的乙酸乙酯萃取两次，乙酸乙酯层合并，浓縮，得到抑藻活性成份一 6. 5g。 将上述经石油醚浸提过的黄花蒿残体，在超声波中辅助作用下，使用1. 5L的乙酸 乙酯提取两次，每次3小时。过滤，乙酸乙酯层合并后使用1L的0. 5-5^wt盐酸洗涤一次， 1. 5L 1_5%氢氧化钠溶液洗涤两次后，将乙酸乙酯层浓縮得到抑藻活性成份二 7. 4g。 将抑藻活性成分一和抑藻活性成份二合并得抑藻活性物质13. 9g。 实施例2 : 采集花期的黄花蒿地上部分，于8(TC烘干48小时，粉碎。称取粉碎后的黄花 蒿60g，使用350ml的正己烷采用索氏提取器提取48小时后，将正己烷提取液使用200ml 0. 5-5%稀酸洗涤一次。酸洗后的正己烷提取液使用300ml的1_5%稀碱萃取2 3次，水 相合并后用调PH = 2 3，使用200ml乙醚萃取两次，乙醚层合并，浓縮，得到抑藻活性成份 一 1. 12g。 将上述经正己烷索氏提取过的黄花蒿残体，使用350ml的乙醚索氏提取48小时。 提取毕，乙醚层用200ml 0. 5-5X稀酸洗涤一次，300ml 1_5%稀碱洗涤2 3次后，将乙醚 层浓縮得到抑藻活性成份二 1. 33g。 将抑藻活性成分一和抑藻活性成份二合并得2. 45g。 实施例3 : 应用以上方法所得的抑藻剂对无菌培养的铜绿微囊藻进行急性毒性实验，每种药 物设定若干的浓度梯度，设置空白及两组平行，每24小时观察一次，连续观察5天，观察结 果以96小时的抑制率表示。结果如下 由实验例1所得的抑藻活性成份一，当浓度达到100mg/L时，其对藻类的抑制率达 到97%。 由实验例1所得的抑藻活性成份二，当浓度达到150mg/L时，其对藻类的抑制率达 到98%。 由实验例1所得的混合抑藻剂当浓度达到60mg/L时，其对藻类的抑制率达到 97%。 由实验例2所得的混合抑藻剂当浓度达到80mg/L时，其对藻类的抑制率达到 96%。 实施例4 : 应用以上方法所得的抑藻剂对模拟室外环境培养的铜绿微囊藻进行急性毒性实 验其中藻培养液取自湖泊原水，未采取任何灭菌措施，以保证模拟室外实际静水水体条 件。每种药物设定若干的浓度梯度，设置空白及两组平行，每24小时观察一次，连续观察5 天，观察结果以96小时的抑制率表示。 由实验例1所得的抑藻活性成份一，当浓度达到90mg/L时，其对藻类的抑制率达 到95%。 由实验例1所得的抑藻活性成份二，当浓度达到140mg/L时，其对藻类的抑制率达 到96%。 由实验例1所得的混合抑藻剂，当浓度达到70mg/L时，其对藻类的抑制率达到 96%。 由实验例2所得的混合抑藻剂，当浓度达到80mg/L时，其对藻类的抑制率达到 97%。实施例5 : 应用以上方法所得的抑藻剂对无菌培养的普通小球藻、水华鱼腥藻进行急性毒性 实验，每种药物设定若干的浓度梯度，设置空白及两组平行，每24小时观察一次，连续观察 5天，观察结果以96小时的抑制率表示。结果如下 由实验例1所得的混合抑藻剂当浓度达到100mg/L时，其对普通小球藻类抑制率 达到90%。 由实验例1所得的混合抑藻剂当浓度达到75mg/L时，其对水华鱼腥藻类的抑制 率达到95%。 实施例6 : 应用以上方法所得的抑藻剂对模拟室外环境培养的普通小球藻、水华鱼腥藻进行 急性毒性实验其中藻培养液取自湖泊原水，未采取任何灭菌措施，以保证模拟室外实际静 水水体条件。每种药物设定若干的浓度梯度，设置空白及两组平行，每24小时观察一次，连 续观察5天，观察结果以96小时的抑制率表示。 由实验例1所得的混合抑藻剂，当浓度达到160mg/L时，其对普通小球藻类本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从黄花蒿中提取抑藻活性成分的方法，其特征在于，采用有机溶剂分级提取黄花蒿的活性成分，然后再经过酸和碱萃取、洗涤得到抑藻剂，具体步骤为：第一步，将洗净、烘干粉碎的黄花蒿使用低级烷烃溶剂提取２～５次，过滤，使用稀酸洗涤滤液，再使用稀碱萃取酸洗后的滤液１～４次，取水相调节ｐＨ值在２～３之间，然后再使用Ｃ１～Ｃ４的有机溶剂萃取，将萃取后的有机溶剂层浓缩得到抑藻活性成分一；第二步，将第一步萃取后的黄花蒿残体使用Ｃ１～Ｃ４的有机溶剂提取１～３次，过滤后使用稀酸洗涤滤液，然后再用稀碱洗涤，然后将洗涤后的滤液浓缩得到抑藻活性成分二。

【技术特征摘要】
一种从黄花蒿中提取抑藻活性成分的方法，其特征在于，采用有机溶剂分级提取黄花蒿的活性成分，然后再经过酸和碱萃取、洗涤得到抑藻剂，具体步骤为第一步，将洗净、烘干粉碎的黄花蒿使用低级烷烃溶剂提取2～5次，过滤，使用稀酸洗涤滤液，再使用稀碱萃取酸洗后的滤液1～4次，取水相调节pH值在2～3之间，然后再使用C1～C4的有机溶剂萃取，将萃取后的有机溶剂层浓缩得到抑藻活性成分一；第二步，将第一步萃取后的黄花蒿残体使用C1～C4的有机溶剂提取1～3次，过滤后使用稀酸洗涤滤液，然后再用稀碱洗涤，然后将洗涤后的滤液浓缩得到抑藻活性成分二。2. 如权利要求1所述的从黄花蒿中提取抑藻活性成分的方法，其特征在于，所述的低 级烷烃溶剂为石油醚或者正己烷。3. 如权利要求l所述的从黄花蒿中提取抑藻活性成分的方法，其特征在于，所述的 Cl C4的...

【专利技术属性】
技术研发人员：倪利晓，李时银，郝向阳，于东盛，陈世金，任高翔，李晓东，
申请(专利权)人：河海大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]