酶解法生产根皮素的方法技术

本发明专利技术公开了一种酶解法生产根皮素的方法，包括如下步骤：将根皮苷质量含量为１０％～８０％的根皮苷原料溶于去离子水中；加入活化的ｓｉｎｏ－β水解酶，所述根皮苷原料与所述ｓｉｎｏ－β水解酶的质量比为１～５０∶１，在２０℃～９０℃，在搅拌下，酶解反应５～７２小时；迅速升温到６０℃～１００℃灭活１５～３５ｍｉｎ；固液分离，固体经干燥，得根皮素。本方法以植物中根皮苷为生产原料，原料易得，价格低廉，生产工艺简单，容易控制。本发明专利技术的方法酶解得到的苷元构型不被破坏，生理活性更强；酶解的专一性强，得到的产物中杂质极少，由于本发明专利技术的方法获得的根皮素呈白色，从而拓宽了根皮素的应用领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种根皮素的制备，特别是涉及一种。
技术介绍
根皮素是国外新近研究开发出来的一种新型天然皮肤美白剂，主要分布于苹果、 梨等多汁水果的果皮及根皮。其保湿作用非常强，能吸收本身重量4 5倍的水。能促进 配方中其它功能因子的吸收利用，使其发挥出更好的功效。抗氧化功能很强，能清除皮肤内 的自由基，对油脂的抗氧化浓度在(10 30)X10—6之间。能阻止糖类成分进入表皮细胞， 从而抑制皮腺的过度分泌，治疗分泌旺盛型粉剌；能抑制黑素细胞活性，对各种皮肤色斑有 淡化作用等。根皮素可应用于多个领域，如医药、保健品、食品等，生产根皮素的传统方法是 用有机化学方法合成，也可以通过天然的根皮苷进行酸解、碱解等方法获得。传统方法存在 有机物残留或酸、碱残留的不足。如酸解工艺得到的根皮素为粉红色，要得到白色的根皮素 还必须进行脱色这一步。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术存在的不足，提供一种。 本专利技术的技术方案概述如下 —种，包括如下步骤 (1)按质量比为1 : 10 50的比例，将根皮苷质量含量为10% 80%的根皮苷 原料溶于去离子水中； (2)加入经过在pH = 4. 0 5. O，温度20°C 60。C活化15 90min的sino-P 水解酶，所述根皮苷原料与所述sino-e水解酶的质量比为1 50 : 1，在2(TC 9(TC，在 搅拌下，酶解反应5 72小时； (3)迅速升温到60°C IO(TC灭活15 35min ; (4)固液分离，固体经干燥，得根皮素。 所述根皮苷原料与去离子水的质量比最好是1 : 35。 所述根皮苷质量含量为40 % 80 % 。所述sino-P水解酶的活化温度为40°C 45。C活化时间为20min。 所述步骤(2)中所述根皮苷原料与所述sino-l3水解酶的质量比为4 20 : 1。 所述步骤(2)中所述酶解的温度为40°C 6(TC，酶解反应时间为10 48小时。 所述步骤(3)灭活温度为80°C 90。C灭活时间为20min。 本专利技术的方法生产得到的根皮素为白色，克服了传统的工艺如酸解工艺得到的根 皮素为红棕色，若要获得白色的根皮素还必须进行脱色这一步骤。本专利技术的方法制备的根 皮素醇溶性好。 本方法以植物中根皮苷为生产原料，原料容易解决，价格低廉，生产工艺简单，容 易控制。最突出的优点是它不同于常规的糖苷的水解，酶解得到的苷元构型不被破坏，生理活性更强；酶解的专一性强，得到的产物中杂质极少，由于本专利技术的方法获得的根皮素呈白 色，从而拓宽了根皮素的应用领域，对生物技术应用具有新的突破。附图说明 图1为根皮苷酸解得到根皮素的照片。 图2为根皮苷酶解得到根皮素的照片。 图3为酸解的根皮素脱色后的照片。 图4为400mg酸解的根皮素溶于2ml无水乙醇的照片。 图5为400mg酶解的根皮素溶于2ml无水乙醇的照片。具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明。 实施例1 —种，包括如下步骤 (1)按质量比为1 : 30的比例，将根皮苷质量含量为10%的根皮苷原料溶于去离 子水中； (2)加入经过在pH = 4. 0，温度40。C活化15min的sino-P水解酶，所述根皮苷原 料与所述sino-P水解酶的质量比为10 : 1，在4(TC，在搅拌下，酶解反应72小时； (3)迅速升温到80。C灭活20min ; (4)固液分离，固体经干燥，得根皮素。根皮苷的酶解率可达到70%。 实施例2 —种，包括如下步骤 (l)按质量比为l : 10的比例，将根皮苷质量含量为50^的根皮苷原料溶于8(TC 去离子水中； (2)加入经过在pH = 5. 0，温度4(TC活化15min的sino-P水解酶，所述根皮苷原 料与所述sino-l3水解酶的质量比为20 : 1，在6(TC，在搅拌下，酶解反应48小时； (3)迅速升温到90。C灭活15min ; (4)固液分离，固体经干燥，得根皮素。根皮苷的酶解率可达到80%。 实施例3 —种，包括如下步骤 (1)按质量比为1 : 50的比例，将根皮苷质量含量为80%的根皮苷原料溶于88°〇 去离子水中； (2)加入经过在pH = 4. 0，温度45。C活化15min的sino-P水解酶，所述根皮苷原 料与所述sino-P水解酶的质量比为4 : l，在4(TC，在搅拌下，酶解反应10小时； (3)迅速升温到90。C灭活20min ; (4)固液分离，固体经干燥，得根皮素。根皮苷的酶解率可达到100%。 实施例4 —种，包括如下步骤 (1)按质量比为1 : 35的比例，将根皮苷质量含量为40%的根皮苷原料溶于去离4子水中； (2)加入经过在pH = 4. 0，温度20。C活化90min的sino- P水解酶，所述根皮苷原 料与所述sino-P水解酶的质量比为1 : 1，在9(TC，在搅拌下，酶解反应5小时； (3)迅速升温到IO(TC灭活15min ; (4)固液分离，固体经干燥，得根皮素。 实施例5 —种，包括如下步骤 (1)按质量比为1 : 35的比例，将根皮苷质量含量为60%的根皮苷原料溶于去离 子水中； (2)加入经过在pH = 4. 5，温度60。C活化40min的sino-P水解酶，所述根皮苷原 料与所述sino-l3水解酶的质量比为50 : 1，在2(TC，在搅拌下，酶解反应48小时； (3)迅速升温到60。C灭活35min ; (4)固液分离，固体经干燥，得根皮素。 实施例6 将400mg酸解法获得的根皮素溶于2ml无水乙醇，震荡，溶液为红褐色、底部有不 溶物；将400mg本专利技术的各实施例获得的根皮素溶于2ml无水乙醇，震荡，溶液澄清为淡黄 色，(见图1、图2、图3、图4和图5)则说明了本专利技术的方法制备的根皮素颜色好，醇溶性 好。 由于本专利技术的酶解反应的特殊性，使得酶解得到的苷元构型不被破坏，实验以中 性红为电化学探针，采用循环伏安法考察了本专利技术的方法获得的根皮素与DNA的相互作 用。在pH = 4. 1的Briton-Robinson缓冲溶液中，中性红在玻碳电极上产生一对明显的氧 化还原峰。随着DNA的加入，中性红(NR，分析纯，上海试剂三厂)的氧化还原峰电流ip明 显下降，表明NR与DNA结合，溶液中游离的中性红减少。向体系中继续加入根皮素，中性红 的氧化还原峰回升，体系中游离的中性红增多。由于药物与中性红在DNA上有共同的结合 位点，药物与DNA结合会游离出中性红。吸收光谱法证实了竞争结合的机制。则说明了本 专利技术的方法制备的根皮素的生理活性强。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种酶解法生产根皮素的方法，其特征包括如下步骤：（１）按质量比为１∶１０～５０的比例，将根皮苷质量含量为１０％～８０％的根皮苷原料溶于去离子水中；（２）加入经过在ｐＨ＝４．０～５．０，温度２０℃～６０℃活化１５～９０ｍｉｎ的ｓｉｎｏ－β水解酶，所述根皮苷原料与所述ｓｉｎｏ－β水解酶的质量比为１～５０∶１，在２０℃～９０℃，在搅拌下，酶解反应５～７２小时；（３）迅速升温到６０℃～１００℃灭活１５～３５ｍｉｎ；（４）固液分离，固体经干燥，得根皮素。

【技术特征摘要】
一种酶解法生产根皮素的方法，其特征包括如下步骤(1)按质量比为1∶10～50的比例，将根皮苷质量含量为10％～80％的根皮苷原料溶于去离子水中；(2)加入经过在pH＝4.0～5.0，温度20℃～60℃活化15～90min的sino-β水解酶，所述根皮苷原料与所述sino-β水解酶的质量比为1～50∶1，在20℃～90℃，在搅拌下，酶解反应5～72小时；(3)迅速升温到60℃～100℃灭活15～35min；(4)固液分离，固体经干燥，得根皮素。2. 根据权利要求1所述的一种酶解法生产根皮素的方法，其特征是所述根皮苷原料与 去离子水的质量比为1 : 35。3. 根据权利要求1所述的一种酶解法生产根皮素的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：於洪建，刘丹，孙华庚，陈国华，
申请(专利权)人：天津市尖峰天然产物研究开发有限公司，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]