LOC255313基因的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种ＬＯＣ２５５３１３基因的应用，用于制备诊断肝癌的产品和制备治疗肝癌的药物。本发明专利技术的ＬＯＣ２５５３１３基因，可作为诊断肝癌的特异标志基因，使肝癌诊断更加准确、快速，且为防治肝癌提供了新的治疗靶点和有效新药。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种基因，尤其涉及一种L0C255313基因的应用。
技术介绍
肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，是我国位居第二的癌症"杀手"，常见于中年男性。因其恶性度高、病情进展快，病人早期一般没有什么不适， 一旦出现症状就诊，往往已属中晚期。故治疗难度大、疗效差， 一般发病后生存时间仅为6个月，人称"癌中之王"。因此，提高肝癌早期诊断水平、选择科学合理的治疗方法和采取有效的预防复发转移措施将是改变这种局面的三个关键环节。目前诊断原发性肝癌最重要的肿瘤标志物是甲胎球蛋白(AFP)，但在我国原发性肝癌患者中，血清AFP水平高于正常值者只占60% 70%;其中只有约32%的患者血清AFP水平能达到诊断标准(>400yg/L)，其余均为低浓度阳性。此外，部分肝炎、肝硬变等非肝癌患者的血清AFP水平也可异常升高。这些都影响了 AFP这一指标的诊断特异性。因此，有待开发新的特异性肿瘤标记物，以提高原发性肝癌的诊断水平。此外，由于我国肝癌患者多合并严重的肝硬化，且易肝内播散和远处转移，使手术切除受到很大限制，而且放化疗在杀伤肿瘤细胞的同时，对正常细胞和免疫系统也有破坏和抑制作用。因此，治疗肝癌除了传统的手术、放疗、化疗方式外，还需要肿瘤治疗疫苗的辅助治疗。CT (Cancer-testis，肿瘤一睾丸)抗原，又称肿瘤共享抗原， 一般在正常组织中不表达，但在人生殖细胞系正常表达，在多种不同类型的肿瘤中也均有表达，包括黑色素瘤，膀胱癌，肺癌，肝癌等，这些具有免疫原性的蛋白正在被积极发展为肿瘤治疗疫苗的靶点。目前为止已有多达80多个CT抗原家族被鉴定。CT抗原在肿瘤形成中的作用也正在受到进一步评估，精子发生过程中的部分基因表达程序在肿瘤发生时重新开放，可能有助于恶性肿瘤的表型特征一永生化，侵袭性，免疫逃逸，基因组低甲基化和转移能力。CT抗原根据编码它们基因的染色体定位可分为X染色体连锁CT抗原(X-CT)和3常染色体(non-X CT)即非X染色体连锁抗原。在正常睾丸中X染色体连锁的CT抗原通常在精原细胞中表达，而精原细胞是在睾丸中保持不断增殖的一类生殖干细胞。由于生殖干细胞、发生于胚胎滋养层的细胞和肿瘤细胞有着许多共有的特征，在已知癌基因和抑癌基因无突变的情况下，原本已沉默的生殖细胞系特异性表达基因在肿瘤干细胞中被激活后可以调节肿瘤的恶性表型。值得强调的是，据估计X染色体上约有1(F。的基因属于X染色体连锁CT基因。因此，选取X染色体连锁的CT基因为对象研究其在肝癌发生发展中的作用机制。人LOC255313基因(Genbank No.刚_173571.1)是CT抗原家族的成员之一。关于L0C255313基因与肝癌发生的关系尚不清楚，有待进一步研究。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题之一是提供一种L0C255313基因的应用，该L0C255313基因可作为肝癌诊断的标记分子，提高了肝癌诊断的准确性。本专利技术要解决的技术问题之二是提供一种L0C255313基因在制备治疗肝癌的药物中的应用，使肿瘤的复发和转移得到有效控制。为了解决上述技术问题，本专利技术通过如下技术方案实现在本专利技术的一个方面，提供了一种L0C255313基因在制备诊断肝癌的产品中的应用。所述诊断肝癌的产品包括用RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或基因芯片诊断肝癌的产品。在本专利技术中，所述用RT-PCR诊断肝癌的产品至少包括一对特异扩增LOC255313基因的引物。所述用实时定量PCR诊断肝癌的产品至少包括一对特异扩增L0C255313基因的引物。所述用免疫检测诊断肝癌的产品包括与L0C255313蛋白特异性结合的抗体，包括多克隆抗体和单克隆抗体。所述用原位杂交诊断肝癌的产品包括与L0C255313基因的核酸序列杂交的探针。所述用基因芯片诊断肝癌的产品包括与L0C255313基因的核酸序列杂交的探针。在本专利技术中，可以使用一系列本领域已知的方法来制备针对L0C255313蛋白特异的抗体。例如，将提纯的人LOC255313基因产物或它的抗原片段注射入动物体内以产生多克隆抗体。同样，表达人L0C255313蛋白或它的抗原片段的细胞也可以用来对动物致免疫而产生抗体。根据本专利技术制备的抗体也可以是单克隆抗体，这些单克隆抗体可用杂交瘤技术制备(例如，Kohler et al. , Nature 256: 495, 1975; Kohler etal., Eur. J. Immunol. 6: 511, 1976; Kohler et al. ， Eur. J. Immunol. 6: 292，1976)。本专利技术的抗体包括可以阻抑L0C255313功能的抗体，也可以是不影响人L0C255313功能的抗体。每一类抗体都可以通过对人L0C255313基因产物的片段或功能域致免疫而产生，而人L0C255313基因产物及其片段可以用重组方法产生或用多肽合成仪进行合成。与非修饰形式的L0C255313基因产物结合的抗体，可以利用在原核细胞例如A 中产生的基因产物来免疫动物而得到。与翻译后修饰形式如糖基化或磷酸化L0C255313蛋白或多肽结合的抗体，可以利用在真核细胞如酵母或昆虫细胞中产生的基因产物来免疫动物而得到。在本专利技术中，所述探针可以是DNA、 RNA、 DNA-RNA嵌合体、PNA或其它衍生物。所述探针的长度没有限制，只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结合，任何长度都可以。所述探针的长度可短至25、 20、 15、 13或10个碱基长度。同样，所述探针的长度可长至60、 80、 100、 150、 300个碱基对或更长，甚至整个基因。由于不同的探针长度对杂交效率、信号特异性有不同的影响，所述探针的长度通常至少是14个碱基对，最长一般不超过30个碱基对，与目的核苷酸序列互补的长度以15-25个碱基对最佳。所述探针自身互补序列最好少于4个碱基对，以免影响杂交效率。在本专利技术的另一方面，提供了一种LOC255313基因在制备治疗肝癌的药物中的应用。所述治疗肝癌的药物包括通过RNA干扰抑制L0C255313基因表达的双链核糖核酸，或基于LOC255313抗原蛋白的肿瘤疫苗，或用于抑制LOC255313蛋白活性的蛋白质。在本专利技术中，所述RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA (double-stranded RNA， dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，该技术己被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。以细胞为基础的RNAi5筛选在功能基因学研究方面具有许多优势，主要表现在大多数细胞类型都能使用RNAi方法，并且相对较容易下调或沉默任何目的基因的表达。在本专利技术中，所述肿瘤疫苗是指用肿瘤组织中的特殊物质来激发患者体内的免疫功能，使患者的免疫功能能够杀伤肿瘤细胞。肿瘤疫苗主要指治疗性疫苗，是在病人得病后再用疫苗的方法进行治疗，以控制肿瘤的复发和转移。肿瘤疫苗具有个体性，因为每一个病人所得的肿瘤类型、分期都不一样，肿瘤细胞所表达的物质也不同，而肿瘤疫苗又是由病人本身的肿瘤制成，因此针对患者具体的肿瘤制备的肿瘤疫苗具有个本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种ＬＯＣ２５５３１３基因的应用，其特征在于，所述ＬＯＣ２５５３１３基因在制备诊断肝癌的产品中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄健，邓庆，韩泽广，
申请(专利权)人：上海人类基因组研究中心，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]