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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及临床用药后体内药代动力学检测,具体涉及一种用药患者血浆中抗人胸腺/淋巴细胞兔免疫球蛋白总igg抗体浓度检测试剂盒及其应用。
技术介绍
1、目前,尚未有关于抗人胸腺/淋巴细胞兔免疫球蛋白及其同类产品临床用药后体内药代动力学的检测方法,无法对用药效果及患者情况进行评估,无法指导临床用药。
技术实现思路
1、基于此,本专利技术提供了一种可以对用药患者血浆中抗人胸腺/淋巴细胞免疫球蛋白总igg抗体浓度进行检测的试剂盒及检测方法,该方法检测结果准确可靠。
2、本专利技术采用如下技术方案:
3、本专利技术提供一种用药患者血浆中抗人胸腺/淋巴细胞兔免疫球蛋白总igg抗体浓度检测试剂盒,包括采用鼠抗兔igg包被的酶标板、二抗辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体、tmb显色液、样品稀释液以及终止液;
4、还包括阳性对照和阴性对照,所述阳性对照为胸腺和/或淋巴细胞免疫健康兔,分离纯化后得到的兔抗人胸腺淋巴细胞免疫球蛋白,所述阴性对照为正常人血浆。
5、进一步,该试剂盒还包括标准品,所述标准品为胸腺和/或淋巴细胞免疫健康兔,分离纯化后得到的兔抗人胸腺淋巴细胞免疫球蛋白。
6、作为一种优选的实施方式,所述酶标板采用2μg/ml的鼠抗兔igg包被。
7、作为一种优选的实施方式,所述样品稀释液为含10v/v%胎牛血清的pbs缓冲液,所述终止液为2mol/l的硫酸溶液。
8、作为一种优选的实施方式,所述酶标板的制备方法如
9、本专利技术还提供了一种用药患者血浆中抗人胸腺/淋巴细胞兔免疫球蛋白总igg抗体浓度的检测方法,其特征在于,采用上述的试剂盒进行检测。
10、进一步,所述方法包括以下步骤:
11、将待测样品用样品稀释液稀释至线性范围内,然后加入到酶标板中,每孔50μl,37℃孵育1h;
12、洗涤酶标板后,将辣根过氧化物酶记的羊抗兔抗体稀释后作为二抗加入到酶标板中,每孔100μl,孵育1h;
13、洗板后加入tmb显色液100μl,反应5~10min后加入50μl终止液,立即使用酶标仪测定每孔的a450值。
14、作为一种优选的实施方式,所述待测样品稀释2500~5000倍,线性范围为0~0.25μg/ml。
15、作为一种优选的实施方式,加入到酶标板中的辣根过氧化物酶标记的抗体为20000倍稀释的辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体。
16、进一步,该方法还包括标准曲线的制定,将标准品用稀释液稀释至0~0.25μg/ml之间的浓度梯度,加入酶标板中进行检测。
17、与现有技术相比,本专利技术的有益效果为:建立了一种兔抗人淋巴细胞免疫蛋白/兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白临床用药后体内药代动力学的检测方法,该方法适用于抗人胸腺/淋巴细胞兔免疫球蛋白及其同类产品中用药患者血浆的检测,可对体内代谢及产品安全问题进行评估,检测结果准确可靠,
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1.用药患者血浆中抗人胸腺/淋巴细胞兔免疫球蛋白总IgG抗体浓度检测试剂盒,其特征在于,包括采用鼠抗兔IgG包被的酶标板、二抗辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体、TMB显色液、样品稀释液以及终止液;
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述酶标板采用2μg/mL的鼠抗兔IgG包被,所述样品稀释液为含10v/v%胎牛血清的PBS缓冲液,所述终止液为2mol/L的硫酸溶液。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述酶标板的制备方法如下:取0.5mg/mL的鼠抗兔IgG,用包被液稀释至2μg/mL包被酶标板,每孔50μL,酶标板经4℃过夜包被,用含0.05%吐温-20的PBS缓冲液洗板5次,拍干后加入200μL的含10%胎牛血清的PBS缓冲液进行封闭,37℃封闭2小时后洗涤酶标板。
4.用药患者血浆中抗人胸腺/淋巴细胞兔免疫球蛋白总IgG抗体浓度的检测方法,其特征在于,采用权利要求1~3任一项所述的试剂盒进行检测。
5.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
6.根据权利要求5所述的检测方法,其特
7.根据权利要求5所述的检测方法,其特征在于,加入到酶标板中的辣根过氧化物酶标记的抗体为20000倍稀释的辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体。
8.根据权利要求5所述的检测方法,其特征在于,还包括标准曲线的制定,将标准品用稀释液稀释至0~0.25μg/mL之间的浓度梯度,加入酶标板中进行检测。
...【技术特征摘要】
1.用药患者血浆中抗人胸腺/淋巴细胞兔免疫球蛋白总igg抗体浓度检测试剂盒,其特征在于,包括采用鼠抗兔igg包被的酶标板、二抗辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体、tmb显色液、样品稀释液以及终止液;
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述酶标板采用2μg/ml的鼠抗兔igg包被,所述样品稀释液为含10v/v%胎牛血清的pbs缓冲液,所述终止液为2mol/l的硫酸溶液。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述酶标板的制备方法如下:取0.5mg/ml的鼠抗兔igg,用包被液稀释至2μg/ml包被酶标板,每孔50μl,酶标板经4℃过夜包被,用含0.05%吐温-20的pbs缓冲液洗板5次,拍干后加入200μl的含10%胎牛血清的pbs缓冲液进行封闭,37℃...
【专利技术属性】
技术研发人员:余泽琼,耿鹏,聂希霖,邹浩勇,杨帆,殷文曲,周小璐,余沁宇,程斌,徐玉娟,邓晨,宋桂芝,杨金良,王胤霖,
申请(专利权)人:武汉中生毓晋生物医药有限责任公司,
类型:发明
国别省市:
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