【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
专利
本专利技术涉及特异性结合γδt细胞的t细胞受体的抗体和其片段和变体。
技术介绍
0、专利技术背景
1、对癌症的t细胞免疫疗法日益增长的兴趣集中在cd8+和cd4+αβ(alpha beta)t细胞亚群识别癌细胞和介导宿主保护性功能潜力的明显能力上，特别是当pd-1、ctla-4和其它受体发挥作用的抑制通路受到临床介导的拮抗作用而去抑制时。然而，αβt细胞受mhc限制，这可能导致移植物抗宿主病。
2、γδt细胞(gamma delta t细胞)代表在表面表达独特的、明确的γδt细胞受体(tcr)的t细胞亚群。该tcr由一条γ(gamma)链和一条δ(delta)链组成，每条链都经历链重排，但与αβt细胞相比，具有有限数量的v基因。编码vγ的主要trgv基因区段是trgv2、trgv3、trgv4、trgv5、trgv8、trgv9和trgv11，以及非功能基因trgv10、trgv11、trgva和trgvb。最常见的trdv基因区段编码vδ1、vδ2和vδ3，外加几个具有vδ和vα名称两者的v区段(adams等人，296：30-40(2015)cell immunol.)。人γδt细胞可根据它们的tcr链进行广泛分类，因为某些γ和δ类型在细胞上更普遍地(但不全是)在一种或多种组织类型中被发现。例如，大多数血液驻留γδt细胞表达vδ2 tcr，通常是vγ9vδ2，而这在组织驻留γδt细胞(诸如皮肤中的那些)中不太常见，组织驻留γδt细胞更频繁地使用与γ链配对(例如在肠道中常常与vγ4配对)的vδ
3、γδt细胞在免疫监测中发挥关键作用，通过应激标志物模式识别恶性或转化细胞(例如癌细胞)，然后发挥有效的和选择性的细胞毒性。因此，γδt细胞可充当免疫反应的协调者。即使是在已证明对其它免疫疗法具有挑战性的具有低突变负荷的肿瘤中，这些细胞的原位调节也提供增加免疫原性的潜力。γδt细胞对肿瘤的识别不依赖于任何单一的肿瘤抗原，因此γδt细胞的调节剂在一系列疾病适应症中具有潜力，所述适应症包括血液学和实体恶性肿瘤两者。γδt细胞的识别机制不受mhc限制。
4、wo2019147735的作者假设一些γδ细胞具有促肿瘤活性或抑制αβt细胞介导的抗癌免疫反应。作者假定γδt细胞是免疫抑制剂，因此建议在癌症环境中应借助抗体耗竭、抑制或阻断它们。
5、然而，尽管普遍认为抗γδ抗体会通过阻断或杀伤这类细胞来负向调节γδ细胞功能，但已发现γδt细胞浸润与患者的预后和/或生存之间存在正相关。
6、与αβtcr受体/配体相互作用相比，对vδ1 tcr受体/配体相互作用的了解有限。在缺乏这类了解的情况下，迄今为止识别vδ1 tcr的抗体主要是探索这类相互作用的探查性工具。这类工具通常是粗糙的阻断抗体，所述抗体表明tcr受体/配体相互作用导致vδ1+细胞的阻断、抑制或消融。例如，工具抗体ts8.2和ts-1在研究中用作抗γδ阻断抗体，表明所述抗体降低vδ1细胞的细胞毒性。这些研究与其它研究相结合，表明在原位疾病环境中使用这类抗vδ1抗体有利地调节vδ1细胞的细胞毒性是不可想象的，因此需要增加而不是降低vδ1细胞毒性的抗体。
7、要利用γδt细胞进行免疫疗法，需要一种原位扩增细胞，或收获它们并在重新输注前离体扩增它们的方式。先前已经描述了后一种方法，它使用外源细胞因子的添加，例如参见wo2017/072367和wo2018/212808。已经描述了扩增患者自身γδt细胞的方法，它们使用药理学修饰形式的羟基-甲基丁-2-烯基焦磷酸盐(hmbpp)或临床批准的氨基二膦酸盐。通过这些方法，超过250名癌症患者得到了治疗，看似安全，但完全缓解的几率很小。然而，仍然需要具有确认的扩增大量γδt细胞能力的激活剂。
8、此外，能够优先靶向或结合或识别或特异性调节或增加原位vδ1+细胞数目的结合剂或激活剂作为药物可能是非常理想的。
9、然而，虽然存在潜在调节vδ2+细胞的药物，包括氨基二膦酸盐如(唑来膦酸)，但所述药物主要设计用于减慢骨重吸收。无论所述vδ2+调节如何，都需要开发专门设计用于结合、靶向、调节、激活或增加vδ1+细胞数目的药物。这是因为，例如重复vδ2+调节可导致持久且逐渐耗尽的表型。
10、此外，鉴于vδ1+细胞占优势的组织驻留性质，能够调节vδ1+的理想药物也将表现出较少的‘脱靶’不良反应和快速的肾清除。通常，当采用小分子化学品时，可能出现所述不良反应。例如，显示能够调节单独类别的vδ2+细胞(作为相对于对骨的主要调节作用的次要作用)的前述氨基二膦酸盐与肾毒性相关，所述肾毒性表现为肾功能恶化和潜在的肾衰竭(例如markowitz等人(2003)kidney int.64(1)：281-289)。欧洲药品管理局列出的zometa的其它不良反应包括贫血、过敏反应、高血压、心房纤颤、肌痛、全身痛、不适、血尿素增加、呕吐、关节肿胀、胸痛等。
11、还必须进一步考虑vδ1+细胞自身所在的原位环境。例如，先前已经显示非造血组织驻留γδt细胞在首次与组织分离时显示强烈的增殖反应，但前提是它们不与自体成纤维细胞直接接触。已发现非造血组织驻留t细胞(γδt细胞)必须与非造血细胞(例如基质细胞，特别是成纤维细胞)分离才能发挥作用。这是因为淋巴细胞与基质细胞或上皮细胞的直接接触似乎会抑制组织驻留γδt细胞的扩增。原位预激活细胞以进一步抑制状态存在的观察结果是迄今为止vδ1细胞尚未被视为有希望的治疗靶标的另一个原因。事实上，直到本文所述的发现，才设想如何能够有利地和选择性地原位调节这些细胞，其中血液和组织vδ1+细胞通常被认为是‘静止的’、‘预激活的’或‘未激活的’。
12、已经为各种治疗用途开发了各种格式的双特异性和多特异性抗体。双特异性和多特异性抗体可基于生物靶标的类型和作用模式分为单独(尽管有重叠)的类别。例如，这类多特异性抗体可分为以下类别，例如细胞毒性效应细胞重定向剂(也称为双特异性t细胞募集抗体、双特异性t细胞衔接剂、tce或bite)和双重免疫调节剂(di)。
13、tce(t细胞衔接剂)旨在通过使t细胞靶向肿瘤细胞或相反来增强患者对肿瘤的免疫反应，并通过靶向t细胞的t细胞受体复合物的第一表位(通常是cd3)和作为癌症抗原或癌症相关抗原如肿瘤相关抗原(taa)的第二表位起作用。这类抗体共定位肿瘤细胞和t细胞以促进肿瘤细胞杀伤。bite的实例包括cd3×cd19双特异性抗体博纳吐单抗(blinatumomab)、cd3×epcam双特异性抗体卡妥索单抗(catumaxomab)和cd3×her2双特异性抗体厄妥索单抗(ertumaxomab)。tce如bite通常以scfv格式提供，但已经提供了其它格式。例如，bike与bite类似，但它们靶向nk细胞上的cd16，而不是cd3。
14、t细胞受体已被描述为哺乳动物免疫系统中最复杂的受体结构。它组成了包含紧邻许多cd3链的t细胞受体的跨膜多蛋白受体复合物。例如，在哺乳动物中，典型本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗TCRδ可变1(抗Vδ1)抗体或其抗原结合片段，所述抗Vδ1抗体或其抗原结合片段包含：
2.如权利要求1所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，所述抗Vδ1抗体或其抗原结合片段包含：
3.如权利要求1或权利要求2所述的抗TCR δ可变1(抗Vδ1)抗体或其抗原结合片段，所述抗V61抗体或其抗原结合片段包含：
4.如前述权利要求中任一项所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，所述抗Vδ1抗体或其抗原结合片段包含：
5.如前述权利要求中任一项所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，其中根据IMGT κ可变轻链序列编号系统，所述抗体或其抗原结合片段在位置74处包含除丝氨酸以外的氨基酸残基，任选地其中根据IMGT编号系统，位置74处的所述残基是亮氨酸残基。
6.一种抗TCR δ可变1(抗Vδ1)抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
7.一种抗TCR δ可变1(抗Vδ1)抗体或其抗原结合片段，其中所述抗Vδ1抗体或其抗原结合片段是亲本抗V61抗体或其抗原结合片段的亲和力成熟变体，其中所述亲本抗V61抗
8.一种抗Vδ1抗体或抗原结合片段，其中所述抗体是特异性结合以下表位的多特异性抗体：
9.一种抗TCR δ可变1(抗Vδ1)抗体或其抗原结合片段，所述抗Vδ1抗体或其抗原结合片段的特征在于它：
10.如前述权利要求中任一项所述的抗TCR δ可变1(抗Vδ1)抗体或其抗原结合片段，其中所述多特异性抗体经由ADCC和/或CDC引起小于约30％、或小于约20％、或小于约10％的活Vδ1 T+细胞群体耗竭。
11.如前述权利要求中任一项所述的抗TCR δ可变1(抗Vδ1)抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段以小于约10nM的KD结合于人TRVD1，任选地其中所述抗体或其抗原结合片段以小于约100nM的KD结合于食蟹猴TRVD1。
12.一种抗TCR δ可变1(抗Vδ1)抗体或其抗原结合片段，所述抗Vδ1抗体或其抗原结合片段以小于约10nM的KD特异性结合于人的γδT细胞受体(TCR)的可变δ1(Vδ1)链，任选地其中所述抗Vδ1抗体或其抗原结合片段以小于约100nM的KD结合于食蟹猴的γδ T细胞受体(TCR)的可变δ1(Vδ1)链。
13.如前述权利要求中任一项所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段：
14.如前述权利要求中任一项所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段只结合于SEQ ID NO：272、SEQ ID NO：306和/或SEQ ID NO：308的氨基酸残基1-90内的表位。
15.如前述权利要求中任一项所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段结合于以下氨基酸区域内的表位：
16.如前述权利要求中任一项所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，其中所述表位是γδ T细胞的激活表位，任选地其中所述激活表位的结合：(i)下调所述γδTCR；(ii)激活所述γδT细胞的脱粒；和/或(iii)促进γδT细胞介导的杀伤。
17.如权利要求16所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，其中所述激活表位的结合上调CD107a、CD25、CD69和/或Ki67的表达。
18.如前述权利要求中任一项所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是IgG抗体，任选地其中所述抗体是IgG1抗体。
19.如前述权利要求中任一项所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是特异性结合γδ T细胞受体(TCR)的可变δ1(Vδ1)链和第二抗原的多特异性抗体，其中所述第二抗原是癌症抗原或癌症相关抗原、免疫调节抗原或分化簇CD抗原。
20.如权利要求19所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，其中：
21.如权利要求1至18中任一项所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体不是双特异性抗体或多特异性抗体。
22.如权利要求1至20中任一项所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是双特异性抗体并且其中：
23.如前述权利要求中任一项所述的抗Vδ1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是Fc有效的。
24.一种药物组合物，所述药物组合物包含如权利要求1至22中任一项所述的抗体或其抗体结合片段和药学上可接受的稀释剂或载体。
25.一种治疗受试者的疾病或病症的方法或调节受试者中的免疫反应的方法，所述方法包括向所述受试者施用如权利要求1至22中任一项所述...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种抗tcrδ可变1(抗vδ1)抗体或其抗原结合片段，所述抗vδ1抗体或其抗原结合片段包含：
2.如权利要求1所述的抗vδ1抗体或其抗原结合片段，所述抗vδ1抗体或其抗原结合片段包含：
3.如权利要求1或权利要求2所述的抗tcr δ可变1(抗vδ1)抗体或其抗原结合片段，所述抗v61抗体或其抗原结合片段包含：
4.如前述权利要求中任一项所述的抗vδ1抗体或其抗原结合片段，所述抗vδ1抗体或其抗原结合片段包含：
5.如前述权利要求中任一项所述的抗vδ1抗体或其抗原结合片段，其中根据imgt κ可变轻链序列编号系统，所述抗体或其抗原结合片段在位置74处包含除丝氨酸以外的氨基酸残基，任选地其中根据imgt编号系统，位置74处的所述残基是亮氨酸残基。
6.一种抗tcr δ可变1(抗vδ1)抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
7.一种抗tcr δ可变1(抗vδ1)抗体或其抗原结合片段，其中所述抗vδ1抗体或其抗原结合片段是亲本抗v61抗体或其抗原结合片段的亲和力成熟变体，其中所述亲本抗v61抗体或其抗原结合片段包含：
8.一种抗vδ1抗体或抗原结合片段，其中所述抗体是特异性结合以下表位的多特异性抗体：
9.一种抗tcr δ可变1(抗vδ1)抗体或其抗原结合片段，所述抗vδ1抗体或其抗原结合片段的特征在于它：
10.如前述权利要求中任一项所述的抗tcr δ可变1(抗vδ1)抗体或其抗原结合片段，其中所述多特异性抗体经由adcc和/或cdc引起小于约30％、或小于约20％、或小于约10％的活vδ1 t+细胞群体耗竭。
11.如前述权利要求中任一项所述的抗tcr δ可变1(抗vδ1)抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段以小于约10nm的kd结合于人trvd1，任选地其中所述抗体或其抗原结合片段以小于约100nm的kd结合于食蟹猴trvd1。
12.一种抗tcr δ可变1(抗vδ1)抗体或其抗原结合片段，所述抗vδ1抗体或其抗原结合片段以小于约10nm的kd特异性结合于人的γδt细胞受体(tcr)的可变δ1(vδ1)链，任选地其中所述抗vδ1抗体或其抗原结合片段以小于约100nm的kd结合于食蟹猴的γδ t细胞受体(tcr)的可变δ1(vδ1)链。
13.如前述权利要求中任一项所述的抗vδ1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段：
14.如前述权利要求中任一项所述的抗vδ1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段只结合于seq id no：272、seq id no：306和/或seq id no：308的氨基酸残基1-90内的表位。
15.如前述权利要求中...
【专利技术属性】
技术研发人员：M·图纳，M·尤登，N·芒特，J·弗里德曼，O·波利亚科娃，R·古德，S·布姆布拉，A·麦金利，D·福克勒，
申请(专利权)人：伽马三角洲疗法有限公司，
类型：发明
国别省市：
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