新型抗体制造技术

本文提供了一种分离的抗体或其片段，所述分离的抗体或其片段与γδT细胞受体(TCR)的γ可变4(Vγ4)链特异性地结合而不与γδTCR的γ可变2(Vγ2)链特异性地结合。还提供了所述抗体的治疗方法和其它用途以及产生所述抗体的方法。体的方法。体的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新型抗体


[0001]本专利技术涉及针对γδT细胞的T细胞受体的抗体及其片段。

技术介绍

[0002]对癌症的T细胞免疫疗法日益增长的兴趣集中在CD8+和CD4+alpha beta(αβ)T细胞亚群识别癌细胞和介导宿主保护性功能潜力的明显能力上，特别是当PD
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1、CTLA
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4和其他受体所施加的抑制途径受到临床介导的拮抗作用去抑制时。然而，αβT细胞受MHC限制，这可导致移植物抗宿主病。
[0003]gamma delta T细胞(γδT细胞)代表在其表面表达独特的、定义γδT细胞受体(TCR)的T细胞的亚群。该TCR由一条gamma(γ)链和一条delta(δ)链组成，每条链都经历链重排，但与αβT细胞相比，具有有限数量的V基因。编码Vγ的主要TRVG基因区段是TRGV2、TRGV3、TRGV4、TRGV5、TRGV8、TRGV9和非功能基因TRGV10、TRGV11、TRGVA和TRGVB。最常见的TRDV基因区段编码Vδ1、Vδ2和Vδ3，外加几个同时具有Vδ和Vα名称的V区段(Adams等人,296:30
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40(2015)Cell Immunol.)。人γδT细胞可以根据它们的TCR链进行广泛分类，因为某些γ和δ类型在细胞上更普遍地(但不完全地)在一种或多种组织类型中被发现。例如，大多数血液驻留γδT细胞表达Vδ2TCR，通常是Vγ9Vδ2，而这在组织驻留γδT细胞(诸如皮肤中的那些)中不太常见，组织驻留γδT细胞更频繁地使用与γ链配对，例如常常与肠道中的Vγ4配对的Vδ1TCR。
[0004]然而，迄今为止，由于Vγ4TCR与其它TRGV家族成员(诸如Vγ2TCR)之间的高度同源性，能够仅靶向Vγ4TCR的形式尚不可能。因此，对于对Vγ4具有特异性的抗体(包括此类特异性地结合或调节Vγ4TCR的特异性抗体)的需要未得到满足。

技术实现思路

[0005]根据本专利技术的第一方面，提供了一种分离的抗体或其片段，该分离的抗体或其片段与γδT细胞受体(TCR)的γ可变4(Vγ4)链特异性地结合而不与γδTCR的γ可变2(Vγ2)链特异性地结合。应当理解，这是参考来自同一物种的Vγ4链和Vγ2。优选地，根据本文描述的所有方面和实施方案，该物种是智人(Homo sapiens)(人)并且因此本专利技术提供了一种分离的抗体或其片段，该分离的抗体或其片段与γδT细胞受体(TCR)的人γ可变4(Vγ4)链特异性地结合而不与γδTCR的人γ可变2(Vγ2)链特异性地结合。例如，人Vγ4链可以具有根据SEQ ID NO.1的氨基酸1
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99的序列并且/或者人Vγ2链可以具有根据SEQ ID NO.335的序列。在其它物种中，该分离的抗体或其片段与γδT细胞受体(TCR)的人γ可变4(Vγ4)链的物种特异性直系同源物特异性地结合，而不与γδTCR的人γ可变2(Vγ2)链的物种特异性直系同源物特异性地结合。因此，本专利技术提供了一种分离的抗体或其片段，该分离的抗体或其片段与具有对应于SEQ ID NO.1的氨基酸1
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99的序列的γδT细胞受体(TCR)的人γ可变4(Vγ4)链或其非人直系同源物特异性地结合，而不与具有对应于SEQ ID NO.335的序列的γδTCR的人γ可变2(Vγ2)链或其非人直系同源物特异性地结合。这种背景下的直系同
源物可以意指与参考序列具有最高序列相似性的γ链序列，或者优选具有相同功能(例如与体内直系同源配体具有相互作用)的γ链序列。例如，在小鼠中，依据Heilig和Tonegave命名法指定为Vγ7的蛋白质与人Vγ4在功能上最密切相关(Barros等人(2016)Cell,167:203
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218.e17)。
[0006]这是该领域的重大进步。例如，在人中，Vγ4链和Vγ2链高度同源(序列同一性为91％)，仅9个氨基酸方面存在差异。这九个变化中的三个变化映射跨越CDR1和CDR2，而这九个变化中的四个变化映射到框架区3(FR3)的亚区
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SEQ ID NO:1的氨基酸67
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82。由于Vγ4链与Vγ2链之间的序列相似性非常高，先前认为不可能开发出能够特异性地区分γδTCR的人Vγ4链和Vγ2链的抗体或其片段。令人惊讶地并且与本领域的普遍观点相反，专利技术人已经能够使用本文更详细描述的方法开发出此类抗体。因此，本专利技术提供了能够特异性地调节含Vγ4的γδTCR的抗体及其片段。
[0007]本专利技术的抗体或其片段可以与γδTCR的人Vγ4链的包含SEQ ID NO:1的氨基酸区域67
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82内的一个或多个氨基酸的表位结合。
[0008]根据本专利技术的进一步方面，提供了一种分离的抗Vγ4抗体或其片段，该分离的抗Vγ4抗体或其片段包含以下的一者或多者：
[0009]CDR3，其包含与SEQ ID NO:2
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47中的任一个，优选与SEQ ID NO:10和/或33具有至少80％序列同一性的序列；
[0010]CDR2，其包含与SEQ ID NO:48
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70和序列：A1
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A23(图1)中的任一个，优选与SEQ ID NO:56和/或A9具有至少80％序列同一性的序列；和/或
[0011]CDR1，其包含与SEQ ID NO:71
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116中的任一个，优选与SEQ ID NO:79和/或102具有至少80％序列同一性的序列。
[0012]在一些方面，分离的抗Vγ4抗体或其片段可以包含以下的一者或多者：
[0013]重链CDR3(HCDR3)，其包含与SEQ ID NO:2
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24中的任一个，优选与SEQ ID NO:10具有至少80％序列同一性的序列；
[0014]重链CDR2(HCDR2)，其包含与SEQ ID NO:48
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70中的任一个，优选与SEQ ID NO:56具有至少80％序列同一性的序列；和/或
[0015]重链CDR1(HCDR1)，其包含与SEQ ID NO:71
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93中的任一个，优选与SEQ ID NO:79具有至少80％序列同一性的序列。
[0016]可替代地或除此之外，分离的抗Vγ4抗体或其片段可以包含以下的一者或多者：
[0017]轻链CDR3(LCDR3)，其包含与SEQ ID NO:25
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47中的任一个，优选与SEQ ID NO:33具有至少80％序列同一性的序列；
[0018]轻链CDR2(LCDR2)，其包含与序列：A1
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A23(图1)中的任一个，优选与SEQ ID NO:A9具有至少80％序列同一性的序列；和/或
[0019]轻链CDR1(LCDR1)，其包含与SEQ ID NO:94
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116中的任一个，优选与SEQ ID NO:1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】NO:17的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:132；和VL，其包含具有SEQ ID NO:109的LCDR1、具有序列A16(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:40的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:155或276；(c)VH，其包含具有SEQ ID NO:73的HCDR1、具有SEQ ID NO:50的HCDR2和具有SEQ ID NO:4的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:119；和VL，其包含具有SEQ ID NO:96的LCDR1、具有序列A3(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:27的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:142或263；(d)VH，其包含具有SEQ ID NO:83的HCDR1、具有SEQ ID NO:60的HCDR2和具有SEQ ID NO:14的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:129；和VL，其包含具有SEQ ID NO:106的LCDR1、具有序列A13(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:37的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:152或273；(e)VH，其包含具有SEQ ID NO:84的HCDR1、具有SEQ ID NO:61的HCDR2和具有SEQ ID NO:15的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:130；和VL，其包含具有SEQ ID NO:107的LCDR1、具有序列A14(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:38的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:153或274；(f)VH，其包含具有SEQ ID NO:88的HCDR1、具有SEQ ID NO:65的HCDR2和具有SEQ ID NO:19的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:134；和VL，其包含具有SEQ ID NO:111的LCDR1、具有序列A18(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:42的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:157或278；(g)VH，其包含具有SEQ ID NO:92的HCDR1、具有SEQ ID NO:69的HCDR2和具有SEQ ID NO:23的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:138；和VL，其包含具有SEQ ID NO:115的LCDR1、具有序列A22(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:46的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:161或282；(h)VH，其包含具有SEQ ID NO:71的HCDR1、具有SEQ ID NO:48的HCDR2和具有SEQ ID NO:2的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:117；和VL，其包含具有SEQ ID NO:94的LCDR1、具有序列A1(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:25的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:140或261；(i)VH，其包含具有SEQ ID NO:72的HCDR1、具有SEQ ID NO:49的HCDR2和具有SEQ ID NO:3的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:118；和VL，其包含具有SEQ ID NO:95的LCDR1、具有序列A2(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:26的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:141或262；(j)VH，其包含具有SEQ ID NO:74的HCDR1、具有SEQ ID NO:51的HCDR2和具有SEQ ID NO:5的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:120；和VL，其包含具有SEQ ID NO:97的LCDR1、具有序列A4(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:28的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:143或264；(k)VH，其包含具有SEQ ID NO:75的HCDR1、具有SEQ ID NO:52的HCDR2和具有SEQ ID NO:6的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:121；和VL，其包含具有SEQ ID NO:98的LCDR1、具有序列A5(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:29的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:144或265；
(l)VH，其包含具有SEQ ID NO:76的HCDR1、具有SEQ ID NO:53的HCDR2和具有SEQ ID NO:7的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:122；和VL，其包含具有SEQ ID NO:99的LCDR1、具有序列A6(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:30的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:145或266；(m)VH，其包含具有SEQ ID NO:77的HCDR1、具有SEQ ID NO:54的HCDR2和具有SEQ ID NO:8的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:123；和VL，其包含具有SEQ ID NO:100的LCDR1、具有序列A7(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:31的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:146或267；(n)VH，其包含具有SEQ ID NO:78的HCDR1、具有SEQ ID NO:55的HCDR2和具有SEQ ID NO:9的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:124；和VL，其包含具有SEQ ID NO:101的LCDR1、具有序列A8(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:32的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:147或268；(o)VH，其包含具有SEQ ID NO:80的HCDR1、具有SEQ ID NO:57的HCDR2和具有SEQ ID NO:11的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:126；和VL，其包含具有SEQ ID NO:103的LCDR1、具有序列A10(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:34的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:149或270；(p)VH，其包含具有SEQ ID NO:81的HCDR1、具有SEQ ID NO:58的HCDR2和具有SEQ ID NO:12的HCDR3，任选地其中所述VH包含SEQ ID NO:127；和VL，其包含具有SEQ ID NO:104的LCDR1、具有序列A11(图1)的LCDR2和具有SEQ ID NO:35的LCDR3，任选地其中所述VL包含SEQ ID NO:150或271；(q)VH，其包含具有SEQ ID NO:82的HCDR1、具有...

【专利技术属性】
技术研发人员：O，
申请(专利权)人：伽马三角洲疗法有限公司，
类型：发明
国别省市：