【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】分离和扩增细胞的方法
专利
[0001]本专利技术涉及分离和/或扩增非造血组织驻留淋巴细胞(特别是γδT细胞)的方法。这样的γδT细胞包括非Vδ2细胞,例如Vδ1、Vδ3和Vδ5细胞以及此类非造血组织包括皮肤和肠道。应当理解,这种分离和/或扩增的非造血组织驻留淋巴细胞在过继T细胞疗法、嵌合受体疗法等中发现了巨大的实用性。本专利技术还涉及通过本文描述的方法产生的细胞。
[0002]专利技术背景
[0003]对用于癌症的T细胞免疫疗法日益浓厚的兴趣集中于CD8+和CD4+αβT细胞子集识别癌细胞并介导宿主保护性功能潜能的明显能力上,特别是被临床上介导的由PD
‑
1、CTLA
‑
4和其他受体发挥的抑制途径的拮抗作用压抑时。但是,αβT细胞是MHC限制的,其可以导致移植抗宿主病。
[0004]Gamma delta T细胞(γδT细胞)代表在其表面表达独特的、定义γδT细胞受体(TCR)的T细胞子集。这种TCR由一个gamma(γ)和一个delta(δ)链组成。人γδTCR链选自三个主要的δ链:Vδ1、Vδ2和Vδ3,以及六个γ链。人γδT细胞可以基于其TCR链进行广泛分类,因为某些γ和δ类型在一种或多种组织类型中的细胞上更为普遍,虽然不是排他地。例如,大多数血液驻留γδT细胞表达Vδ2TCR,例如Vγ9Vδ2,而这在组织驻留γδT细胞中不太常见,其在皮肤中更频繁地使用Vδ1,而在肠道中使用Vγ4。
[0005]分离淋巴细胞的大多数方法都依赖于从血液中分离那些细胞类型。非造血 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】 【专利技术属性】
【国外来华专利技术】的体积。15.根据权利要求12至14中任一项所述的方法,其中所述非造血组织样品具有约21mm3的体积。16.根据权利要求12至15中任一项所述的方法,其中所述非造血组织样品具有不超过250mm3的体积。17.根据权利要求12至16中任一项所述的方法,其中所述非造血组织样品具有不超过65mm3的体积。18.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述完整活检是通过穿孔活检获得的。19.根据权利要求18所述的方法,其中所述穿孔活检的直径为至少2mm。20.根据权利要求18所述的方法,其中所述穿孔活检的直径为约3mm。21.根据权利要求18所述的方法,其中所述穿孔活检的直径不超过8mm。22.根据权利要求18所述的方法,其中所述穿孔活检的直径不超过4mm。23.从非造血组织样品分离淋巴细胞的方法,其包括步骤:(i)将非造血组织样品放在包含透气材料的容器中;(ii)在IL
‑
2和IL
‑
15的存在下培养非造血组织样品;和(iii)收集从非造血组织样品培养的淋巴细胞群。24.从非造血组织样品分离γδT细胞的方法,其包括步骤:(i)将非造血组织样品放在包含透气材料的容器中;(ii)在IL
‑
2和IL
‑
15的存在下培养非造血组织样品;和(iii)收集从非造血组织样品培养的γδT细胞群。25.根据权利要求23或权利要求24所述的方法,其中所述容器包括液体密封容器,所述液体密封容器包含允许气体交换的透气材料。26.根据权利要求23至25中任一项所述的方法,其中所述容器的底部被配置成允许从所述容器的底部进行气体交换。27.根据权利要求23至26中任一项所述的方法,其中将将非造血组织样品置于容器内部的合成支架上。28.根据权利要求27所述的方法,其中所述合成支架是钽涂层的。29.根据权利要求27或权利要求28所述的方法,其中将合成支架配置成促进淋巴细胞从非造血组织样品排到容器底部。30.根据权利要求27至29中任一项所述的方法,其中将合成支架配置成促进γδT细胞从非造血组织样品排到容器底部。31.根据权利要求1、6、12和23中任一项所述的方法,其中从所述非造血组织样品的培养物收集的淋巴细胞群是αβT细胞群。32.根据权利要求1、6、12和23中任一项所述的方法,其中从所述非造血组织样品的培养物收集的淋巴细胞群是NK细胞群。33.根据任一前述权利要求所述的方法,其中所述非造血组织样品在培养之前不被切碎。34.根据之前任一项权利要求的方法,其中在培养至少7天后收集淋巴细胞或γδT细
胞。35.根据之前任一项权利要求的方法,其中在培养至少14天后收集淋巴细胞或γδT细胞。36.根据之前任一项权利要求的方法,其中在培养35天前收集淋巴细胞或γδT细胞。37.根据之前任一项权利要求的方法,其中在培养21天前收集淋巴细胞或γδT细胞。38.根据之前任一项权利要求的方法,其中在无血清培养基中培养非造血组织样品。39.根据权利要求1至37任一项的方法,其中在含有血清或血清替代物的培养基中培养非造血组织样品。40.根据之前任一项权利要求的方法,其中非造血组织样品是皮肤。41.根据权利要求40的方法,其中非造血组织样品包括表皮和真皮层。42.根据之前任一项权利要求的方法,其中非造血组织样品是肠或胃肠道。43.根据之前任一项权利要求的方法,其中非造血组织样品获自人。44.根据之前任一项权利要求的方法,其中IL
‑
2是人IL
‑
技术研发人员:S,
申请(专利权)人:伽马三角洲疗法有限公司,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。