System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种重组博卡病毒单VP2抗原蛋白及其表达体系和应用制造技术_技高网

一种重组博卡病毒单VP2抗原蛋白及其表达体系和应用制造技术

技术编号:41228920 阅读:2 留言:0更新日期:2024-05-09 23:45
本发明专利技术提供了一种重组博卡病毒单VP2抗原蛋白及其表达体系和应用,属于博卡病毒防疫技术领域。本发明专利技术提供了氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的重组博卡病毒单VP2抗原蛋白,该重组抗原蛋白免疫原性强,抗体滴度可达到1:3276800,在制备疫苗中具有良好前景,能够解决现有技术中嵌合病毒疫苗返强、昆虫表达体系成本较高、生产效率低的问题,通过本发明专利技术提供的重组博卡病毒单VP2蛋白能够实现高效表达,表达量为764ug/mL,在疫苗制备中具有生产高效的优势。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及博卡病毒防疫,尤其涉及一种重组博卡病毒单vp2抗原蛋白及其表达体系和应用。


技术介绍

1、博卡病毒(bocavirus)是细小病毒科细小病毒亚科的一个属,20世纪60年代初首次在动物上发现,与人类急性呼吸道感染密切相关。博卡病毒通常感染肠道和呼吸道。一些病毒可能会通过胎盘传播,导致胎儿先天感染。作为与人类急性呼吸道感染密切相关的新型病毒,人博卡病毒通过空气传播,容易使婴幼儿罹患肺炎、支气管炎和支气管肺炎等疾病。其主要临床表现为咳嗽、发热、喘息、腹泻等症状,高发人群为6个月至3岁的婴幼儿,高发季节为秋冬季。博卡病毒与其他呼吸道病毒的共感染率可高达51%,且更多地出现在只有低拷贝博卡病毒的患儿样品中。博卡病毒可以以低拷贝数长期存在于呼吸道、血液或尿液中达一个月之久。

2、现有技术中,疫苗免疫是防治所述病毒的有效手段,主要有嵌合病毒疫苗、灭活疫苗和亚单位疫苗等,例如中国专利cn105431170a公开了一种嵌合腺相关病毒/博卡病毒细小病毒载体,包含博卡病毒衣壳蛋白质和重组型腺相关病毒(aav)基因体。再如中国专利cn103740743a公开了一种表达猪博卡病毒vp2蛋白的重组杆状病毒及其应用,其中的重组杆状病毒rbv-vp2可以在昆虫细胞中大量表达产生vp2蛋白及病毒样颗粒,有望开发成一种有效的pbov vlps亚单位疫苗。

3、但是上述嵌合病毒疫苗理论上存在病毒反强的危险性、重组杆状病毒由于依赖昆虫表达体系,具有生产效率低、成本高的缺点。


技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种重组博卡病毒单vp2抗原蛋白及其表达体系和应用,以解决现有技术中博卡病毒疫苗存在风险、生产效率低的问题。

2、为了实现上述专利技术目的,本专利技术提供以下技术方案:

3、本专利技术提供了一种重组博卡病毒单vp2抗原蛋白,所述重组博卡病毒单vp2抗原蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

4、本专利技术还提供了编码上述重组博卡病毒单vp2抗原蛋白的基因,所述基因的核苷酸序列如seq id no.2所示。

5、本专利技术还提供了一种表达重组博卡病毒单vp2抗原蛋白的重组载体,所述重组载体包括初始载体和上述编码重组博卡病毒单vp2抗原蛋白的基因。

6、优选的,所述初始载体为pgex系列载体、pet系列载体或pmal系列载体。

7、优选的,所述初始载体为pet28a载体。

8、优选的,所述编码重组博卡病毒单vp2抗原蛋白的基因克隆至酶切位点bamh i和xho i之间。

9、本专利技术还提供了一种包含权利要求上述重组博卡病毒单vp2抗原蛋白的编码基因的重组菌株。

10、优选的,所述重组菌株通过iptg进行诱导表达。

11、优选的,所述iptg的浓度为0.2~0.8mmol/l;

12、所述诱导表达的温度为35~38℃;

13、所述诱导表达的时间为4~6h。

14、本专利技术还提供了上述重组博卡病毒单vp2抗原蛋白、重组载体、重组菌株在制备博卡病毒疫苗中的应用。

15、本专利技术的技术效果和优点:

16、本专利技术提供了氨基酸序列如seq id no.1所示的重组博卡病毒单vp2抗原蛋白,该重组抗原蛋白免疫原性强,抗体滴度可达到1:3276800,在制备疫苗中具有良好前景。

17、本专利技术所述的重组博卡病毒单vp2抗原蛋白采用特定的大肠杆菌表达系统进行制备,生产过程不含病原感染性物质,能够避免嵌合病毒疫苗返强、昆虫表达体系成本较高、生产效率低的缺陷,通过本专利技术提供的重组博卡病毒单vp2蛋白能够实现高效表达,表达量为764ug/ml,在疫苗制备中具有生产高效的优势。

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【技术保护点】

1.一种重组博卡病毒单VP2抗原蛋白,其特征在于,所述重组博卡病毒单VP2抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.编码权利要求1所述重组博卡病毒单VP2抗原蛋白的基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一种表达重组博卡病毒单VP2抗原蛋白的重组载体,其特征在于,所述重组载体包括初始载体和权利要求2所述的编码重组博卡病毒单VP2抗原蛋白的基因。

4.根据权利要求3所述的重组载体,其特征在于,所述初始载体为pGEX系列载体、pET系列载体或pMAL系列载体。

5.根据权利要求4所述的重组载体,其特征在于,所述初始载体为pET28a载体。

6.根据权利要求5所述的重组载体,其特征在于,所述编码重组博卡病毒单VP2抗原蛋白的基因克隆至酶切位点BamH I和Xho I之间。

7.一种包含权利要求2所述的重组博卡病毒单VP2抗原蛋白的编码基因的重组菌株。

8.根据权利要求7所述的重组菌株,其特征在于,所述重组菌株通过IPTG进行诱导表达。

9.根据权利要求8所述的重组菌株,其特征在于,所述IPTG的浓度为0.2~0.8mmol/L;

10.权利要求1所述的重组博卡病毒单VP2抗原蛋白、权利要求3~6任一项所述的重组载体、权利要求7~9任一项所述的重组菌株在制备博卡病毒疫苗中的应用。

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【技术特征摘要】

1.一种重组博卡病毒单vp2抗原蛋白,其特征在于,所述重组博卡病毒单vp2抗原蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.编码权利要求1所述重组博卡病毒单vp2抗原蛋白的基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列如seq id no.2所示。

3.一种表达重组博卡病毒单vp2抗原蛋白的重组载体,其特征在于,所述重组载体包括初始载体和权利要求2所述的编码重组博卡病毒单vp2抗原蛋白的基因。

4.根据权利要求3所述的重组载体,其特征在于,所述初始载体为pgex系列载体、pet系列载体或pmal系列载体。

5.根据权利要求4所述的重组载体,其特征在于,所述初始载体为pe...

【专利技术属性】
技术研发人员:柏振江时长军马佳君魏农张玥陆涛黄颖娟朱婷杨玲焰孟丽君杨小珊吕卓
申请(专利权)人:苏州大学附属儿童医院
类型:发明
国别省市:

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