【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物工程，具体涉及一株裂殖壶菌及其在发酵生产富含sn-2位dha藻油中的应用。
技术介绍
1、二十二碳六烯酸又被称为dha，分子式为c22h32o2，属于ω-3系列不饱和脂肪酸。dha在人体内主要分布在大脑灰质、神经系统、视网膜系统、心肌、嗜酸性白细胞和母乳等处，具有重要的生理功能。研究表明dha在sn-2位的特殊结构甘油三酯更利于人体吸收，甘油三酯结构的油脂经胰腺脂肪酶分解后，sn-1、sn-3位脂肪酸形成游离的脂肪酸，难以渗入胆盐微胶粒被人体吸收，从而容易与肠道中钙、镁离子结合形成不溶性的皂盐损失掉；而sn-2位脂肪酸形成单甘油酯，易渗入胆盐微胶粒被人体吸收，所以sn-2位脂肪酸比sn-1、sn-3位脂肪酸具有更高的人体吸收率。
2、裂殖壶菌(schizochytrium)又称裂壶藻，属于网粘菌门、网粘菌纲、破囊壶菌目、破囊壶菌科的一类海洋真菌，因其生长速度快、易于培养等特点，被广泛应用于科研和商业生产。目前，微生物法获取dha的主要来源是利用裂殖壶菌高密度发酵培养,其体内可积累大量脂肪，且70％以甘油三酯形式存在,其中dha可以占到总脂肪酸的45-55％。
3、目前微生物来源的dha油脂的甘油骨架上的分布比例是sn-2位的含量，远远低于sn-1、sn-3位的含量，大量sn-1、sn-3位dha在人体消化过程中形成皂盐而损失，微生物油脂的保健功效受到了限制。为提高人类对dha藻油的利用率，本专利技术生产出一种富含sn-2位dha藻油，相较与普通商品化藻油与天然dha更相似，提高了藻油中s
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一株裂殖壶菌及其在发酵生产富含sn-2位dha藻油中的应用，以解决
技术介绍
中的问题。
2、本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：
3、一株裂殖壶菌(schizochytrium sp.)tkd-2212，所述裂殖壶菌已于2022年12月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址位于中国-武汉-武汉大学，保藏编号为cctccno.m20221978。
4、裂殖壶菌菌落及细胞形态：裂殖壶菌(schizochytrium sp.)tkd-2212在海水培养基上，25℃培养7天，菌落直径为3-5mm，白色，后期为浅褐色；菌体壁薄，球形，透明，菌体直径为6.0-18.2μm。
5、裂殖壶菌rrna基因序列测定结果(18srrna序列片段)：
6、>rrna_scaffold34_21600-23382_dir+/molecule＝18s_rrna/score＝1330.9
7、atctggttgatcctgccagtagtcatatgctcgtctcaaagattaagccatgcatgtgtaagtataagcgattgtactgtgagactgcgaacggctcattatatcagtaataatttcttcggtagtttcttttatatggatacctgcagtaattctggaaataatacatgctgtaagagccctgtatggggctgcacttattagaatgaagccgattttattggtgaatcatgataattgagcagattgacatttttgtcgatgaatcgtttgagtttctgccccatcagttgtcgacggtagtgtattggactacggtgactataacgggtgacggagagttagggctcgactccggagagggagcctgagagacggctaccatatccaaggatagcagcaggcgcgtaaattacccactgtggactccacgaggtagtgacgagaaatatcgatgcgaagcgtgtatgcgttttgctatcggaatgagagcaatgtaaaaccctcatcgaggatcaactggagggcaagtctggtgccagcagccgcggtaattccagctccagaagcatatgctaaagttgttgcagttaaaaagctcgtagttgaatttctggcatgggcgaccggtgctttccctgaatggggattgattgtctgtgttgccttggccatctttctcatgctttattggtatgagatctttcactgtaatcaaagcagagtgttccaagcaggtcgtatgaccggtatgtttattatgggatgataagataggacttgggtgctattttgttggtttgcacgcctgagtaatggttaataggaacagttgggggtattcgtatttaggagctagaggtgaaattcttggatttccgaaagacgaactagagcgaaggcatttaccaagcatgttttcattaatcaagaacgaaagtctggggatcgaagatgattagataccatcgtagtctagaccgtaaacgatgccgacttacgattgttgggtgcttattaatgggcctcagcagcagcacatgagaaatcaaagtctttgggttccggggggagtatggtcgcaaggctgaaacttaaaggaattgacggaagggcaccaccaggagtggagcctgcggcttaatttgactcaacacgggaaaacttaccaggtccagacataggtaggattgacagattgagagctctttcatgattctatgggtggtggtgcatggccgttcttagttggtggagtgatttgtctggttaattccgttaacgaacgagacctcggcctactaaatagtgcgtggtatggcaacatagtgcgtttttacttcttagagggacatgtccggtttacgggcaggaagttcgaggcaataacaggtctgtgatgcccttagatgttctgggccgcacgcgcgctacactgatgggttcatcgggttttaattctgtttttatggaattgagtgcttggtcggaaggcctggctaatccttggaacgctcatcgtgctggggctagatttttgcaattattaatctccaacgaggaattcctagtaaacgcaagtcatcagcttgcattgaatacgtccctgccctttgtacacaccgcccgtcgcacctaccgattgaacggtccgatgaaaccatgggatgtttctgtttggattgatttttggacagaggcagaactcgggtgaatcttattgtttagaggaaggtgaagtcgtaacaaggtttccgtaggtgaacctgcggaaggatcatta。
8、一株裂殖壶菌及其在发酵生产富含sn-2位d本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株裂殖壶菌，其特征在于，其分类命名为裂殖壶菌(Schi zochytri umsp.)TKD-2212，所述裂殖壶菌已于2022年12月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址位于中国-武汉-武汉大学，保藏编号为CCTCCNo.M20221978。
2.根据权利要求1所述的裂殖壶菌在发酵生产富含Sn-2位DHA藻油中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述步骤一中的裂殖壶菌为富含Sn-2位DHA藻油的裂殖壶菌TKD-2212。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述步骤一中活化方法为：将所述裂殖壶菌按照8％接种量接种至种子培养基中，30℃恒温培养36h得到藻种，在从种子培养基中按照5％接种量接种至发酵培养基中，控制温度为30℃、转速180rpm培养得到种子液；所述种子培养基的制作过程包括：葡萄糖10g/L，酵母粉15g/L，蛋白胨5g/L，pH为6.5～7.0，115℃高压蒸汽灭菌30min；所述发酵培养基的制作过程包括：葡萄糖40g/L，酵
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述步骤二中发酵温度控制为20℃-28℃、转速为160-200rpm,使用3L、5L、10L种子罐进行进行发酵，发酵过程中发酵体系葡萄糖浓度低于5g/L时开始以0.8-1.2g/L/h速度流加高浓度葡萄糖补充碳源。
7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述步骤三具体酶法如下：在50℃-60℃、pH9-10条件下使用1.5％-2.5％的碱性蛋白酶破碎裂殖壶菌发酵液，之后加入发酵液等体积的正己烷常温搅拌萃取2h-3h，离心分离取上清液，萃取2-3次,得到粗DHA藻油。
8.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述步骤四具体方法为：在300～400Pa真空罐中添加油重0.1％-0.3％的85％磷酸以便于脱去藻油中胶类物质和醛酮类物质。
9.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述步骤五中醇解反应使用固定化脂肪酶，在20-30℃、非水相条件下添加藻油体积8～12％的固定化脂肪酶在转速为300～400rpm条件下醇解得到粗富含Sn-2位DHA藻油，之后使用乙醇和正己烷溶剂萃取纯化2-3次得到产物。
...【技术特征摘要】
1.一株裂殖壶菌，其特征在于，其分类命名为裂殖壶菌(schi zochytri umsp.)tkd-2212，所述裂殖壶菌已于2022年12月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址位于中国-武汉-武汉大学，保藏编号为cctccno.m20221978。
2.根据权利要求1所述的裂殖壶菌在发酵生产富含sn-2位dha藻油中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述步骤一中的裂殖壶菌为富含sn-2位dha藻油的裂殖壶菌tkd-2212。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述步骤一中活化方法为：将所述裂殖壶菌按照8％接种量接种至种子培养基中，30℃恒温培养36h得到藻种，在从种子培养基中按照5％接种量接种至发酵培养基中，控制温度为30℃、转速180rpm培养得到种子液；所述种子培养基的制作过程包括：葡萄糖10g/l，酵母粉15g/l，蛋白胨5g/l，ph为6.5～7.0，115℃高压蒸汽灭菌30min；所述发酵培养基的制作过程包括：葡萄糖40g/l，酵母粉15g/l，蛋白胨5g/l，ph6.5～7...
【专利技术属性】
技术研发人员：马长宏，
申请(专利权)人：安徽天凯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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