【技术实现步骤摘要】
本公开涉及分子生物学领域，尤其涉及一种用于核酸杂交的组合物及其应用。
技术介绍
1、核酸测序是分子生物学中最为广泛使用的分析工具。随着测序技术的发展，其已经成为临床和生命科学研究的重要手段。然而，虽然测序技术取得了很大进步，但是由于相关的工作流程比较复杂，持续时间较长，因此仍然伴随巨大的费用和工作量。
2、为了提高效率，在测序中对某些靶标核酸序列进行富集，使得能够将测序集中在被富集的核酸序列，从而可以仅对感兴趣的靶序列进行测序，减少了成本并使得每次测序能够对更多的样品进行分析。
3、核酸杂交捕获是常用的一种核酸富集方法。目前市场上有多种杂交捕获试剂，杂交时间较长，这使得一些基于靶向捕获检测技术的临床检测手段无法在更短的时间内出结果。另外，杂交捕获清洗的过程中，涉及到过多的清洗液，操作不方便。
4、因此亟需一种体系或方法来降低工作流程的复杂性、减少杂交捕获时间，并且保证靶序列或区域的特异且均一的杂交捕获。
技术实现思路
1、为了解决现有技术中存在的至少一个技术问题，本公开提供了一种含有三价阳离子的组合物，以及所述组合物在核酸杂交捕获中的应用。应用本公开所述组合物，能够加快杂交反应进程，缩短杂交时间，并获得良好的杂交捕获效果。
2、本公开第一方面提供了一种用于核酸杂交的组合物，所述组合物包括三价阳离子盐。
3、通过采用本公开提供的组合物，可以在2小时以内的时间内完成杂交捕获，甚至可以在1个小时以内完成杂交捕获。
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5、在一些实施方式中，所述三价阳离子为络合的三价阳离子形式。
6、在一些具体实施方式中，所述络合的三价阳离子包括但不限于氨络合物[x(nh3)6]3+、联砒啶络合物[x(dpy)3]3+、乙二胺络合物[x(en)3]3+，x为三价阳离子。
7、在一些实施方式中，所述三价阳离子为氨络合的三价阳离子。
8、在一些实施方式中，所述三价阳离子为氨、乙二胺等络合的三价阳离子。
9、在一些实施方式中，所述氨络合三价阳离子包括五氨络合三价阳离子或六氨络合三价阳离子。
10、在一些实施方式中，所述氨络合三价阳离子包括三价六氨络合钴[co(nh3)6]3+、三价六氨络合铱([ir(nh3)6]3+、三价六氨络合铑[rh(nh3)6]3+、三价六氨络合铬[cr(nh3)6]3+等或其螯合物。
11、在一些具体的实施方式中，所述氨络合三价阳离子包括六氨合氯化钴。
12、在一些实施方式中，所述三价阳离子浓度为0.2～15mm。
13、在一些实施方式中，所述三价阳离子浓度选自0.2mm、0.3mm、0.4mm、0.5mm、
14、0.6mm、0.7mm、0.8mm、0.9mm、1.0mm、2.0mm、3.0mm、4.0mm、5.0mm、6.0mm、
15、7.0mm、8.0mm、9.0mm、10.0mm、11.0mm、12.0mm、13.0mm、14.0mm或15.0mm。
16、在一些实施方式中，所述三价阳离子浓度为1.0～5.0mm。
17、在一些实施方式中，所述组合物还可以包括添加剂，所述添加剂选自以下物质中的一种或多种：甘氨酸、甜菜碱、甘氨酸-甜菜碱、7-脱氮-2'-脱氧鸟苷、二甲亚砜(dmso)、聚乙二醇400～1,000,000、甘油、镁、四甲基氯化铵(tmac)、四乙基氯化铵(teac)、三乙胺盐酸盐、碳酸亚乙酯、硫酸葡聚糖、n-甲基吡咯烷酮或denhandt’s溶液。
18、在一些实施方式中，所述组合物选自甜菜碱、四甲基氯化铵(tmac)、n-甲基吡咯烷酮。
19、在一些实施方式中，所述甜菜碱的浓度选自0.5～5m。
20、在一些实施方式中，所述甜菜碱的浓度选自0.5m、0.6m、0.7m、0.8m、0.9m、1m、1.1m、1.2m、1.3m、1.4m、1.5m、1.6m、1.7m、1.8m、1.9m、2m、2.1m、2.2m、2.3m、2.4m、2.5m、2.6m、2.7m、2.8m、2.9m、3m、3.1m、3.2m、3.3m、3.4m、3.5m、3.6m、3.7m、3.8m、3.9m、4m、4.1m、4.2m、4.3m、4.4m、4.5m、4.6m、4.7m、4.8m、4.9m或5m。
21、在一些实施方式中，所述甜菜碱的浓度为1.5m。
22、在一些实施方式中，所述四甲基氯化铵的浓度选自0.5～1.5m。
23、在一些实施方式中，所述四甲基氯化铵的浓度选自0.5m、0.6m、0.7m、0.8m、0.9m、1m、1.1m、1.2m、1.3m、1.4m或1.5m。
24、在一些实施方式中，所述四甲基氯化铵的浓度为1m。
25、在一些实施方式中，所述n-甲基吡咯烷酮的浓度选自10％～20％v/v。
26、在一些实施方式中，所述n-甲基吡咯烷酮的浓度选自10％v/v、11％v/v、12％v/v、13％v/v、14％v/v、15％v/v、16％v/v、17％v/v、18％v/v、19％v/v或20％v/v。
27、在一些实施方式中，所述n-甲基吡咯烷酮的浓度为16％v/v。
28、在一些实施方式中，所述组合物还包括缓冲液。
29、在一些实施方式中，所述缓冲液，选自以下一种或多种：氯化钠柠檬酸钠缓冲液(ssc)、三(羟甲基)氨基甲烷(tris)、2-(双(2-羟乙基)氨基)乙酸)(bicine)、(n-[三(羟甲基)甲基]甘氨酸(tricine)、[三(羟甲基)甲氨基]丙磺酸(taps)、3-[n-三(羟甲基)甲氨基]-2-羟基丙磺酸(tapso)、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸(hepes)、2-[[1,3-二羟基-2-(羟甲基)丙烷-2-基]氨基]乙磺酸(tes)、3-(n-吗啉代)丙磺酸(mops)、哌嗪-n,n’-双(2-乙磺酸)(pipes)、2-(n-吗啉代)乙磺酸(mes)、或二甲基砷酸(甲次砷酸盐)。
30、在一些实施方式中，所述缓冲液为柠檬酸钠缓冲液(ssc)。
31、在一些实施方式中，所述缓冲液的ph选自6.0～9.0。
32、在一些实施方式中，所述缓冲液的ph选自6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9或9.0。
33、在一些实施方式中，所述缓冲液的ph选自8.0。
34、在一些实施方式中，所述组合物还可以包含表面活性剂。
35、在本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于核酸杂交的组合物，其特征在于，所述组合物包括三价阳离子盐。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述三价阳离子选自Co3+、Fe3+、Al3+、Cr3+、Ni3+、B3+、Ir3+、Rh3+、Cr3+中的一种或多种，
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括添加剂，所述添加剂选自以下物质中的一种或多种：甘氨酸、甜菜碱、甘氨酸-甜菜碱、7-脱氮-2'-脱氧鸟苷、二甲亚砜、聚乙二醇400-1,000,000、甘油、镁、四甲基氯化铵、四乙基氯化铵、三乙胺盐酸盐、碳酸亚乙酯或N-甲基吡咯烷酮；
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含以下物质中的一种或多种：
5.一种核酸杂交的方法，所述方法采用权利要求1～4所述的组合物进行核酸杂交，获得杂交产物。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
7.根据权利要求5或6所述方法，其特征在于，所述方法还包括：将所述杂交产物与固相载体直接或者间接连接，利用清洗液进行清洗。
8.根据权
9.一种包含有权利要求1～4任一项所述的组合物的试剂盒。
10.权利要求1～4任一项所述的组合物或权利要求9所述试剂盒在核酸杂交中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种用于核酸杂交的组合物，其特征在于，所述组合物包括三价阳离子盐。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述三价阳离子选自co3+、fe3+、al3+、cr3+、ni3+、b3+、ir3+、rh3+、cr3+中的一种或多种，
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括添加剂，所述添加剂选自以下物质中的一种或多种：甘氨酸、甜菜碱、甘氨酸-甜菜碱、7-脱氮-2'-脱氧鸟苷、二甲亚砜、聚乙二醇400-1,000,000、甘油、镁、四甲基氯化铵、四乙基氯化铵、三乙胺盐酸盐、碳酸亚乙酯或n-甲基吡咯烷酮；
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：王波，郭宇辰，刘佳慧，吴炜，赵美茹，易鑫，
申请(专利权)人：深圳吉因加医学检验实验室，
类型：发明
国别省市：
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