一种同时生产D-阿洛酮糖和D-塔格糖的方法技术

本发明专利技术公开了一种同时生产D‑阿洛酮糖和D‑塔格糖的方法。本发明专利技术构建了两种异源表达工程菌株：能够同时表达葡萄糖异构酶和D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的E.coli BL21（DE3）‑pET28a‑gi‑dpe；以及能够同时表达β‑半乳糖苷酶和L‑阿拉伯糖异构酶的B.subtilis WB800N‑pHT01‑araA‑lacZ；培养这两种工程菌株并离心收集菌体，用含有乳糖的底物溶液重悬收集到的菌体，恒温下反应结束后过滤，上清液中同时含有D‑阿洛酮糖和D‑塔格糖。本发明专利技术所述的方法细胞催化剂制备容易，反应条件温和，操作方法简单，且高效、低成本，对环境保护、经济发展和代糖生产具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，特别涉及一种同时生产d-阿洛酮糖和d-塔格糖的方法。

技术介绍

1、稀有糖d-阿洛酮糖和d-塔格糖是近两年备受瞩目的两种天然功能性低热量甜味剂，是良好的蔗糖替代品，它们生理功能丰富，兼具口感和安全性优势，在膳食、医药和保健等领域具有重要应用。研究稀有糖可以促进无糖食品的良好发展。相比天然原料提取法和化学合成法，生物转化法具有操作简单、成本低、环境友好等优点，是稀有糖大规模生产的首选方法，而全细胞生物转化法相较于酶生物转化法更加简单、高效且稳定。

2、d-塔格糖多由l-阿拉伯糖异构酶催化d-半乳糖得到，但是d-半乳糖价格高昂，作为底物生产d-塔格糖成本高、利润低。通过将水解乳糖为d-半乳糖和d-葡萄糖的β-半乳糖苷酶引入到d-塔格糖的生物转化过程中，为d-塔格糖的生物合成提供直接底物d-半乳糖，是解决底物成本高这一难题的有效方法。同理，葡萄糖异构酶和d-阿洛酮糖3-差向异构酶双酶级联可以催化乳糖水解产物之一的d-葡萄糖直接生产d-阿洛酮糖。另外，乳清粉是乳制品生产过程中的副产品，具有很高的生化需氧量，利用不当容易造成资源浪费和本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种同时生产D-阿洛酮糖和D-塔格糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中的葡萄糖异构酶基因gi具有下列核苷酸序列之一：

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中的D-阿洛酮糖3-差向异构酶基因dpe具有下列核苷酸序列之一：

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（3）中的L-阿拉伯糖异构酶基因araA具有下列核苷酸序列之一：

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（4）中的β-半乳糖苷酶基因lacZ具有下列核苷酸序列之一：

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【技术特征摘要】

1.一种同时生产d-阿洛酮糖和d-塔格糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中的葡萄糖异构酶基因gi具有下列核苷酸序列之一：

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中的d-阿洛酮糖3-差向异构酶基因dpe具有下列核苷酸序列之一：

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（3）中的l-阿拉伯糖异构酶基因araa具有下列核苷酸序列之一：

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（4）中的β-半乳糖苷酶基因lacz具有下列核苷酸序列之一：

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（6）...

【专利技术属性】
技术研发人员：林建强，温鑫，林建群，宋欣，
申请(专利权)人：青岛龙鼎生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：