【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，具体涉及一种从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物及其应用。
技术介绍
1、细胞焦亡是一种新的程序性细胞死亡，由华盛顿大学cookson教授于2001年首次提出。细胞焦亡是指在短时间内，多种细胞(如巨噬细胞等)的细胞膜上形成大量孔洞的现象。细胞焦亡现象发生后会破坏细胞内外渗透压平衡，细胞内环境渗透压升高，进而导致细胞膨胀并破裂，导致细胞内部物质向外大量释放。
2、现有研究结果已证实，炎症小体活化会导致含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(caspase-1)的激活进而引发细胞焦亡现象以及强烈的炎症反应。
3、被激活的caspase-1蛋白酶会继续剪切胃皮素d(gsdmd)蛋白中部的特异位点，导致gsdmd的n端片段(gsdmd-nt)的形成，该蛋白随即定位到细胞膜，并在细胞膜上打孔进而导致细胞焦亡，细胞内部物质向外大量释放。
4、同时被激活的caspase-1蛋白酶会诱导il-1β等促炎因子成熟，大量成熟的促炎因子通过细胞膜上的孔洞向外释放，进而导致强烈的炎症反应。
5、炎症小体活化的标志是caspase-1的剪切和il-1β的成熟，二者被释放到胞外后可通过免疫印迹法(wb)、酶联免疫吸附测定法(elisa)检测。细胞焦亡的标志是细胞膜完整性被破坏，据此可通过胞内碘化丙啶(pi)染色、胞外乳氨酸脱氢酶(ldh)释放、gsdmd-nt的形成(wb法)来检测是否发生细胞焦亡。
6、炎症小体活化导致的细胞焦亡与多种炎症性疾病、炎症性衰老有关，如类风湿关节
7、然而针对疾病，现有所用治疗药物存在“泛细胞毒性”或全身性毒性，如甲氨蝶呤、秋水仙碱、糖皮质激素等均具有一定毒性。这些药物虽然可通过抑制人体全体细胞增殖、无差别阻断胞内广泛的信号通路来控制炎症反应，但在抑制炎症状态免疫细胞的同时也伤害了正常免疫细胞和其他机体细胞(如生殖细胞)，属于被动的广泛撒网式干预，无法有针对性的，从源头上精准抑制il-1β等炎症因子的成熟，阻断细胞焦亡。
8、炎症小体抑制剂可以实现从源头上精准抑制il-1β等炎症因子的成熟，阻断细胞焦亡。因为正常细胞中炎症小体不会被活化，该类型抑制剂对正常的免疫细胞、机体细胞影响极小，是实现精准干预疾病的有效策略，属于主动精准干预。
9、现有技术中公开的可作为炎症小体抑制剂使用的物质包括：荜茇酰胺(cn202010794165.6《荜茇酰胺在抑制nlrp3炎症小体活化中的应用》)、辣椒素(202110196432.4《辣椒素在抑制nlrp3炎症小体活化中的应用》)、依普黄酮(cn202210035588.9《依普黄酮在抑制nlrp3炎症小体活化中的应用》)、蟛蜞菊内酯(cn202211119761.x《蟛蜞菊内酯在制备炎症小体活化抑制剂或治疗痛风性关节炎的药物中的应用》)、蟛蜞菊内酯(cn202211119761.x《蟛蜞菊内酯在制备炎症小体活化抑制剂或治疗痛风性关节炎的药物中的应用》)等，种类较多，但上述炎症小体抑制剂性能各异，且现有作为抑制剂使用的天然产物效果均较差。
10、腋花兔儿风植物属于多年生草本，高达50-120厘米，花期3-6月及9-10月。腋花兔儿风大多生长在山谷、水流或林中潮湿的地方，生长海拔1500-2500米，多产于云南、贵州和四川等地区，同时在印度也发现了腋花兔儿风的存在。腋花兔儿风有止血、止痛等功效，民间常用于治疗强直性脊柱炎、外伤出血、关节炎、胃痛等。
11、但现有研究结果中并未发现源于腋花兔儿风(ainsliaea pertyoides franch.)植物的倍半萜类化合物具有抑制炎症小体活化的作用，也未明确何种结构的倍半萜类化合物具有较优的炎症小体活化抑制功能。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物，该倍半萜类化合物可作为炎症小体抑制剂用于炎症小体活化的抑制，该倍半萜类化合物显示出炎症小体及细胞焦亡现象的有效抑制效果，在制备炎症小体抑制剂、阻断细胞焦亡，及其在制备预防或治疗或改善细胞焦亡相关疾病的药物、保健食品、化妆品、卫生消毒用品中均可应用。
2、本专利技术的另外一个目的是提供一种从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用。
3、实现上述目的一种技术方案是：一种从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物，所述倍半萜类化合物为化合物1和化合物2中的至少一种，所述化合物1的分子式为c20h24o4，结构式如式(1)所示：
4、
5、所述化合物2的分子式为c20h24o5，结构式如式(2)所示：
6、
7、上述的一种从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物，其中，所述倍半萜类化合物从腋花兔儿风中提取分离的步骤如下：
8、(1)将干燥的腋花兔儿风(ainsliaea pertyoides franch.)全草用85％甲醇提取后，减压浓缩干燥得85％甲醇提取物；
9、(2)步骤(1)所得85％甲醇提取物溶解于水中，采用与水不相溶的乙酸乙酯萃取，减压回收溶剂得到萃取物；
10、(3)步骤(2)所得萃取物经d-101型大孔树脂柱色谱法分离，用甲醇/水(50:50-100:0,v/v)梯度洗脱，得到5个流份(fr.1-fr.5)；
11、(4)上述步骤(3)中所得的fr.2经硅胶柱色谱法分离，以氯仿/甲醇(10:1-0:1,v/v)梯度洗脱得到9个流份(fr.2.1-fr.2.9)；fr.3经硅胶柱色谱法分离，以石油醚/乙酸乙酯(30:1-1:1,v/v)梯度洗脱得到6个流份(fr.3.1-fr.3.6)；
12、(5)上述步骤(4)中所得的fr.2.8和fr.3.3经半制备高效液相(semi-preparativehplc)色谱分离，分别用70％和60％的乙腈洗脱，得到化合物1和2。
13、本专利技术还提供一种上述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其中，所述倍半萜类化合物在制备抑制炎症小体活化和/或阻断细胞焦亡的产品中的应用。
14、上述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其中，所述炎症小体为nlrp3炎症小体。
15、上述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其中，所述抑制炎症小体活化为抑制炎症小体诱导细胞的caspase-1蛋白剪切、抑制炎症小体诱导细胞的il-1β的成熟以及抑制炎症小体诱导细胞中il-1β的分泌中的至少一种。
16、上述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其中，所述倍半萜类化合物抑制炎症小体诱导细胞中il-1β的分泌的ic50均小于10μm。
17、上述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物，其特征在于，所述倍半萜类化合物为化合物1和化合物2中的至少一种，所述化合物1的分子式为C20H24O4，结构式如式(1)所示：
2.如权利要求1所述的一种从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物，其特征在于，所述倍半萜类化合物从腋花兔儿风中提取分离的步骤如下：
3.一种如权利要求1所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述倍半萜类化合物在制备抑制炎症小体活化和/或阻断细胞焦亡的产品中的应用。
4.如权利要求3所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述炎症小体为NLRP3炎症小体。
5.如权利要求3所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述抑制炎症小体活化为抑制炎症小体诱导细胞的Caspase-1蛋白剪切、抑制炎症小体诱导细胞的IL-1β的成熟以及抑制炎症小体诱导细胞中IL-1β的分泌中的至少一种。
6.如权利要求5所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述倍半萜类化合物抑制
7.如权利要求3所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述阻断细胞焦亡为降低炎症小体诱导细胞的碘化丙啶阳性率、抑制炎症小体诱导细胞的乳酸脱氢酶释放以及抑制炎症小体诱导细胞中GSDMD-NT的形成中的至少一种。
8.如权利要求7所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述倍半萜类化合物浓度为10μM时，碘化丙啶阳性抑制率为15～19％，乳酸脱氢酶释放率为7～13％。
9.一种如权利要求1所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述倍半萜类化合物在制备预防或治疗NLRP3炎症小体相关疾病的产品中的应用。
10.如权利要求9所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，NLRP3炎症小体相关疾病为痛风、关节炎、酒精性肝损伤、非酒精性肝损伤、动脉粥样硬化、II型糖尿病、脓毒血症、多发性硬化、系统性红斑狼疮、阿尔茨海默病、帕金森病、矽肺病、冷吡啉综合症、痤疮、牛皮癣、头皮屑、花斑癣、脂溢性皮炎、紫外线诱导的皮肤损伤、紫外线诱导的皮肤晒黑、紫外线诱导的皮肤老化和蚊虫叮咬中的至少一种。
11.如权利要求9所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述产品的剂型为片剂、分散片、含片、口崩片、缓释片、胶囊剂、软胶囊剂、滴丸、颗粒剂、注射剂、粉针剂或气雾剂散剂、膜剂、贴膏剂、贴剂、乳膏剂、擦剂、霜剂和洗剂中的至少一种。
12.如权利要求9所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述产品包括药物、保健食品、化妆品和卫生消毒用品。
13.如权利要求12所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述化妆品为洗发水、洗发膏、清凉油、风油精、爽肤水、花露水、面霜、面膜、面部啫喱、防晒乳、防晒霜、防晒啫喱和防晒液中的任一种。
...【技术特征摘要】
1.一种从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物，其特征在于，所述倍半萜类化合物为化合物1和化合物2中的至少一种，所述化合物1的分子式为c20h24o4，结构式如式(1)所示：
2.如权利要求1所述的一种从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物，其特征在于，所述倍半萜类化合物从腋花兔儿风中提取分离的步骤如下：
3.一种如权利要求1所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述倍半萜类化合物在制备抑制炎症小体活化和/或阻断细胞焦亡的产品中的应用。
4.如权利要求3所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述炎症小体为nlrp3炎症小体。
5.如权利要求3所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述抑制炎症小体活化为抑制炎症小体诱导细胞的caspase-1蛋白剪切、抑制炎症小体诱导细胞的il-1β的成熟以及抑制炎症小体诱导细胞中il-1β的分泌中的至少一种。
6.如权利要求5所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述倍半萜类化合物抑制炎症小体诱导细胞中il-1β的分泌的ic50均小于10μm。
7.如权利要求3所述的从腋花兔儿风中提取分离的倍半萜类化合物的应用，其特征在于，所述阻断细胞焦亡为降低炎症小体诱导细胞的碘化丙啶阳性率、抑制炎症小体诱导细胞的乳酸脱氢酶释放以及抑制炎症小体诱导细胞中gsdmd-nt的形成中的至少一种。
8.如权利要求7所述的从腋花兔儿风中提取分...
【专利技术属性】
技术研发人员：肖伟烈，张兴杰，许耀军，王飞飞，王祖定，马骁，张晶晶，李晓莉，张芮菡，郭振宇，
申请(专利权)人：云南云科特色植物提取实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。