【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医学检测，具体为一种结核杆菌抗酸染色标准片及其制备方法和应用。
技术介绍
1、结核病是由结核分枝杆菌(mtb)引发的慢性传染病，以肺结核最为常见。肺结核的诊断依赖于病原学、流行病学、临床表现、胸部影像、免疫学等相关辅助检查及鉴别诊断。其中，病原学检测结果，特别是痰涂片镜检，是确诊结核病的关键依据，抗酸染色是检测结核病病原学证据的主要手段。
2、然而，抗酸染色检检测过程中涉及多个复杂步骤，包括石碳酸复红染液染色、流水冲洗、脱色剂处理、亚甲蓝液复染等，此检测过程容易受到温湿度、浓度、批间差和人员操作等原因的影响，从而导致结果出现偏差。为确保检测结果的准确性，使用标准片进行质量控制和监测是不可或缺的。
3、目前，大部分医院的检测科常选用肺结核病人体内提取的痰液来支撑标准对照片，但是，这种来源于患者的痰液成分复杂且结果不稳定。此外，作为标准片，其存在一定的个体差异，且来源不稳定。另外，使用患者的痰液用于制作标准片还存在理论以及法律归属权的问题。
技术实现思路
1、(一)解决的技术问题
2、针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种结核杆菌抗酸染色标准片及其制备方法和应用，以灭活鸟分支杆菌、细胞模拟成分以及人工痰液为对象，制备成结核杆菌抗酸染色标准片，解决了上述
技术介绍
中提出的问题。
3、(二)技术方案
4、为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：
5、根据本专利技术的第一方面，提供了一种结核杆菌
6、本专利技术提供的结核杆菌抗酸染色标准片，通过灭活鸟分支杆菌和细胞模拟成分，可以在玻片上形成类似人体肺部组织和肺部正常菌群的形态，与直接从人体内提取的样本较为类似，因此在实际质量检测过程中，本专利技术的标准片为检验室/实验室提供模拟度高，检测层视野清晰、各等级标准片结果稳定的标准片，保证实验结果的可靠性。同时，灭活鸟分支杆菌的形态一致性好，能够长久的保存，可明显降低因标准片问题而导致实验结果的偏差问题。
7、此外，本专利技术选择灭活鸟分支杆菌可进行大批量的培养，在制备前进行灭活预处理，不会造成生物危害，形态大小易于观察和判别，菌之间不会出现聚集的情况。然而环境分枝杆菌虽然易获取，但较难提取和分离，而卡介苗是由减毒的牛型结核分枝杆菌悬浮液制成的活菌，作为一种疫苗难于获取，且卡介苗中的活菌易聚集，影响操作者的判读阅片，对结果的影响较大。
8、优选的，所述细胞模拟成分包括含有动物白细胞和支气管细胞的细胞悬浊液。
9、本专利技术采用动物白细胞和支气管细胞，不会有人来源，也不会有伦理风险，易于商业化。来源成本低，可大规模生产。
10、根据本专利技术的第二方面，提供了一种结核杆菌抗酸染色标准片的制备方法，包括以下步骤：
11、s1、培养标定浓度的鸟分支杆菌，灭活后按等级要求进行梯度稀释，得到灭活鸟分支杆菌；
12、s2、取动物白细胞和支气管细胞，离心得到细胞悬浊液；
13、s3、将鸭蛋清加入含有淀粉基质的水溶液中混合均匀，得到人工痰液；
14、s4、将灭活鸟分支杆菌和细胞悬浊液滴至玻片中央，再将人工痰液涂抹至玻片上，并通过人工痰液将灭活鸟分支杆菌和细胞悬浊液均匀抹开，烘干后，得到所述结核杆菌抗酸染色标准片。
15、优选的，步骤s1中，所述鸟分支杆菌的标定浓度为3.0×108细菌数/ml。
16、优选的，步骤s2中，所述动物白细胞与所述支气管细胞的体积比为1:1。
17、优选的，步骤s3中，所述淀粉基质包括嫩肉淀粉和玉米淀粉。
18、优选的，步骤s3中，所述嫩肉淀粉与玉米淀粉的质量比为1:0.6～1。
19、优选的，步骤s3中，所述鸭蛋清与所述含有淀粉基质的水溶液的质量比为1:15～25；
20、所述含有淀粉基质的水溶液的质量浓度为3.0wt％～3.6wt％。
21、优选的，步骤s4中，所述烘干的温度为75～95℃。
22、根据本专利技术的第三方面，提供了一种结核杆菌抗酸染色标准片或根据上述制备方法得到的结核杆菌抗酸染色标准片在室间质控或室内质控中的应用。
23、(三)有益效果
24、本专利技术提供了一种结核杆菌抗酸染色标准片及其制备方法和应用。具备以下有益效果：
25、1、本方案提供的结核杆菌抗酸染色标准片，采用灭活鸟分枝杆菌和细胞模拟成分，来源稳定，可为检验室/实验室提供模拟度高，检测层视野清晰、各等级标准片结果稳定的标准片，保证实验结果的可靠性。同时，灭活鸟分支杆菌的形态一致性好，能够长久的保存，可明显降低因标准片问题而导致实验结果的偏差问题。
26、2、本方案提供的结核杆菌抗酸染色标准片的制备方法，能够得到(0、1+、2+、3+、4+)等级结果以及(阴性、阳性)对照结果，制备的标准片质量稳定，一致性好。
27、3、本方案提供的结核杆菌抗酸染色标准片在应用于室间质控或室内质控的过程中，可保证报告准确，并且有利于实验室尽快找到和分析出现结果差异的原因，开展有效的整改活动。
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1.一种结核杆菌抗酸染色标准片，其特征在于：包括玻片和涂覆于所述玻片上的检测层，所述检测层包括灭活鸟分支杆菌、细胞模拟成分和人工痰液。
2.根据权利要求1所述的一种结核杆菌抗酸染色标准片，其特征在于：所述细胞模拟成分包括含有动物白细胞和支气管细胞的细胞悬浊液。
3.一种如权利要求1或2所述的一种结核杆菌抗酸染色标准片的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的一种结核杆菌抗酸染色标准片的制备方法，其特征在于：步骤S1中，所述鸟分支杆菌的标定浓度为3.0×108细菌数/mL。
5.根据权利要求3所述的一种结核杆菌抗酸染色标准片的制备方法，其特征在于：步骤S2中，所述动物白细胞与所述支气管细胞的体积比为1:1。
6.根据权利要求3所述的一种结核杆菌抗酸染色标准片的制备方法，其特征在于：步骤S3中，所述淀粉基质包括嫩肉淀粉和玉米淀粉。
7.根据权利要求6述的一种结核杆菌抗酸染色标准片的制备方法，其特征在于：步骤S3中，所述嫩肉淀粉与玉米淀粉的质量比为1:0.6～1。
8.根据权利要求
9.根据权利要求3所述的一种结核杆菌抗酸染色标准片的制备方法，其特征在于：步骤S4中，所述烘干的温度为75～95℃。
10.一种权利要求1或2所述的结核杆菌抗酸染色标准片或根据权利要去3至9任意一项所述的制备方法得到的结核杆菌抗酸染色标准片在室间质控或室内质控中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种结核杆菌抗酸染色标准片，其特征在于：包括玻片和涂覆于所述玻片上的检测层，所述检测层包括灭活鸟分支杆菌、细胞模拟成分和人工痰液。
2.根据权利要求1所述的一种结核杆菌抗酸染色标准片，其特征在于：所述细胞模拟成分包括含有动物白细胞和支气管细胞的细胞悬浊液。
3.一种如权利要求1或2所述的一种结核杆菌抗酸染色标准片的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的一种结核杆菌抗酸染色标准片的制备方法，其特征在于：步骤s1中，所述鸟分支杆菌的标定浓度为3.0×108细菌数/ml。
5.根据权利要求3所述的一种结核杆菌抗酸染色标准片的制备方法，其特征在于：步骤s2中，所述动物白细胞与所述支气管细胞的体积比为1:1。
6.根据权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：张锋，柳正卫，童辉，宋祖义，
申请(专利权)人：浙江峻山生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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