一种免疫组化质控品的制备方法及其应用技术

本申请涉及一种免疫组化质控品的制备方法及其应用，包括以下步骤：S1:分别培养肿瘤细胞株；S2：制备细胞块；S3：制备对应的色标块；S4:将细胞块和色标块分别进行固定和脱水，然后按照每一种肿瘤细胞块对应一个颜色的色标块，将细胞块和色标块一起进行浸蜡和包埋，即可得到细胞蜡块质控品。本申请中采用了来源稳定的肿瘤细胞作为培养对象，制作成质量稳定且可长期使用的细胞蜡块质控品，可以实现组织学对照目的：经过验证后染色结果符合实际预期，能够实时帮助判读者确认免疫组化结果的真实性(真假阴、阳性)。本申请的细胞蜡块中还包含有色标块，可以在更清楚的明确细胞形态定位特征(核、浆、膜)，便于判读者区分的特征标识或形态。态。态。

【技术实现步骤摘要】
一种免疫组化质控品的制备方法及其应用


[0001]本申请涉及生物医学检验
，尤其是涉及一种免疫组化质控品的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]免疫组织化学检测简称免疫组化检测，在检测中使用特定一抗与生物组织切片样本中的抗原特异性结合，进一步使用一个通用性二抗与前述一抗结合，并通过连接在二抗上的显色分子进行显色。在免疫组化检测(抗原抗体反应)过程中，步骤冗长复杂，使用的试剂种类繁多，同时受到多因素的影响(包括温湿度、浓度、批间差和人员操作等)，极易发生变化而导致结果偏差。在检测过程中，为了实验结果的准确性，用质控品作为阴性和阳性对照是不可或缺的部分。
[0003]由于商业化抗体的序列保密，抗体质量(良莠不一)无法实现统一，因此需要对临床免疫组化用途的(抗人)抗体质量采用质控品确认，故迫切需要质控品来监控免疫组化检测过程的质量问题。由于抗体销售商没有提供质控品，检测方也无法提供，目前大部分实验室的免疫组化检测结果仅凭判读者对结果“现象”的主观解读，常出现结果不一致的情况。
[0004]目前医院的病理科常选用人体或动物的器本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种免疫组化质控品的制备方法，包括以下步骤：S1:分别培养HER2分别为0、1+、2+、3+的肿瘤细胞株，和/或ER/PR为阴性和阳性的肿瘤细胞株；将培养后细胞分别进行离心去除上清液，分别得到细胞沉淀，将细胞沉淀分别进行重悬，得到对应细胞悬液；S2：分别向步骤S1中的细胞悬液中加入熔融的样品稀释液，混匀后，趁热倒入模具，冷却，得到对应的细胞块；S3：根据S1中肿瘤细胞种类的数量，选择对应数量的不同颜色的色标剂，分别向不同颜色的色标剂中加入样品稀释液，混匀后，趁热倒入模具，冷却，得到对应的色标块；S4: 将步骤S2中的细胞块和步骤S3的色标块分别进行固定和脱水，然后按照每一种肿瘤细胞块对应一个颜色的色标块，将细胞块和色标块一起进行浸蜡和包埋， 即可得到细胞蜡块质控品。2.根据权利要求1所述的免疫组化质控品的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，HER2为0、1+、2+、3+的肿瘤细胞株分别为MDA
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MB
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231、MCF
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7、T47D、SK
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BR
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3细胞株；ER/PR为阴性和阳性肿瘤细胞株分别为MDA
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MB
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231、T47D；肿瘤细胞需要培养细胞块中细胞个数为(6~8)
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107个，培养好的细胞需要用酶进行消化，并用质量浓度为10%的福尔马林溶液进行固定，然后在进行离心。3.根据权利要求1所述的免疫组化质控品的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，加入PBS缓冲液重悬细胞，其中PBS缓冲液的加入体积为细胞沉淀体积的1~1.5倍；离心转速为800~1200转，离心时间为4~6min。4.根据权利要求1所述的免疫组化质控品的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，样品稀释液为琼脂加热到70~80℃后获得的熔融液，样品稀释液的加入量为细胞沉淀体积的1~2倍。5.根据权利要求4所述的免疫组化质控品的制备方法，其特征在于，所述细胞块为方块状或者锥形块状；其中：方块状的细胞块的制备方法，包括以下步骤：将细胞悬液和样品稀释液置于方形的包埋模具中，用移液枪头将...

【专利技术属性】
技术研发人员：张锋，吴金荣，宋祖义，
申请(专利权)人：浙江峻山生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：