【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及免疫学领域，特别涉及一种抗ny-eso-1的纳米抗体及其应用。
技术介绍
1、ny-eso-1是肿瘤-睾丸抗原的成员之一，是最早由chen等人使用serex技术从用食管鳞癌患者的血清中免疫筛选cdna文库中发现的一类能诱导体液免疫的肿瘤共享抗原。ny-eso-1在神经母细胞瘤(82％)、滑膜肉瘤(80％)、黑色素瘤(46％)、食管癌(32％)、肺癌(13％)等中具有较高的表达水平，且随疾病的进展表达量增加，在直肠癌、淋巴瘤等中表达很低，甚至不表达，但在正常组织中的表达局限于生殖细胞和胎盘细胞，原则上属于肿瘤相关抗原，然而生殖细胞和胎盘细胞不表达hla i类分子，无法将抗原肽递呈到细胞表面，不能被特定的t细胞识别，因此ny-eso-1经降解产生的多肽与hla分子形成的复合物可被认为是肿瘤特异性抗原。研究发现，ny-eso-1能同时诱发体液免疫和细胞免疫，血清中igg阳性与产生抗该抗原的cd8+t细胞正相关，是迄今为止发现的免疫原性最强的肿瘤特异性抗原(razaa，merhi m，inchakalody v p，et al.unleashing the immune response to ny-eso-1 cancer testis antigen as a potential target for cancer immunotherapy.jtransl med，2020，18(1)：140.)。正因为靶向ny-eso-1的治疗脱靶毒性十分有限，有望成为肿瘤免疫治疗中具有非凡潜力的候选靶点。目前针对该靶点的探究主要
2、骆驼科的血清中存在的一种独特的缺失轻链的抗体，被称为重链抗体(hcab)。重链抗体仅由重链可变区、重链恒定区ch2、ch3组成，其重链可变区被称为vhh，相对分子量为15kd，分子尺寸为4nm*2.5nm*3nm，因此这类抗体被ablynx公司命名为纳米抗体(nbs)。纳米抗体自然进化成只有3个互补决定区(cdr)，明显少于传统抗体，但是纳米抗体cdr3环平均长于传统抗体的vh，在一定程度上可以扩大与靶抗原的接触面积(peter b，julia h，friedrich k n.nanobodies and nanobody-based human heavy chain antibodies asantitumor therapeutics.front immunol，2017，8：1603.)，同时vhh的cdr3环可以自然环合成一个手指状的凸起，可以插入抗原表位的空洞中，这使得纳米抗体可与常规单抗所不能到达的不常见的或独特表位结合(stijlemans b，caljon g，natesan s，et al.highaffinity nanobodies against the trypanosome brucei vsg are potenttrypanolytic agents that block endocytosis.plos pathogens，2011，7(6).)，例如酶活性位点等。由于纳米抗体分子尺寸很小，因此其具备高效的组织分布能力，更易通过致密的实体瘤起治疗作用，有极大的临床应用前景。此外，纳米抗体还具有水溶性、稳定性强以及生产成本低的优势，使其在疾病的诊断和治疗中广泛应用。
技术实现思路
1、为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种抗ny-eso-1的纳米抗体及其应用，所述纳米抗体对于ny-eso-1具有较强的亲和力和特异性。
2、第一方面，本专利技术提供了一种抗ny-eso-1的纳米抗体，所述纳米抗体的vhh链包括三个互补决定区cdr1、cdr2和cdr3，所述cdr1的氨基酸序列为seq id no.1、seq id no.6、seq id no.11、seq id no.16序列中的任意一种；所述cdr2的氨基酸序列为seq id no.2、seq id no.7、seq id no.12、seq id no.17序列中的任意一种；所述cdr3的氨基酸序列为seq id no.3、seq id no.8、seq id no.13、seq id no.18序列中的任意一种。
3、优选的，所述纳米抗体的vhh链包括以下任意一种的三个互补决定区cdr1、cdr2和cdr3：(1)cdr1的氨基酸序列如seq id no.1所示，cdr2的氨基酸序列如seq id no.2所示，cdr3的氨基酸序列如seq id no.3所示；(2)cdr1的氨基酸序列如seq id no.6所示，cdr2的氨基酸序列如seq id no.7所示，cdr3的氨基酸序列如seq id no.8所示；(3)cdr1的氨基酸序列如seq id no.11所示，cdr2的氨基酸序列如seq id no.12所示，cdr3的氨基酸序列如seq id no.13所示；(4)cdr1的氨基酸序列如seq id no.16所示，cdr2的氨基酸序列如seqid no.17所示，cdr3的氨基酸序列如seq id no.18所示。所述vhh链的氨基酸序列为seq idno.4、seq id no.9、seq id no.14、seq id no.19序列中的任意一种。
4、在另一优选例中，所述cdr1与seq id no.1、seq id no.6、seq id no.11、seq idno.16具有至少80％序列相同性的氨基酸序列；和/或所述cdr2与seq id no.2、seq idno.7、seq id no.12、seq id no.17具有至少80％序列相同性的氨基酸序列；和/或所述cdr3与seq id no.3、seq id no.8、seq id no.13、seq id no.18具有至少80％序列相同性的氨基酸序列。
5、第二方面，本专利技术提供了一种多价纳米抗体复合物，包含至少2个纳米抗体分子，并且其中的纳米抗体为上述的纳米抗体。第三方面，本专利技术提供了编码所述纳米抗体的核酸分子。所述的核酸分子具有如seq id no.5、seq id no.10、seq id no.15、seq id no.20中任一所示的核苷酸序列。第四方面，本专利技术提供了一种表达载体，所述表达载体含有所述的核酸分子。所述表达载体为pet21a。第五方面，本专利技术提供了一种宿主细胞，所述宿主细胞含有所述的表达载体，或其基因组中整合有所述的核酸分子。所述宿主细胞为大肠杆菌bl21。第六方面，本专利技术提供了一种免疫偶联物，该免疫偶联物含有：(a)所述纳米抗体；和(b)选自下组至少一种的偶联部分：可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、治疗剂、pk修饰部分或酶。
6、优选地，所述治疗剂为car；更优选地，所述治疗剂为抗-cd3抗体。
7、在另一优选例中，所述免疫偶联物含有：多价(如二价)的如本专利技术第一方面所述的抗ny-eso-1纳米抗体、如本专利技术第本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗NY-ESO-1的纳米抗体，所述纳米抗体的VHH链包括三个互补决定区CDR1、CDR2和CDR3，其特征在于，所述CDR1的氨基酸序列为SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.16序列中的任意一种；
2.根据权利要求1所述的纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体的VHH链包括以下任意一种的三个互补决定区CDR1、CDR2和CDR3：
3.根据权利要求1所述的纳米抗体，其特征在于，所述VHH链的氨基酸序列为SEQ IDNO.14、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.19序列中的任意一种。
4.编码权利要求1～3任一项所述纳米抗体的核酸分子。
5.根据权利要求4所述的核酸分子，其特征在于，具有如SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.20中任一所示的核苷酸序列。
6.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有权利要求4所述的核酸分子。
7.一种宿主细胞，其特征在于，所
8.一种免疫偶联物，其特征在于，该免疫偶联物含有：(a)权利要求1～3任一项所述纳米抗体；和(b)选自下组至少一种的偶联部分：可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、治疗剂、PK修饰部分或酶。
9.一种药物组合物，其特征在于，所述组合物含有权利要求1-3中任一项所述的纳米抗体、权利要求4中所述的核酸分子或权利要求8中所述的免疫偶联物，以及药学上可接受的载体。
10.权利要求1-3中任一项所述的纳米抗体、权利要求4中所述的核酸分子、权利要求7中所述的宿主细胞或权利要求8中所述的免疫偶联物的应用，其特征在于，所述应用如下任一应用：
...【技术特征摘要】
1.一种抗ny-eso-1的纳米抗体，所述纳米抗体的vhh链包括三个互补决定区cdr1、cdr2和cdr3，其特征在于，所述cdr1的氨基酸序列为seq id no.11、seq id no.1、seq id no.6、seq id no.16序列中的任意一种；
2.根据权利要求1所述的纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体的vhh链包括以下任意一种的三个互补决定区cdr1、cdr2和cdr3：
3.根据权利要求1所述的纳米抗体，其特征在于，所述vhh链的氨基酸序列为seq idno.14、seq id no.4、seq id no.9、seq id no.19序列中的任意一种。
4.编码权利要求1～3任一项所述纳米抗体的核酸分子。
5.根据权利要求4所述的核酸分子，其特征在于，具有如seq id no.15、seq id no.5、seq id no.10、seq ...
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