多特异性融合蛋白的制备及其应用制造技术

本申请提供了一种融合蛋白及其用途，所述融合蛋白包含：a)能特异性结合第一靶点的Fab片段，所述Fab片段能借助与所述第一靶点的结合使所述融合蛋白被细胞内化；b)能特异性结合第二靶点的第一多肽，所述第一多肽的N端通过第一肽接头与所述Fab片段的轻链或重链的C端连接，所述第二靶点在所述第一靶点所涉及的信号通路的下游，任选地，所述融合蛋白还包含：c)能特异性结合第三靶点的第二多肽，所述第二多肽的N端通过第二肽接头与所述Fab片段的重链或轻链的C端连接，所述第三靶点在所述第一靶点所涉及的信号通路的下游。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及免疫学领域，更具体地，涉及一种多特异性融合蛋白的制备及其用途。

技术介绍

1、疾病的发生和发展通常与某些胞内异常的信号转导有关。小分子抑制剂是胞内信号通路的调节的主要手段，因为它们能容易地透过细胞膜进入细胞内发挥作用。但小分子药物由于结构相对简单，往往容易与多个靶点相互作用，缺乏良好的靶向选择性，特异性不高而导致副作用偏大。

2、与小分子抑制剂相比，生物大分子在结构以及功能多样性方面更具有优势，且具有较好的特异性。如果能将功能性蛋白质输送到细胞中作为激活或拮抗特定信号通路的干预手段，则在某些疾病治疗领域将会有更广阔的发挥空间。然而，由于蛋白等大分子难以透过细胞膜，其针对胞内靶点的治疗仍面临非常大的挑战。目前开发的大分子药物绝大多数是针对细胞表面靶点(zhang,y.；j.j.；lee,k.；li,j.；murthy,n.recentdevelopments in intracellular protein delivery.curr.opin.biotechnol.2018,52,25-31.(2)simeon,r.；chen,z.i本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种融合蛋白，其包含：

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述第一肽接头与所述第一多肽之间和/或所述第二肽接头与所述第二多肽之间还连接有第三肽接头和第四肽接头，任选地，所述第三肽接头和所述第四肽接头各自独立地包含以下的一种或多种：SEQ ID NO：18所示的序列、SEQID NO:19所示的序列、串联连接的多个SEQ ID NO：18所示的序列和串联连接的多个SEQ IDNO：19所示的序列。

3.如权利要求1或2所述的融合蛋白，其中所述第一靶点选自c-Met、EGFR、EpHA2以及以上的组合，任选地，其中所述Fab片段的轻链和重链通过凸起一进入一孔洞形...

【技术特征摘要】

1.一种融合蛋白，其包含：

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述第一肽接头与所述第一多肽之间和/或所述第二肽接头与所述第二多肽之间还连接有第三肽接头和第四肽接头，任选地，所述第三肽接头和所述第四肽接头各自独立地包含以下的一种或多种：seq id no：18所示的序列、seqid no:19所示的序列、串联连接的多个seq id no：18所示的序列和串联连接的多个seq idno：19所示的序列。

3.如权利要求1或2所述的融合蛋白，其中所述第一靶点选自c-met、egfr、epha2以及以上的组合，任选地，其中所述fab片段的轻链和重链通过凸起一进入一孔洞形成异源二聚体，任选地，其中所述凸起一进入一孔洞位于轻链和重链的恒定区中。

4.如前述权利要求中任一项所述的融合蛋白，其中所述第一多肽和所述第二多肽各自独立地选自mbd16、grb2-sh2、shp2-bound gab1以及axl胞外段，

5.一种核酸，其编码权利要求1-4中任一项所述的融合蛋白。

6.一种表达载体，其包含权利要求5所述的核酸。

7.一种宿主细胞，其包含权利要求5所述的核酸或权利要求6所述的表达载体，任选地，所述宿主细胞为哺乳动物细胞，所述哺乳动物细胞选自cho细胞、ns0细胞、sp2/0细胞、hek29...

【专利技术属性】
技术研发人员：高新，窦晓倩，郁振军，钱尼良，李宏杰，杨翠马，陈利婷，徐桂利，潘秀颉，宋海峰，
申请(专利权)人：北京免疫方舟医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：