一种游离DNA甲基化特异性位点及DMR区段的检测方法技术

本发明专利技术提供一种游离DNA甲基化特异性位点及DMR区段的检测方法，包括：S10：提取检测样品的cfDNA，对cfDNA进行酶切，得到酶切产物，检测样品为血浆；S20：混合X’Y’模板与酶切产物，混合后进行高温变性退火，得到变性退火产物；S30：混合Y’Y’模板，包被有特异性分子信标的流式编码微球和变性退火产物，并在WS Bst2.0聚合酶和Nt.BstNBI切刻内切酶的作用下进行55℃恒温指数扩增，得到扩增产物；S40：使用流程细胞仪对流式编码微球逐颗进行分析，并检测流式编码微球荧光信号和分子信标荧光信号。本发明专利技术解决了现有甲基化检测方法检测灵敏度低的技术问题，实现了提高检测灵敏度，且操作简便的技术效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，具体而言，涉及一种游离dna甲基化特异性位点及dmr区段的检测方法。

技术介绍

1、癌症的早筛可以通过影像学技术(例如x射线、核磁共振成像(mri)和ct扫描等)以及生物标志物进行筛查，这些技术可以非侵入性的检测身体内部异常肿块，或通过检测人体内的特定分子、基因或蛋白质等来判断是否患有癌症。这些技术虽然广泛应用于临床，但不能提供细胞或分子层面的信息，且相关标志物的浓度或表达在癌症患者中常常有所不同。这些方法对于不同类型的癌症具有不同的特异性，对其他类型的癌症的检测准确性还有待进一步验证和完善，且操作也较复杂，需要较长的实验时间，实验设备和试剂昂贵，这都限制了检测技术在临床实践中的广泛应用。

2、应用于癌症早筛的技术还有血液甲基化检测技术，这是一种新兴的分子生物学方法，通过检测dna甲基化修饰来筛查癌症。甲基化是一种常见的表观遗传修饰，与肿瘤发生相关，相关位点甲基化的改变往往与肿瘤的发展进程想关联。甲基化检测技术可以通过血液样本检测dna的甲基化状态，从而识别癌症早期信号。但应用于甲基化检测的现有技术手段和方法(如pcr法本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种游离DNA甲基化特异性位点及DMR区段的检测方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述甲基化修饰依赖型核酸内切酶为MspJI家族成员，包括：MspJI，FspEI，LpnPI，AspBHI，RIaI，SgrTI中的任意一种或多种。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流式编码微球由两种荧光染料按不同浓度配比，形成不同能级的荧光编码微球阵列，每种荧光编码微球的表面连接有一种特异性分子信标，每种分子信标对应一种甲基化位点。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，每种所述荧光编码微球的数量为10...

【技术特征摘要】

1.一种游离dna甲基化特异性位点及dmr区段的检测方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述甲基化修饰依赖型核酸内切酶为mspji家族成员，包括：mspji，fspei，lpnpi，aspbhi，riai，sgrti中的任意一种或多种。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流式编码微球由两种荧光染料按不同浓度配比，形成不同能级的荧光编码微球阵列，每种荧光编码微球的表面连接有一种特异性分子信标，每种分子信标对应一种甲基化位点。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，每种所述荧光编码微球的数量为1000至5000颗。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓光，李震，陈小晶，慕燕琼，王子明，
申请(专利权)人：泛肽生物科技浙江有限公司，
类型：发明
国别省市：