【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因工程。具体地，涉及osa-mir166e-3pi基因在调控籼稻抽穗期中的应用。
技术介绍
1、水稻是一种起源于热带或亚热带的光周期敏感作物，水稻种植品种主要为亚洲栽培稻，又根据一系列表型差异分为籼稻(oryza sativa subsp indica)和粳稻(oryzasativa subsp japanica)。水稻作为我国主要的粮食作物之一，其产量在保障国家粮食安全问题上具有重要地位。
2、适宜的生育期是水稻高产的重要前提，另随着我国经济社会的快速发展和劳动人口的流失，以直播为主的水稻栽培方式发展迅速。然而，由于直播稻没有秧田期，在双季稻区、轮作稻区等稻区，均要求直播稻品种具有较短的生育期且能维持较高的产量，培育生育期较短的水稻品种已经成为各稻区水稻育种的未来发展趋势。
3、水稻抽穗期是一个数量性状，存在多个调控位点。挖掘调控水稻抽穗特性的基因，以此为基础，运用分子育种技术定向改造控制抽穗期的关键基因，可培育不同全生育期的水稻新品种。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题是如何提供一种能定向改造控制籼稻抽穗期的关键基因，为水稻育种及发育机制研究提供新的基因资源。
2、本专利技术的第一个目的是提供osa-mir166e-3pi基因在调控籼稻抽穗期中的应用。
3、本专利技术的第二个目的是提供所述的osa-mir166e-3pi基因在创建水稻短生育期种质中的应用。
4、本专利技术的第三个目的是提供一
5、本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
6、本专利技术发现非编码microrna籼稻型osa-mir166e-3pi基因可以调控籼稻黄华占的抽穗期。具体地，本专利技术利用crispr/cas9多基因编辑系统敲除了籼稻黄华占中的osa-mir166e-3pi基因(核苷酸序列如seq id no.1所示)，获得了相应的osa-mir166e-3pi基因编辑黄华占突变体，发现黄华占突变体在长日照和短日照(长短日照的临界点为日照时间12.5小时)条件下，均比对照(野生型黄华占)提前抽穗，表明osa-mir166e-3pi基因可调控籼稻抽穗期，对培育不同全生育期的新品种具有重要意义。因此，本专利技术申请保护所述osa-mir166e-3pi基因的以下应用：
7、本专利技术申请保护osa-mir166e-3pi基因在调控籼稻抽穗期中的应用，所述基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
8、具体地，所述应用为osa-mir166e-3pi基因在调控籼稻抽穗期提前中的应用。
9、本专利技术还申请保护所述osa-mir166e-3pi基因在创建水稻短生育期种质中的应用。
10、具体地，所述水稻为籼稻。
11、具体地，所述籼稻为黄华占。
12、本专利技术还提供了一种使籼稻抽穗期提前的方法，所述方法为功能敲除籼稻的osa-mir166e-3pi基因，获得抽穗期提前的株系。
13、具体地，所述方法为利用crispr/cas9多基因编辑系统敲除籼稻中的osa-mir166e-3pi基因，获得抽穗期提前的株系。
14、具体地，所述crispr/cas9多基因编辑系统敲除籼稻的osa-mir166e-3pi基因的步骤为：
15、s1.构建籼稻osa-mir166e-3pi基因的基因组编辑转化载体；
16、s2.将构建的基因组编辑转化载体转化到籼稻的可再生组织或器官中，使osa-mir166e-3pi基因在转化的植株中被敲除。
17、具体地，所述基因组编辑转化载体为pylcrispr/cas9pubi-mh。
18、具体地，所述crispr/cas9多基因编辑系统敲除籼稻osa-mir166e-3pi所用sgrna作用于osa-mir166e-3pi基因靶位点的核苷酸序列为：5’-tcgaaccaggcttcattcccc-3’。
19、具体地，所述水稻为籼稻。
20、具体地，所述籼稻为黄华占。
21、本专利技术具有以下有益效果：
22、本专利技术提供了一种能定向改造控制籼稻抽穗期的关键基因及其应用，即osa-mir166e-3pi基因在调控籼稻抽穗期和创建水稻短生育期种质中的应用，为水稻育种及发育机制研究提供新的基因资源。本专利技术还提供了一种使籼稻抽穗期提前的方法，对培育不同全生育期的籼稻新品种、增强籼稻品种适应性具有重要意义。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.Osa-miR166e-3pi基因在调控籼稻抽穗期中的应用，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述应用为Osa-miR166e-3pi基因在调控籼稻抽穗期提前中的应用。
3.权利要求1中所述的Osa-miR166e-3pi基因在创建水稻短生育期种质中的应用。
4.根据权利要求1～3任一所述应用，其特征在于，所述水稻为籼稻。
5.根据权利要求4所述应用，其特征在于，所述籼稻为黄华占。
6.一种使籼稻抽穗期提前的方法，其特征在于，所述方法为功能敲除籼稻的Osa-miR166e-3pi基因，获得抽穗期提前的株系。
7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，所述方法为利用CRISPR/Cas9多基因编辑系统敲除水稻籼稻Osa-miR166e-3pi基因，获得抽穗期提前的株系。
8.根据权利要求7所述方法，其特征在于，所述CRISPR/Cas9多基因编辑系统敲除籼稻的Osa-miR166e-3pi基因的步骤为：
9.根据权利
10.根据权利要求6～9任一所述方法，其特征在于，所述籼稻为黄华占。
...【技术特征摘要】
1.osa-mir166e-3pi基因在调控籼稻抽穗期中的应用，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述应用为osa-mir166e-3pi基因在调控籼稻抽穗期提前中的应用。
3.权利要求1中所述的osa-mir166e-3pi基因在创建水稻短生育期种质中的应用。
4.根据权利要求1～3任一所述应用，其特征在于，所述水稻为籼稻。
5.根据权利要求4所述应用，其特征在于，所述籼稻为黄华占。
6.一种使籼稻抽穗期提前的方法，其特征在于，所述方法为功能敲除籼稻的osa-mir166e-3pi基因，获得抽穗期提前的株系。
【专利技术属性】
技术研发人员：张群宇，王红梅，袁健铭，刘耀光，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：
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