一种产赖氨酸的重组微生物及其构建方法与应用技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，具体公开了一种产赖氨酸的重组微生物及其构建方法与应用。本发明专利技术提供的重组微生物的构建方法，通过代谢工程手段，对与赖氨酸合成相关的特定基因的表达进行了优化，包括使出发菌株强化表达基因lysC、asd、dapA、dapB和ddh，并失活或弱化表达基因pck和dapD的步骤。进一步包括使出发菌株强化表达基因tkt、gnd、pyc、aspA、aceA、aceB、lysG和lysE，以及失活或弱化表达基因hom、ldhA和gntR，弱化icd基因编码的异柠檬酸脱氢酶的表达活性的步骤。最终获得的基因工程菌株可用于赖氨酸的高效发酵生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，具体地说，涉及一种产赖氨酸的重组微生物及其构建方法与应用。

技术介绍

1、谷氨酸棒杆菌(corynebacterium glutamicum)是革兰氏阳性微生物，具有生长速度快、非致病、对自身代谢物降解能力弱的特性。作为传统工业微生物，谷氨酸棒杆菌广泛用于生产多种氨基酸、核苷酸及其他有机酸。

2、谷氨酸棒杆菌用于生产氨基酸的历史可追溯到20世纪60年代，谷氨酸棒杆菌可以在自然环境下生产谷氨酸，诱变的谷氨酸棒杆菌还可以生产赖氨酸、缬氨酸等多种氨基酸。随着代谢工程技术和基因组测序技术的快速发展，对谷氨酸棒杆菌的代谢路径研究越来越清晰，研究者们陆续鉴定到很多遗传学上的高产机理，并实现了多种代谢产物的高效生产。

3、l-赖氨酸是碱性必需氨基酸，分子式为c6h14n2o2，外观为白色或近乎于白色结晶粉末。l-赖氨酸在210℃变暗，在224.5℃下分解，易溶于水，微溶于醇，不溶于醚。l-赖氨酸广泛应用于动物饲料、医药和食品工业，其中l-赖氨酸约90％用于饲料工业，10％用于食品和医药行业。用于动物饲料添加剂，l-赖氨酸可本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组微生物的构建方法，其特征在于，包括使出发菌株强化表达基因lysC、asd、dapA、dapB和ddh，并失活或弱化表达基因pck和dapD的步骤。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，还包括使出发菌株强化表达基因tkt、gnd的步骤。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，还包括使出发菌株强化表达基因pyc、aspA、aceA和aceB，并失活或弱化表达基因hom和ldhA，弱化icd基因编码的异柠檬酸脱氢酶的表达活性的步骤。

4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，还包括使出发菌株强化表达基因lysG和lysE，并...

【技术特征摘要】

1.一种重组微生物的构建方法，其特征在于，包括使出发菌株强化表达基因lysc、asd、dapa、dapb和ddh，并失活或弱化表达基因pck和dapd的步骤。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，还包括使出发菌株强化表达基因tkt、gnd的步骤。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，还包括使出发菌株强化表达基因pyc、aspa、acea和aceb，并失活或弱化表达基因hom和ldha，弱化icd基因编码的异柠檬酸脱氢酶的表达活性的步骤。

4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，还包括使出发菌株强化表达基因lysg和lyse，并失活或弱化表达基因gnt...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡丹，王亚迪，冯帆，赵津津，李岩，
申请(专利权)人：廊坊梅花生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：