【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物工程，具体涉及一种寨卡病毒减毒株、其相关产品及其在制备寨卡病毒疫苗中的应用。
技术介绍
1、寨卡病毒(zika virus，zikv)属于黄病毒科，黄病毒属，主要通过伊蚊叮咬进行传播，另外有研究表明其也可以通过性接触方式进行传播。寨卡病毒的基因组是长度约为11kb单股正链rna，包括5′和3′的非编码区及单一开放读码框，该读码框编码3种结构蛋白：衣壳蛋白(c)、膜蛋白前体/膜蛋白(prm/m)和包膜糖蛋白(e)及7种非结构蛋白(ns1、ns2a、ns2b、ns3、ns4a、ns4b和ns5)。
2、寨卡病毒病是由寨卡病毒感染引起的一种急性自限性疾病，感染者中只有20％会有轻微症状，临床表现一般为轻微的发热，皮疹、结膜炎、肌肉和关节疼痛、不适或头痛，症状通常持续2-7天，因此起初并未引起人们的足够重视。然而，寨卡病毒感染孕妇可能会导致胎儿异常及新生儿小头症(microcephaly)(lucchese and kanduc,2016；mlakar etal.,2016)。此外，孕妇感染寨卡病毒可导致婴儿出生时患有小头畸形和其他先天性畸形，称为先天性寨卡综合征。寨卡病毒感染还与其他妊娠并发症有关，包括早产和流产。此外，研究显示，成人感染寨卡病毒可能会导致神经系统疾病格林-巴利综合征。寨卡疫情持续扩大，根据who公布的最新数据，截至2017年3月10日，有84个国家或地区发生蚊媒传播的寨卡病毒感染，31个国家或地区存在与寨卡病毒感染相关的新生儿小头畸形，23个国家或地区存在与寨卡病毒感染相关的gbs病例数
3、疫苗是行之有效的针对病毒性传染病的预防手段。为了防控寨卡病毒，在过去的几年间，全世界不同国家地区的研究者开发了多种不同类型的寨卡病毒候选疫苗，包括核酸疫苗(dna/rna)、亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗、病毒载体疫苗、灭活疫苗以及减毒活疫苗。
4、相比其他类型疫苗，减毒活疫苗具有单剂量、快速免疫和持久保护的优势。例如，黄热病17d减毒活疫苗(yf17d)是有史以来最出色的人类疫苗之一，它可以诱导广泛的先天性体液和细胞介导的免疫反应，单次接种疫苗后可能产生终身保护。再如，减毒乙型脑炎病毒sa14-14-2是一种有良好的安全性和显着的疗效。然而，它们都是通过将亲本病毒连续传代到细胞或动物中进行减毒而凭经验开发的，具有耗时长、不确定性以及减毒机制不清晰等缺陷。如今，基于分子病毒学的发展和对病毒发病机制的了解，可以通过对病毒基因组的人工操作，例如通过在病毒基因组中引入突变或缺失来合理设计减毒活病毒。本领域急需开发一种能够切实有效地预防寨卡病毒感染的寨卡病毒减毒活疫苗，以应对未来可能的寨卡病毒感染。
5、公开于该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
技术实现思路
1、专利技术目的
2、针对上述现有技术中存在的缺陷，本专利技术的目的在于提供一种重组寨卡病毒减毒株、其相关产品及其在制备用于预防和/或治疗寨卡病毒感染的药物(特别是疫苗)中的应用。
3、解决方案
4、为实现本专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
5、第一方面，本专利技术提供了一种重组寨卡病毒减毒株，所述重组寨卡病毒减毒株相比于genebank登录号为ku963796的野生型寨卡病毒(其基因组rna所对应的cdna的核苷酸序列如seq id no:1所示)至少包括以下非同义突变：非结构蛋白1(ns1)中第123位的苯丙氨酸突变为丙氨酸或其它非极性氨基酸。
6、作为优选，所述重组寨卡病毒减毒株相比于genebank登录号为ku963796的野生型寨卡病毒具有以下突变：非结构蛋白1中第123位的苯丙氨酸突变为丙氨酸；
7、进一步优选地，所述重组寨卡病毒减毒株的基因组rna所对应的cdna的核苷酸序列如seq id no:2所示。
8、所述重组寨卡病毒减毒株可通过以下方法获得：
9、通过本领域技术人员所熟知的反向遗传学操作技术，基于genebank序列号为ku963796的野生型寨卡病毒的全长感染性克隆，向其中引入有关突变(例如，导致ns1蛋白中第123位的苯丙氨酸突变为丙氨酸的核苷酸突变)，通过体外转录以及rna细胞转染，并最终获得重组突变病毒。
10、第二方面，本专利技术提供了一种重组寨卡病毒cdna，所述重组寨卡病毒cdna为genebank登录号为ku963796的野生型寨卡病毒的基因组rna所对应的cdna且在其上引入突变，使得所编码蛋白中至少包括以下非同义突变：非结构蛋白1中第123位的苯丙氨酸突变为丙氨酸或其它非极性氨基酸。
11、作为优选，所述重组寨卡病毒cdna为genebank登录号为ku963796的野生型寨卡病毒的基因组rna所对应的cdna且在其上引入突变，使得所编码的非结构蛋白1中第123位的苯丙氨酸突变为丙氨酸；
12、进一步优选地，所述重组寨卡病毒cdna的核苷酸序列如seq id no:2所示。
13、第三方面，本专利技术提供了一种重组寨卡病毒表达蛋白，其为如权利要求1或2所述的重组寨卡病毒减毒株所表达的蛋白，或者，其为如权利要求3或4所述的重组寨卡病毒cdna所翻译的蛋白。
14、第四方面，本专利技术提供了一种核酸构建体，所述核酸构建体包含如上述第二方面所述的重组寨卡病毒cdna，以及任选地，与之可操作地连接的至少一个表达调控元件。
15、第五方面，本专利技术提供了一种重组表达载体，所述重组表达载体插入有可用于表达如上述第三方面所述的重组寨卡病毒表达蛋白的基因，或者，所述重组表达载体插入有如上述第二方面所述的重组寨卡病毒cdna。
16、第六方面，本专利技术提供了一种宿主细胞，其中转化或转染有如上述第二方面所述的重组寨卡病毒cdna、如上述第四方面所述的核酸构建体或如上述第五方面所述的重组表达载体。
17、第七方面，本专利技术提供了一种重组寨卡病毒疫苗，所述疫苗的活性成分包括：如上述第一方面所述的重组寨卡病毒减毒株，或者如上述第二方面所述的重组寨卡病毒cdna，或者如上述第三方面所述的重组寨卡病毒表达蛋白，或者如上述第四方面所述的核酸构建体，或者如上述第五方面所述的重组表达载体，或者如上述第六方面所述的宿主细胞。
18、第八方面，本专利技术提供了如上述第一方面所述的重组寨卡病毒减毒株，或者如上述第二方面所述的重组寨卡病毒cdna，或者如上述第三方面所述的重组寨卡病毒表达蛋白，或者如上述第四方面所述的核酸构建体，或者如上述第五方面所述的重组表达载体，或者如上述第六方面所述的宿主细胞在制备用于预防和/或治疗寨卡病毒感染的药物中的应用；<本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种重组寨卡病毒减毒株，其特征在于，所述重组寨卡病毒减毒株相比于Genebank登录号为KU963796的野生型寨卡病毒至少包括以下非同义突变：非结构蛋白1中第123位的苯丙氨酸突变为丙氨酸或其它非极性氨基酸。
2.根据权利要求1所述的重组寨卡病毒减毒株，其特征在于，所述重组寨卡病毒减毒株相比于Genebank登录号为KU963796的野生型寨卡病毒具有以下突变：非结构蛋白1中第123位的苯丙氨酸突变为丙氨酸；
3.一种重组寨卡病毒cDNA，其特征在于，所述重组寨卡病毒cDNA为Genebank登录号为KU963796的野生型寨卡病毒的基因组RNA所对应的cDNA且在其上引入突变，使得所编码蛋白中至少包括以下非同义突变：非结构蛋白1中第123位的苯丙氨酸突变为丙氨酸或其它非极性氨基酸。
4.根据权利要求3所述的重组寨卡病毒cDNA，其特征在于，所述重组寨卡病毒cDNA为Genebank登录号为KU963796的野生型寨卡病毒的基因组RNA所对应的cDNA且在其上引入突变，使得所编码的非结构蛋白1中第123位的苯丙氨酸突变为丙氨酸；
<...【技术特征摘要】
1.一种重组寨卡病毒减毒株，其特征在于，所述重组寨卡病毒减毒株相比于genebank登录号为ku963796的野生型寨卡病毒至少包括以下非同义突变：非结构蛋白1中第123位的苯丙氨酸突变为丙氨酸或其它非极性氨基酸。
2.根据权利要求1所述的重组寨卡病毒减毒株，其特征在于，所述重组寨卡病毒减毒株相比于genebank登录号为ku963796的野生型寨卡病毒具有以下突变：非结构蛋白1中第123位的苯丙氨酸突变为丙氨酸；
3.一种重组寨卡病毒cdna，其特征在于，所述重组寨卡病毒cdna为genebank登录号为ku963796的野生型寨卡病毒的基因组rna所对应的cdna且在其上引入突变，使得所编码蛋白中至少包括以下非同义突变：非结构蛋白1中第123位的苯丙氨酸突变为丙氨酸或其它非极性氨基酸。
4.根据权利要求3所述的重组寨卡病毒cdna，其特征在于，所述重组寨卡病毒cdna为genebank登录号为ku963796的野生型寨卡病毒的基因组rna所对应的cdna且在其上引入突变，使得所编码的非结构蛋白1中第123位的苯丙氨酸突变为丙氨酸；
5.一种重组寨卡病毒表达蛋白，其特征在于，其为如权利要求1或2所述的重组寨卡病毒减毒株所表达的蛋白，或者，其为如权利要求3或4所述的重组寨卡病毒cdn...
【专利技术属性】
技术研发人员：高福，宋豪，李世华，许晓莹，施一，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：
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