一种基于巢式PCR和荧光PCR检测乙肝病毒的试剂盒和方法技术

本发明专利技术公开了一种基于巢式PCR和荧光PCR检测乙肝病毒的试剂盒，属于乙肝病毒检测技术。所述试剂盒包括用于扩增乙肝病毒DNA序列BCP/PC区序列的第一引物对和第二引物对，用于扩增乙肝病毒DNA序列S区序列的第三引物对和第四引物对，用于扩增乙肝病毒DNA序列Pre‑C/C区序列的第五引物对和第六引物对；还包括用于扩增乙肝病毒DNA序列Pre‑S/S区序列的第七引物对，以及能够特异性与所述第七引物对的扩增产物结合的探针。利用本发明专利技术检测乙肝病毒能避免引物错配同时又增加检出概率，因而灵敏度很高(1IU/ml)。同时不需要依赖较多专门的仪器设备，能在数小时内完成目标富集和序列构建及基因定型，适用于各种乙肝病毒载量极低感染状况(如隐匿性乙肝)的检测，具有非常重要的临床应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于乙肝病毒检测技术，具体地，涉及一种基于巢式pcr和荧光pcr检测乙肝病毒的试剂盒。

技术介绍

1、隐匿性乙型肝炎病毒感染(occult hepatitis b virus infection，obi)定义hbsag阴性且肝组织存在可复制的hbv dna(染色体外hbv cccdna)和/或血液存在hbv dna的一种状态，根据是否存在血清学标记物抗-hbc和/或抗-hbs分为血清学阳性obi与血清学阴性obi。obi可经输血或器官移植等方式传播hbv，与慢性肝损伤或肝细胞癌有关；obi个体在免疫机能下降或处于免疫抑制状态时可导致hbv活化。obi可经血液传播，给输血安全带来极大的威胁。obi主要特征是病毒载量低，甚至靠概率性检出。由于只能靠dna检测才能发现感染，给obi的检出和基因定型带来极大困惑。

2、同时，检测发现obi又存在极频繁的病毒基因突变性，这些突变，一方面影响hbsag分泌，影响hbsag检测，从而导致hbsag检测为阴性。另一方面，影响hbv dna正常生成，导致极低病毒载量obi的产生。同时病毒基因突变也会导致本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于巢式PCR和荧光PCR检测乙肝病毒的试剂盒，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一引物对如SEQ ID No.1和SEQID No.2所示；所述第二引物对如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示；所述第三引物对如SEQID No.5和SEQ ID No.6所示；所述第四引物对如SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示；所述第五引物对如SEQ ID No.9和SEQ ID No.10所示；所述第六引物对如SEQ ID No.11和SEQ IDNo.12所示；所述第七引物对如SEQ ID No.13和SEQ ID...

【技术特征摘要】

1.一种基于巢式pcr和荧光pcr检测乙肝病毒的试剂盒，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一引物对如seq id no.1和seqid no.2所示；所述第二引物对如seq id no.3和seq id no.4所示；所述第三引物对如seqid no.5和seq id no.6所示；所述第四引物对如seq id no.7和seq id no.8所示；所述第五引物对如seq id no.9和seq id no.10所示；所述第六引物对如seq id no.11和seq idno.12所示；所述第七引物对如seq id no.13和seq id no.14所示，所述探针如seq idno.15所示。

3.根据权利要求1或2...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶贤林，李彤，
申请(专利权)人：深圳市血液中心深圳市输血医学研究所，
类型：发明
国别省市：