一种基于甲酸氧化酶的双酶-无机杂化纳米花、制备方法及其在甲酸盐检测中的应用技术

一种基于甲酸氧化酶的双酶‑无机杂化纳米花、制备方法及其在甲酸盐检测中的应用，属于酶学和生物检测技术领域。本发明专利技术采用共沉淀法成功制备了双酶‑无机杂化纳米花固定化体系，其在抗干扰能力、酶的稳定性上得到显著提升，同时基于比色传感可以快速、灵敏地检测甲酸盐。与其他甲酸盐检测方法相比，FOx@HRP检测系统表现出明显的优势，如操作简单、检测速度快、成本低、不依赖昂贵的辅助因子等，并且满足了实际应用中长距离运输和长期储存的需要，可用于在生化分析和临床诊断中快速、灵敏地检测甲酸盐，为甲酸盐的快速检测提供了一个行之有效的策略，在未来的生化分析和临床诊断中具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶学和生物检测，具体涉及一种基于甲酸氧化酶的双酶-无机杂化纳米花、制备方法及其在甲酸盐检测中的应用。

技术介绍

1、甲酸盐(formate)是自然界中最简单的有机羧酸类小分子物质，在物理、化学和生物学领域中均扮演着重要的角色，甲酸钠是最常见的甲酸盐。作为一种化学小分子物质，甲酸盐广泛用于各类商品制造业，在多种日常用品中均可检测到甲酸盐残留。此外，甲酸盐浓度的改变也与多种疾病的进程密切相关，因此在多种疾病的诊断及预防中具有重要的意义。现有的甲酸盐检测法主要基于色谱法和质谱法，其存在诸多限制，如仪器成本高、检测速度慢、操作复杂、需要昂贵的nadh辅因子以及存在假阳性结果等，不适合作为甲酸盐的快速检测，特别是在临床检测中。因此，建立一种灵敏、高效、稳定、成本低、易操作的甲酸盐检测方法至关重要。

2、酶基生物传感器是以酶为生物敏感元件的生物传感装置，具有催化活性高、底物专一性强、反应条件温和等特性，已被证明适用于对多种待测物进行定性和定量分析。甲酸氧化酶(formate oxidase,fox)是葡萄糖-甲醇-胆碱氧化还原酶超家族的成员，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于甲酸氧化酶的双酶-无机杂化纳米花的制备方法，其特征在于：是在磷酸缓冲液中加入HRP充分溶解，并向其中加入CuSO4溶液，混合均匀后于2～8℃静置孵育22～24h，得到HRP-无机杂化纳米花晶体内核溶液；再加入FOx混合均匀，继续于2～8℃静置孵育44～48h，得到外层为FOx、内层为HRP-无机杂化纳米花溶液，记为FOx@HRP无机杂化纳米花溶液；最后，将得到的FOx@HRP无机杂化纳米花溶液于4℃下离心，收集所得蓝色沉淀并反复用去离子水吹打洗涤2～5次，冷冻干燥后得到FOx@HRP无机杂化纳米花；HRP为辣根过氧化物酶，FOx为甲酸氧化酶。

2.如权利要求1所述...

【技术特征摘要】

1.一种基于甲酸氧化酶的双酶-无机杂化纳米花的制备方法，其特征在于：是在磷酸缓冲液中加入hrp充分溶解，并向其中加入cuso4溶液，混合均匀后于2～8℃静置孵育22～24h，得到hrp-无机杂化纳米花晶体内核溶液；再加入fox混合均匀，继续于2～8℃静置孵育44～48h，得到外层为fox、内层为hrp-无机杂化纳米花溶液，记为fox@hrp无机杂化纳米花溶液；最后，将得到的fox@hrp无机杂化纳米花溶液于4℃下离心，收集所得蓝色沉淀并反复用去离子水吹打洗涤2～5次，冷冻干燥后得到fox@hrp无机杂化纳米花；hrp为辣根过氧化物酶，fox为甲酸氧化酶。

2.如权利要求1所述的一种基于甲酸氧化酶的双酶-无机杂化纳米花的制备方法，其特征在于：hrp的浓度为0.2～0.3mg/ml，cuso4的浓度为25～30mg/m...

【专利技术属性】
技术研发人员：李全顺，陶钰，梁骁，赵启轩，张书迪，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：