高通量单核苷酸多态性检测方法技术

一种高通量单核苷酸多态性检测方法，检测步骤为：磁性纳米颗粒的修饰；引物的设计；制备磁珠阵列；扩增样本的全基因组扩增产物或者多重ＰＣＲ产物；延伸反应；反应完成后，经洗涤，去除微流体反应池盖片和磁体，应用生物芯片扫描仪获得所检测样本的生物信息。本发明专利技术克服了目前单核苷酸多态性检测方法的许多不足，具有操作简单、快速、高通量、高灵敏度等优点，有较高的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种高通量单核苷酸多态性检测方法，其特征在于检测步骤为：ａ．磁性纳米颗粒的修饰：对无荧光背景的磁性颗粒表面进行功能化修饰；ｂ．引物的设计：选取待检测的重要功能ＳＮＰ位点或突变位点，根据上述位点碱基序列设计单碱基延伸引物，引物的３’端与ＳＮＰ位点的上游一个碱基互补，５’端经过功能化修饰共价连接到磁珠表面，得到延伸引物－磁珠复合物；ｃ．制备磁珠阵列：选取洁净的载玻片，其一面粘附有杂交反应池，载玻片另一面年附有永磁体，将延伸引物－磁珠复合物点样于杂交反应池之内，复合物通过永磁体磁场固定于玻片表面；ｄ．扩增样本的全基因组扩增产物或者多重ＰＣＲ产物；ｅ．延伸反应：延伸反应的体系中包括磁珠延伸引物，扩增产物模板ＤＮＡ，与待检测相关ＳＮＰ位点相对应的荧光标记的ｄｄＮＴＰ，Ｍｇ↑［２＋］、缓冲液、ＤＮＡ聚合酶，通过退火使得靶序列和延伸引物结合，在ＤＮＡ聚合酶的作用下，与待检测位点相对应的荧光标记的ｄｄＮＴＰ延伸在引物３’端；ｆ．反应完成后，经洗涤，去除微流体反应池盖片和磁体，应用生物芯片扫描仪获得所检测样本的生物信息。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：何农跃，李松，刘洪娜，
申请(专利权)人：何农跃，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]