【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及复杂食品基质中的目标化合物快速富集、提取的敞开式在线快速质谱分析领域，具体的，涉及广谱性抗体修饰的免疫探针的制备及适用于该离子源装置的探针敞开式质谱分析检测，更具体地，涉及氟喹诺酮类化合物免疫探针式质谱离子源、制备该氟喹诺酮类化合物免疫探针的方法、一种提取氟喹诺酮类化合物的方法，以及一种对氟喹诺酮类化合物进行定性/定量检测的方法。
技术介绍
1、存在于食物和环境中的兽药抗生素残留可能会对人类产生不良副作用，如会产生过敏反应和细菌抗生素耐药性。因此，有必要准确、快速地监测抗生素残留水平。质谱(ms)以其强大的定性和高通量分析能力受到研究人员的青睐，基于质谱的无标记快速检测平台的开发越来越受到关注。
2、由此，制备该氟喹诺酮类化合物免疫探针式质谱离子源的方法以及利用标记快速检测平台对食物和环境中的兽药抗生素痕量残留进行定性和定量检测的方法均有待研究。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提出一种氟喹诺酮类化合物免疫探针式质谱离子源，适于氟喹诺酮药物(fqs)的多残留检测的基于广谱性抗体的高选择性敞开式质谱的检测，该免疫探针式质谱离子源装置能够提高待测样品的离子化效率和灵敏度，待测化合物检测速度快，准确率高，尤其适于氟喹诺酮药物(fqs)的痕量吸附和检测。
2、需要说明的是，本专利技术是基于专利技术人的下列工作而完成的：
3、敞开式电离质谱(aims)的样品前处理简便、无需色
4、广谱性抗体是针对同一类目标化合物而言的抗体，对一类具有相同母核结构的化合物具有较好的特异性和亲和力。与现有的基于氧化石墨烯，共价有机框架，分子印迹聚合物等吸附材料相比，广谱性抗体具有以下优点：(1)可以识别靶标的多个位点，抗非特异性吸附能力强。基质效应和非特异性吸附可以通过增加抗体的量来减少。(2)根据分析物的不同结构和不同的分析要求，可以筛选出具有不同亲和力和敏感性的抗体。此外，通过不同亲和力的抗体的组合可以实现对靶标及其类似物的均匀性识别。
5、专利技术人通过链霉亲和素(sa)-生物素相互作用将能识别氟喹诺酮药物的生物素化抗体(sa-biotin-ab)偶联到钨针尖端上，制备了高选择性基片用于富集fqs，实现了广谱性抗体与钨针尖端-ms的结合。
6、因而，根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种免疫探针式质谱离子源。根据本专利技术的实施例，该氟喹诺酮类化合物免疫探针式质谱离子源包括：金属探针固定支架；三维微调控制台，所述三维微调控制台与所述金属探针固定支架相连；免疫探针，所述免疫探针的一端与所述三维微调控制台相连；所述免疫探针，包括：金属探针；氧化石墨烯层，所述氧化石墨烯层覆盖在所述金属探针端部的至少部分表面上，且所述氧化石墨烯层表面修饰链霉亲和素；抗体层，所述抗体层覆着在所述氧化石墨烯层的至少部分表面上，所述抗体层包括生物素修饰的广谱性抗体；高压电源，所述高压电源与所述免疫探针相连。
7、根据本专利技术实施例的氟喹诺酮类化合物免疫探针式质谱离子源，氧化石墨烯(go)具有大的比表面积和丰富的含氧官能团，如表面的羧基，可以为生物分子的共价偶联提供丰富的反应位点，通过氧化石墨烯可以耦合大量链霉亲和素，再通过链霉亲和素和生物素偶联，将广谱抗体吸附在金属探针表面，抗体的固定量大，检测的准确性和精密度高；并且，该免疫探针无需复杂样品前处理即可进行待测化合物的提取，提取方法简单，效率高。
8、另外，根据本专利技术上述实施例的免疫探针式质谱离子源，还可以具有如下附加的技术特征：
9、根据本专利技术的实施例，所述金属探针为钨针(tn)。
10、根据本专利技术的实施例，所述钨针的长度为5cm，尖端1-5μm。
11、根据本专利技术的实施例，所述氧化石墨烯层的厚度为1-3μm。
12、根据本专利技术的实施例，所述广谱性抗体的固定化量为约为10-25μg/根。
13、根据本专利技术的实施例，所述广谱性抗体特异性结合氟喹诺酮类化合物。
14、根据本专利技术的实施例，所述广谱性抗体包括：重链可变区，所述重链可变区(vh)包含抗原决定区(cdrs)1、2和3；轻链可变区，所述轻链可变区(vl)包含抗原vl cdrs1、2和3；其中，所述vh cdrs 1、2和3的氨基酸序列分别如seq id no：3、4和5所示，所述vl cdrs1、2和3的氨基酸序列分别如seq id no：6、7和8所示。
15、根据本专利技术的实施例，所述vh包括seq id no：1所示的氨基酸序列，所述vl包括seq id no：2所示的氨基酸序列。
16、根据本专利技术的实施例，制备前述氟喹诺酮类化合物免疫探针式质谱离子源的方法包括：使金属探针端部表面覆着粘附液，并与氧化石墨烯粉末进行第一接触，以便得到氧化石墨烯覆着的探针；对所述氧化石墨烯覆着的探针上的所述氧化石墨烯的羧基进行活化处理，以便得到活化后的探针；将所述活化后的探针与链霉亲和素进行第二接触，以便使链霉亲和素与活化后的所述氧化石墨反应，以便得到链霉亲和素修饰的探针；将所述链霉亲和素修饰的探针进行蛋白封闭处理，以便得到封闭后的探针；以及将封闭后的探针与生物素修饰的广谱性抗体进行第三接触，以便获得所述氟喹诺酮类化合物免疫探针，其中，所述广谱性抗体特异性结合氟喹诺酮类化合物。
17、根据本专利技术实施例的制备前述氟喹诺酮类化合物免疫探针式质谱离子源的方法，通过粘附液在金属探针表面粘附氧化石墨烯，氧化石墨烯具有大的比表面积和丰富的含氧官能团，如表面的羧基，可以为生物分子的共价偶联提供丰富的反应位点，通过氧化石墨烯可以耦合大量链霉亲和素，再通过链霉亲和素和生物素偶联，将广谱抗体吸附在金属探针表面，制备得到的免疫探针的抗体的固定量大，检测的准确性和精密度高，使用方法简单。
18、根据本专利技术的实施例，所述氧化石墨烯粉末的厚度为0.8-1.2nm，宽度为1-15μm。
19、根据本专利技术的实施例，利用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(edc)进行所述活化处理。
20、根据本专利技术的实施例，所述第二接触的时间为0.5-1.5小时。
21、根据本专利技术的实施例，所述第三接触的时间为15-本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种免疫探针式质谱离子源装置，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的质谱离子源装置，其特征在于，所述金属探针为钨针，
3.根据权利要求1所述的质谱离子源装置，其特征在于，所述氧化石墨烯层的厚度1-3μm，
4.根据权利要求1所述的质谱离子源装置，其特征在于，所述广谱性抗体特异性结合氟喹诺酮类化合物，
5.根据权利要求1所述的质谱离子源装置，其特征在于，制备所述免疫探针的方法包括：
6.根据权利要求5所述的质谱离子源装置，其特征在于，所述氧化石墨烯粉末的厚度为0.8-1.2nm，宽度为1-15μm，
7.根据权利要求5所述的质谱离子源装置，其特征在于，所述第二接触的时间为0.5-1.5小时，
8.根据权利要求2-7所述的质谱离子源装置，其特征在于，所述氟喹诺酮类化合物为选自诺氟沙星(NOF)、依诺沙星(ENO)、培氟沙星(PEF)、氧氟沙星(OFL)、洛美沙星(LOM)和沙拉沙星(SAR)中的至少一种。
9.一种对氟喹诺酮类化合物进行定性/定量检测的方法，其特征在于，包括：p>
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述分析处理为高压连接金属探针电喷雾质谱检测，
...【技术特征摘要】
1.一种免疫探针式质谱离子源装置，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的质谱离子源装置，其特征在于，所述金属探针为钨针，
3.根据权利要求1所述的质谱离子源装置，其特征在于，所述氧化石墨烯层的厚度1-3μm，
4.根据权利要求1所述的质谱离子源装置，其特征在于，所述广谱性抗体特异性结合氟喹诺酮类化合物，
5.根据权利要求1所述的质谱离子源装置，其特征在于，制备所述免疫探针的方法包括：
6.根据权利要求5所述的质谱离子源装置，其特征在于，所述氧化石墨烯粉末的厚度为0.8-1.2n...
【专利技术属性】
技术研发人员：张峰，陈凤明，国伟，冯峰，
申请(专利权)人：中国检验检疫科学研究院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。