System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种有效降解石油类物质的菌株及其获取方法和应用技术_技高网

一种有效降解石油类物质的菌株及其获取方法和应用技术

技术编号:39952728 阅读:5 留言:0更新日期:2024-01-08 23:25
本发明专利技术公开了一种有效降解石油类物质的菌株及其获取方法和应用,该菌株命名为SJAW4,保藏编号为CCTCC No.M2020779;获取方法如下:采集被石油污染的土壤作为微生物源;制备含烷烃或多环芳烃的液体无机盐培养基,调pH值至7.0‑7.2,高温灭菌,待温度降低后将土壤接种,在恒温摇床培养箱中进行富集培养;重复富集培养多次后,在固体无机盐培养基平板上反复划线培养,直至分离出单菌株,将单菌株接种入液体无机盐培养基内驯化;重复上述划线、分离与驯化3‑5次即可。本发明专利技术菌株具有在高盐与重金属条件下,高效降解烷烃与多环芳烃物质的特性,可应用于含此类污染物(如石油类物质)的环境治理与土壤修复。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及环境工程和微生物工程,特别涉及一种有效降解石油类物质的菌株及其获取方法和应用


技术介绍

1、石油污染是指石油开采、运输、装卸、加工和使用过程中,由于泄漏和排放石油引起的污染。石油污染物主要包括石油烷烃类、芳烃类(如菲、蒽等)、联苯类、苯系物等物质,同时还混杂有重金属、盐碱等多种化合物;其中,石油烷烃组分(c13-c33)占石油类污染物的大部分,相对含量可达到30%~70%。石油类污染物进入水体或土壤后,造成土壤盐碱化与毒化,导致土壤破坏和废毁;石油中的多环芳烃类化合物、联苯类化合物与苯系物等均具有强烈的三致效应,生物累积效应强,直接威胁着生物体和人类的健康。

2、目前,生物法是修复石油污染土壤的修复方法有效方法之一,近年来发展迅速。生物修复技术,与物理法和化学法相比,具有成本低、操作简单、二次污染小等优势。由于微生物资源丰富、易于培养、对环境的耐受性较强,因此,微生物修复是已成为石油生物修复中的主要方法,应用前景广阔。筛选或富集获得可有效分解石油污染物的微生物菌株是微生物修复石油污染环境的核心,也是实现实际环境生物修复的基础。由于实际石油污染环境成分复杂,有机物烷烃类、芳烃类大多混杂有盐碱、重金属等多种无机成分,不仅会导致受污染土壤易板结、盐碱度与重金属含量超标等,而且也要求筛选的降解菌株既要降解效能强,也要环境适应性好。因此,筛选与鉴定可在高盐与重金属条件下有效降解烷烃与芳烃这两类化合物的微生物菌株,有助于实现石油污染土壤的有效修复。


技术实现思路

1、针对上述问题,本专利技术的目的在于:提供一种有效降解石油类物质的菌株及其获取方法和应用。

2、为了实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:

3、本专利技术公开了一种有效降解石油类物质的菌株,命名为sjaw4,其保藏编号为cctcc no.m2020779。

4、优选地,所述菌株的16s rdna片段的序列如seq id no.1所示。

5、本专利技术公开了一种有效降解石油类物质的菌株的获取方法,具体步骤如下:

6、采集被石油污染的土壤作为微生物源;

7、制备含烷烃或多环芳烃的液体无机盐培养基,调ph值至7.0-7.2,高温灭菌;

8、待液体无机盐培养基温度降低后,将土壤在超净台下接种,在恒温摇床培养箱中进行富集培养;

9、重复富集培养多次后,在固体无机盐培养基平板上反复划线培养,直至分离出单菌株,之后将单菌株接种入上述含烷烃或多环芳烃的液体无机盐培养基内驯化;重复上述划线、分离与驯化操作3-5次,得到纯化的嗜麦寡养食单胞菌菌株,命名为sjaw4,其保藏编号为cctcc no.m2020779。

10、优选地,液体无机盐培养基中烷烃或多环芳烃的浓度为500-2000mg/l。

11、优选地,所述的烷烃包括c10-c30的烷烃,所述多环芳烃为菲。

12、优选地,所述高温灭菌的条件为:121℃灭菌15-20min。

13、优选地,所述调ph值至7.0-7.2为采用盐酸调ph值至7.0-7.2。

14、优选地,所述待液体无机盐培养基温度降低后,将土壤在超净台下接种,于恒温摇床培养箱中进行富集培养的具体过程如下:

15、待液体无机盐培养基温度降低至25-30℃后,将土壤按照3w/v%的接种量在超净台下接种,在28℃、180-200rpm的恒温摇床培养箱中进行富集培养。

16、优选地,所述的液体无机盐培养基的无机成分及浓度如下:k2hpo4,0.5g/l;kh2po4,1.815g/l;nacl,0.5g/l;(nh4)2hpo4,0.825g/l;mgcl2·6h2o,20mg/l;fecl3,0.2mg/l;cacl2,2mg/l;na2so4,200mg/l;kno3,1.2625g/l。

17、本专利技术公开了一种有效降解石油类物质的菌株的应用,分解与去除在高盐和/或重金属环境中的石油类物质。

18、优选地,所述高盐环境为含有氯化钠的环境且氯化钠的浓度不低于2.0g/l;所述重金属环境为含有氯化铜或氯化铬的环境,且氯化铜或氯化铬的浓度不低于5mg/l。

19、本专利技术的有益效果在于:

20、本专利技术的嗜麦寡养食单胞菌sjaw4可利用烷烃或多环芳烃为唯一碳源,可在含2g/l的烷烃与1g/l的多环芳烃的培养基中正常生长,可耐受高达2.0g/l的氯化钠或5mg/l氯化铜或5mg/l氯化铬。该菌株能在36小时内将初始浓度为500mg/l的c18-c24的长链烷烃或多环芳烃完全分解,72小时可分解高达1g/l的c18-c24的长链烷烃和500mg/l的多环芳烃,七天该菌株对2g/l的c18-c24的长链烷烃的分解率大于85%。

21、综上所述:本专利技术的嗜麦寡养食单胞菌sjaw4菌株具有在高盐与重金属条件下,高效降解烷烃与多环芳烃物质的特性,可应用于含有此类污染物的环境治理与土壤修复。与现已发现的石油降解菌株相比,其降解效率显著提高,环境适应性更好,降解周期明显缩短。

22、本专利技术的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述,并且,部分地从说明书中变得显而易见,或者通过实施本专利技术而了解。本专利技术的目的和其他优点可通过在说明书、权利要求书及附图中所指出的结构来实现和获得。

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【技术保护点】

1.一种有效降解石油类物质的菌株,其特征在于,命名为SJAW4,其保藏编号为CCTCCNo.M2020779。

2.根据权利要求1所述的有效降解石油类物质的菌株,其特征在于,所述菌株的16SrDNA片段的序列如SEQ ID NO.1所示。

3.一种有效降解石油类物质的菌株的获取方法,其特征在于,具体步骤如下:

4.根据权利要求3所述的有效降解石油类物质的菌株的获取方法,其特征在于,液体无机盐培养基中烷烃或多环芳烃的浓度为500-2000mg/L。

5.根据权利要求3所述的有效降解石油类物质的菌株的获取方法,其特征在于,所述的烷烃包括C10-C30的烷烃,所述多环芳烃为菲。

6.根据权利要求3所述的有效降解石油类物质的菌株的获取方法,其特征在于,所述高温灭菌的条件为:121℃灭菌15-20min。

7.根据权利要求3所述的有效降解石油类物质的菌株的获取方法,其特征在于,所述调pH值至7.0-7.2为采用盐酸调pH值至7.0-7.2。

8.根据权利要求3所述的有效降解石油类物质的菌株的获取方法,其特征在于,所述待液体无机盐培养基温度降低后,将土壤在超净台下接种,在恒温摇床培养箱中进行富集培养的具体过程如下:

9.根据权利要求3所述的有效降解石油类物质的菌株的获取方法,其特征在于,所述的液体无机盐培养基的无机成分及浓度如下:K2HPO4,0.5g/L;KH2PO4,1.815g/L;NaCl,0.5g/L;(NH4)2HPO4,0.825g/L;MgCl2·6H2O,20mg/L;FeCl3,0.2mg/L;CaCl2,2mg/L;Na2SO4,200mg/L;KNO3,1.2625g/L。

10.一种如权利要求1-2任意一项所述的有效降解石油类物质的菌株的应用,其特征在于:分解与去除在高盐和/或重金属环境中的石油类物质。

11.根据权利要求10所述的有效降解石油类物质的菌株的应用,其特征在于:所述高盐环境为含有氯化钠的环境且氯化钠的浓度不低于2.0g/L;所述重金属环境为含有氯化铜或氯化铬的环境,且氯化铜或氯化铬的浓度不低于5mg/L。

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【技术特征摘要】

1.一种有效降解石油类物质的菌株,其特征在于,命名为sjaw4,其保藏编号为cctccno.m2020779。

2.根据权利要求1所述的有效降解石油类物质的菌株,其特征在于,所述菌株的16srdna片段的序列如seq id no.1所示。

3.一种有效降解石油类物质的菌株的获取方法,其特征在于,具体步骤如下:

4.根据权利要求3所述的有效降解石油类物质的菌株的获取方法,其特征在于,液体无机盐培养基中烷烃或多环芳烃的浓度为500-2000mg/l。

5.根据权利要求3所述的有效降解石油类物质的菌株的获取方法,其特征在于,所述的烷烃包括c10-c30的烷烃,所述多环芳烃为菲。

6.根据权利要求3所述的有效降解石油类物质的菌株的获取方法,其特征在于,所述高温灭菌的条件为:121℃灭菌15-20min。

7.根据权利要求3所述的有效降解石油类物质的菌株的获取方法,其特征在于,所述调ph值至7.0-7.2为采用盐酸调ph值至7.0-7.2。

8.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员:郑瑾杜显元谢加才高春阳李丹丹吴慧君尹献旗李军蓝
申请(专利权)人:中国石油天然气股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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