【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利申请主张2021年3月3日提交的美国临时专利申请第63/156123及2021年8月27日提交的美国临时专利申请第63/237602的优先权，其各自的全部内容通过引用而并入本文。
技术介绍
1、本公开一般涉及神经生物学、医学及医疗程序的领域。更具体而言，其涉及具有经改良的炎症/抗炎症特性的从人类脐带(huc)材料中萃取的经改良的生物材料、以及这些材料在神经病变的治疗中的用途。
2、疼痛性神经病变大部分为非手术性地进行治疗，通常通过全身施用镇痛剂或nsaids(非类固醇抗发炎药)来治疗疼痛。作为第一道防线，镇痛剂及nsaids可根据损伤类型来解决神经性疼痛；然而，若镇痛剂或nsaid疗法不能缓解疼痛，则二级治疗选项会变得更具侵入性或风险更大，例如施用类固醇抗发炎药(如皮质类固醇)、抗惊厥(anti-convulsant)药物(如普瑞巴林(pregabalin))或手术会成为选项。
3、不幸的是，现有的第一线治疗如镇痛剂及nsaids的限制在于它们不能有效地解决许多患者的疼痛性神经病变。许多患者将接受二级治疗选项，例如手术或伴随更大的副作用风险的药物(即类固醇或抗惊厥药)。接受这些更具风险的疗法的大多数患者通常会经历的副作用包括体液滞留(fluid retention)、体重增加、头痛、胃痛及肿胀。因此需要用于治疗神经病变的经改良的组合物及方法。
技术实现思路
1、在至少一个方面，本公开提供了一种经生理性缓冲的人类脐带(huc)萃取物组合物，其包括经ecm
2、组合物可进一步包含交联剂，如京尼平(genipin)或转谷氨酰胺酶，以及其他合适的交联剂/交联剂。凝胶形成剂，例如聚合凝胶形成剂，例如热聚合凝胶形成剂，可为或可包括纤维蛋白、胶原蛋白i、胶原蛋白ii、胶原蛋白iii、胶原蛋白iv、胶原蛋白v、胶原蛋白viii、胶原蛋白x、胶原蛋白xi、胶原蛋白xxiv、胶原蛋白xxvii中的一种或多种。一些示例中，经ecm降解蛋白酶处理的huc组织包括huc膜且热聚合凝胶形成剂不是纤维蛋白。该组合物可为缓冲于约ph 7.2至7.4的基于生理盐水的悬浮液。
3、该组合物可以进一步包括一种或多种生物分子，例如透明质酸、硫酸软骨素(chondroitin sulfate)、壳聚糖、peg、胶原蛋白vi、胶原蛋白vii、胶原蛋白ix、胶原蛋白xii、胶原蛋白xiii、胶原蛋白xiv、胶原蛋白xv、胶原蛋白xvi、胶原蛋白xvii、胶原蛋白xviii、胶原蛋白xix、胶原蛋白xx、胶原蛋白xxi、胶原蛋白xxii、胶原蛋白xxiii、胶原蛋白xxvi和/或胶原蛋白xxviii。至少一个示例中，该组合物不包含硫酸软骨素。该组合物可包括微粒化颗粒。例如，大多数微粒化颗粒的直径可为约140nm与约160nm之间。
4、还提供了一种制造此类组合物的方法。例如，该方法可以制造人类脐带(huc)萃取物，该方法包括：(a)提供huc膜和/或huc基质；(b)机械性撞击该huc膜和/或该huc基质以产生微粒化颗粒；及(c)以ecm降解蛋白酶处理：(i)机械性撞击之前的步骤(a)的组合物；(ii)机械性撞击过程中的步骤(b)的组合物；和(iii)由步骤(b)产生的该微粒化颗粒中的一种或多种。
5、本文的方法可进一步包括使蛋白酶失活。在ecm降解蛋白酶失活后，可添加原位凝胶形成剂，例如聚合凝胶形成剂。该方法可以进一步包括聚合凝胶形成剂。聚合可发生于存在交联剂如京尼平或转谷氨酰胺酶的情况下。
6、凝胶形成剂可为或可包括纤维蛋白、胶原蛋白i、胶原蛋白ii、胶原蛋白iii、胶原蛋白iv、胶原蛋白v、胶原蛋白viii、胶原蛋白x、胶原蛋白xi、胶原蛋白xxiv、胶原蛋白xxvii中的一种或多种。原位凝胶形成剂，例如聚合凝胶形成剂，能够以约0.1mg/ml至8mg/ml存在。在步骤(a)中可提供约0.5至1.0cm2的包括huc膜和/或基质的huc组织。步骤(a)中提供的huc膜和/或基质可分散在缓冲于约ph 6.0与8.0之间的基于生理盐水的悬浮液中。
7、机械性撞击进行1至约5个循环之间。此外，举例来说，机械性撞击能够以每个循环约60秒的持续时间，以范围从例如约3400rpm至约3700rpm的速度进行。本文的方法可进一步包括在ecm降解蛋白酶处理之前以如约5000xg的速度离心微粒化颗粒。
8、蛋白酶，例如ecm降解蛋白酶，可为胶原蛋白酶或基质金属蛋白酶(mmp)，如胶原蛋白酶i、胶原蛋白酶iii、mmp-2、mmp-3或mmp-7。例如在该ecm降解蛋白酶失活后，可对该组合物添加透明质酸、硫酸软骨素、壳聚糖、peg、胶原蛋白vi、胶原蛋白vii、胶原蛋白ix、胶原蛋白xii、胶原蛋白xiii、胶原蛋白xiv、胶原蛋白xv、胶原蛋白xvi、胶原蛋白xvii、胶原蛋白xviii、胶原蛋白xix、胶原蛋白xx、胶原蛋白xxi、胶原蛋白xxii、胶原蛋白xxiii、胶原蛋白xxvi或胶原蛋白xxviii中的一种或多种。机械性撞击可提供直径约140nm至约160nm之间，例如平均直径范围为约140nm至约150nm的粒度分布的大多数微粒化颗粒。
9、本公开还包括治疗周边神经病变的方法，包括在周围神经病变部位或附近对受试者施用(例如注射)本文所述的组合物。例如，治疗周边神经病变的方法可包括将通过本文限定的方法制备的组合物注射到受试者的周边神经病变部位处或附近。受试者可为人类、灵长类动物、非人类哺乳动物或另一种脊椎动物或动物。该方法可进一步包括以第二疗法如镇痛疗法、nsaid疗法和/或抗惊厥药物治疗该受试者。本文的方法还可包括至少第二次、第三次、第四次或第五次或在持续或永久、慢性的基础上，对该受试者施用、例如注射该组合物。
10、如本文所使用的说明书，“一”及“一个”表示一个或多个。如本文所用，当与词语“包括”结合使用时，词语“一”及“一个”表示一个或多于一个。
11、术语“或”的使用用于表示“和/或”，除非明确指出仅指代替代方案或替代方案相互排斥，尽管本公开支持仅指替代方案与“和/或”的定义。如本文所用，“另一个”是指至少第二个或两个或更多个。
12、贯穿本申请中，术语“约”用于指示包括装置的固有误差变化、用于确定该值的方法或研究受试者之间所存在的变化的值。除非另有说明，否则术语“约”应理解为涵盖特定量或值的±5％。
13、本公开的其他目的、特征及优点于以下详细描述中将更为显而易见。然而，应该理解的是，详细描述及具体示例虽然指示了本专利技术的具体实施方式，但仅以说明的方式提供，因为从该详细描述，在本专利技术的精神及范本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种经生理性缓冲的人类脐带(hUC)萃取物组合物，其特征在于包括经ECM降解蛋白酶处理的hUC的微粒化颗粒。
2.如权利要求1所述的组合物，其中所述hUC包括hUC膜、hUC基质或hUC膜与hUC基质的组合。
3.如权利要求1所述的组合物，其进一步包括凝胶形成剂，例如原位聚合凝胶形成剂。
4.如权利要求3所述的组合物，其中所述凝胶形成剂以约0.1至8mg/ml存在。
5.如权利要求1所述的组合物，其进一步包括交联剂，如京尼平或转谷氨酰胺酶。
6.如权利要求3所述的组合物，其中所述凝胶形成剂包括纤维蛋白、胶原蛋白I、胶原蛋白II、胶原蛋白III、胶原蛋白IV、胶原蛋白V、胶原蛋白VIII、胶原蛋白X、胶原蛋白XI、胶原蛋白XXIV、胶原蛋白XXVII、聚乙二醇、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚(乙二醇)二丙烯酸酯、甲基丙烯酸化明胶或甲基丙烯酸化透明质酸中的一种或多种。
7.如权利要求1所述的组合物，其中所述经ECM降解蛋白酶处理的hUC包括hUC膜，且所述凝胶形成剂不是纤维蛋白。
8.如权利要求1所述
9.如权利要求1所述的组合物，其中所述组合物进一步包括透明质酸、硫酸软骨素、壳聚糖、PEG、胶原蛋白VI、胶原蛋白VII、胶原蛋白IX、胶原蛋白XII、胶原蛋白XIII、胶原蛋白XIV、胶原蛋白XV、胶原蛋白XVI、胶原蛋白XVII、胶原蛋白XVIII、胶原蛋白XIX、胶原蛋白XX、胶原蛋白XXI、胶原蛋白XXII、胶原蛋白XXIII、胶原蛋白XXV、胶原蛋白XXVI和/或胶原蛋白XXVIII中的一种或多种。
10.如权利要求1所述的组合物，其中大部分所述微粒化颗粒的直径为约80nm与约180nm之间，如约140nm与约160nm之间。
11.一种生产人类脐带(hUC)萃取物的方法，其特征在于包括：
12.如权利要求11所述的方法，其进一步包括使所述蛋白酶失活。
13.如权利要求12所述的方法，其中在所述ECM降解蛋白酶失活后添加凝胶形成剂，例如原位聚合凝胶形成剂。
14.如权利要求13所述的方法，其进一步包括聚合所述原位凝胶形成剂。
15.如权利要求14所述的方法，其中聚合发生于存在交联剂的情况下。
16.如权利要求15所述的方法，其中所述交联剂为京尼平或转谷氨酰胺酶。
17.如权利要求13所述的方法，其中所述凝胶形成剂包括纤维蛋白、胶原蛋白I、胶原蛋白II、胶原蛋白III、胶原蛋白IV、胶原蛋白V、胶原蛋白VIII、胶原蛋白X、胶原蛋白XI、胶原蛋白XXIV、胶原蛋白XXVII、聚乙二醇、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚(乙二醇)二丙烯酸酯、甲基丙烯酸化明胶或甲基丙烯酸化透明质酸中的一种或多种。
18.如权利要求13所述的方法，其中所述凝胶形成剂以约0.1至8mg/ml存在。
19.如权利要求11所述的方法，其中在步骤(a)中提供0.5至1.0cm2的hUC膜和/或hUC基质。
20.如权利要求11所述的方法，其中将步骤(a)中提供的所述hUC膜和/或所述hUC基质分散在缓冲于约pH 6.0与8.0之间的基于生理盐水的悬浮液中。
21.如权利要求11所述的方法，其中所述机械性撞击进行1至约5个循环之间，每个循环持续约60秒，速度范围为约3400RPM至约3700RPM。
22.如权利要求21所述的方法，其进一步包括在ECM降解蛋白酶处理之前离心所述微粒化颗粒。
23.如权利要求11所述的方法，其中所述ECM降解蛋白酶为胶原蛋白酶或基质金属蛋白酶(MMP)。
24.如权利要求23所述的方法，其中所述蛋白酶为胶原蛋白酶I、胶原蛋白酶蛋白II、胶原蛋白酶III、胶原蛋白酶IV、胶原蛋白酶V、胶原蛋白酶VI、胶原蛋白酶VII、MMP-2、MMP-3或MMP-7中的一种或多种。
25.如权利要求23所述的方法，其中所述胶原蛋白酶为胶原蛋白酶I或胶原蛋白酶III中的一种或多种。
26.如权利要求11所述的方法，其中在所述ECM降解蛋白酶失活后，对所述组合物添加透明质酸、硫酸软骨素、壳聚糖、PEG、胶原蛋白I、胶原蛋白II、胶原蛋白III、胶原蛋白IV、胶原蛋白V、胶原蛋白VI、胶原蛋白VII、胶原蛋白IX、胶原蛋白XII、胶原蛋白XIII、胶原蛋白XIV、胶原蛋白XV、胶原蛋白XVI、胶原蛋白XVII、胶原蛋白XVIII、胶原蛋白X...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种经生理性缓冲的人类脐带(huc)萃取物组合物，其特征在于包括经ecm降解蛋白酶处理的huc的微粒化颗粒。
2.如权利要求1所述的组合物，其中所述huc包括huc膜、huc基质或huc膜与huc基质的组合。
3.如权利要求1所述的组合物，其进一步包括凝胶形成剂，例如原位聚合凝胶形成剂。
4.如权利要求3所述的组合物，其中所述凝胶形成剂以约0.1至8mg/ml存在。
5.如权利要求1所述的组合物，其进一步包括交联剂，如京尼平或转谷氨酰胺酶。
6.如权利要求3所述的组合物，其中所述凝胶形成剂包括纤维蛋白、胶原蛋白i、胶原蛋白ii、胶原蛋白iii、胶原蛋白iv、胶原蛋白v、胶原蛋白viii、胶原蛋白x、胶原蛋白xi、胶原蛋白xxiv、胶原蛋白xxvii、聚乙二醇、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚(乙二醇)二丙烯酸酯、甲基丙烯酸化明胶或甲基丙烯酸化透明质酸中的一种或多种。
7.如权利要求1所述的组合物，其中所述经ecm降解蛋白酶处理的huc包括huc膜，且所述凝胶形成剂不是纤维蛋白。
8.如权利要求1所述的组合物，其中所述组合物为缓冲在约ph 7.2至7.4的基于生理盐水的悬浮液，或其中所述组合物被配制成凝胶如水凝胶。
9.如权利要求1所述的组合物，其中所述组合物进一步包括透明质酸、硫酸软骨素、壳聚糖、peg、胶原蛋白vi、胶原蛋白vii、胶原蛋白ix、胶原蛋白xii、胶原蛋白xiii、胶原蛋白xiv、胶原蛋白xv、胶原蛋白xvi、胶原蛋白xvii、胶原蛋白xviii、胶原蛋白xix、胶原蛋白xx、胶原蛋白xxi、胶原蛋白xxii、胶原蛋白xxiii、胶原蛋白xxv、胶原蛋白xxvi和/或胶原蛋白xxviii中的一种或多种。
10.如权利要求1所述的组合物，其中大部分所述微粒化颗粒的直径为约80nm与约180nm之间，如约140nm与约160nm之间。
11.一种生产人类脐带(huc)萃取物的方法，其特征在于包括：
12.如权利要求11所述的方法，其进一步包括使所述蛋白酶失活。
13.如权利要求12所述的方法，其中在所述ecm降解蛋白酶失活后添加凝胶形成剂，例如原位聚合凝胶形成剂。
14.如权利要求13所述的方法，其进一步包括聚合所述原位凝胶形成剂。
15.如权利要求14所述的方法，其中聚合发生于存在交联剂的情况下。
16.如权利要求15所述的方法，其中所述交联剂为京尼平或转谷氨酰胺酶。
17.如权利要求13所述的方法，其中所述凝胶形成剂包括纤维蛋白、胶原蛋白i、胶原蛋白ii、胶原蛋白iii、胶原蛋白iv、胶原蛋白v、胶原蛋白viii、胶原蛋白x、胶原蛋白xi、胶原蛋白xxiv、胶原蛋白xxvii、聚乙二醇、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚(乙二醇)二丙烯酸酯、甲基丙烯酸化明胶或甲基丙烯酸化透明质酸中的一种或多种。
18.如权利要求13所述的方法，其中所述凝胶形成剂以约0...
【专利技术属性】
技术研发人员：基里·K·哈梅克，特蕾西·洛夫，阿莱克·西蒙，
申请(专利权)人：阿克松根股份公司，
类型：发明
国别省市：
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