一种重组人粒细胞刺激因子的纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种重组人粒细胞刺激因子的纯化方法，采用的大肠杆菌表达重组人粒细胞刺激因子ｒｈＧ－ＣＳＦ为包涵体形式，包括下述纯化步骤：（１）采用优化的包涵体洗涤液配方进行洗涤，获得高纯度的包涵体；（２）对洗涤后的包涵体样品进行超滤复性；（３）复性后样品通过Ｃａｐｔｏ?ＶｉｒａｌＱ柱层析；（４）然后通过Ｓｕｐｅｒｄｅｘ?７５凝胶过滤柱层析，得到纯化后的重组人粒细胞刺激因子ｒｈＧ－ＣＳＦ原液。本发明专利技术具有工艺简便快速，步骤少，收率高，纯度高，样品各项指标均符合欧洲药典要求，在兼顾环保的同时，提高药品的安全性、可控性和有效性的特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。属于蛋白质纯化领域，是简 单高效地制备高纯度，高收率的药用rhG-CSF原液的方法。
技术介绍
rhG-CSF是调节骨髓中粒系造血的主要细胞因子之一，选择性作用于粒系造 血祖细胞，促进其增殖、分化，并可增加粒系终末分化细胞的功能。人G-CSF的氨基酸 序列为TPLGPASSLP QSFLLKCLEQVRKIQGDGAA LQEKLCATYK LCHPEELVLL GHSLGIPWAP LSSCPSQALQLAGCLSQLHS GLFLYQGLLQ ALEGISPELG PTLDTLQLDV ADFATTIWQQMEELGMAPAL QPTQGAMPAF ASAFQRRAGG VLVASHLQSF LEVSYRVLRHLAQP1991年，第一个通过大肠杆菌表达系统生产的rhG-CSF药物 Filgrastim(Neupogen，r-metHuG-CSF，Amgen Inc)在美国上市，1993 年，通过 CH0 表达系统W^C N"irnW rhG-CSF Lenograstim(Granocyte,Chugai PharmaceuticalCo. Ltd.)在欧洲上本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组人粒细胞刺激因子的纯化方法，采用的大肠杆菌表达重组人粒细胞刺激因子ｒｈＧ－ＣＳＦ为包涵体形式，其特征在于包括下述纯化步骤：　　（１）采用优化的包涵体洗涤液配方进行洗涤，获得高纯度的包涵体；　　（２）对洗涤后的包涵体样品进行超滤复性；（３）复性后样品通过Ｃａｐｔｏ　ＶｉｒａｌＱ柱层析；　　（４）然后通过Ｓｕｐｅｒｄｅｘ　７５凝胶过滤柱层析，得到纯化后的重组人粒细胞刺激因子ｒｈＧ－ＣＳＦ原液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孙黎，蔡慧丽，何艳，杨美花，裴广强，林崧，余东新，
申请(专利权)人：厦门特宝生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：92[中国|厦门]