草果种质资源离体保存方法及应用技术

本发明专利技术涉及种质资源保护与利用技术领域，具体来说是一种草果种质资源离体保存方法及应用，方法包括：前处理培养：无菌芽接种于前处理培养基中光暗交替培养；保存培养：将前处理培养无菌芽去叶后接种于种质保存培养基中光暗交替培养；复壮培养：种植保存培养以后无菌芽接种于复壮培养基培养

【技术实现步骤摘要】
草果种质资源离体保存方法及应用


[0001]本专利技术涉及种质资源保护与利用
，具体来说是一种草果种质资源离体保存方法及应用
。

技术介绍

[0002]草果（
Amomum tsaoko Crevost & Lem.
）是姜科豆蔻属多年生草本植物
。
茎丛生，全株有辛香气，地下部分略似生姜叶片长椭圆形或长圆形，两面光滑无毛；苞片披针形，顶端渐尖；花冠红色；唇瓣椭圆形；蒴果密生，长圆形或长椭圆形，无毛；种子多角形，有浓郁香味
。
[0003]目前全国草果种植面积近
200
万亩，其中以云南种植面积为最大，占全国种植面积的
60
～
70%
，是全国最大的草果产业基地
。
目前草果的繁殖方式主要包括：种子繁殖和分株繁殖，种子繁殖存在育苗周期长（2～3年），品种纯正性差等缺点，而分株繁殖虽然能最大程度的保持母本性状，但发现其在种植过程中由于种植年限长，使得其退化严重，同时由于病虫害的积累，极易导致病虫害大流行
。
[0004]现有种质保存技术的植物，大多采用低温冷藏的方法保存，但低温冷藏需要特定的环境和设施设备，投资大且保存成本高，而对于草果而言，没有特定的种质保存技术，也没有通过生化试剂达到保存草果种质的方法，若草果采用现有组培技术进行不停的继代，需要大量人力物力进行保存，另一方面会因继代次数过多，会导致品种退化激素积累以及增加变异概率
。
[0005]因此，建立草果长久的离体保存技术对草果种质资源保存工作具有重要的意义
。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是针对现有技术中品种退化严重的问题，提供一种草果种质资源离体保存方法及应用
。
[0007]为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：一种草果种质资源离体保存方法，步骤包括：（1）前处理培养：无菌芽接种于前处理培养基中，
25
±
2℃
条件下
、
光照强度
2000
～
3000lx
，单日光照时间
10h
进行光暗交替培养
15
～
20
天；所述前处理培养基配方为：
1/2MS+
蔗糖
55
～
65g/L+
甘露醇5～
15g/L、pH
为
6.2
～
6.4
；（2）种质保存培养：将前处理培养无菌芽去叶后接种于种质保存培养基中，
25
±
2℃
条件下
、
光照强度
2000
～
3000lx
，单日光照时间
8h
进行光暗交替培养；所述种质保存培养基配方为：
1/4MS+ABA 1.2
～
1.5mg/L+CCC 0.4
～
0.8mg/L+
蔗糖
10
～
20g/L+
甘露醇
30
～
40g/L
，
pH
为
6.2
～
6.4
；（3）复壮培养：种质保存培养以后无菌芽接种于复壮培养基中，在
25
±
2℃
条件下
、
光照强度
2000
～
3000lx
，单日光照时间
12h
进行光暗交替培养
30
～
40
天；
所述复壮培养基配方为：
MS+NAA 0.02
～
0.1mg/L+KT 4.0
～
6.0mg/L+GA3 1.2
～
2.5mg/L+
蔗糖
20g/L。
[0008]进一步的，所述前处理培养基配方为：
1/2MS+
蔗糖
60g/L+
甘露醇
10g/L
，
pH
为
6.3。
[0009]进一步的，所述种质保存培养基配方为：
1/4MS+ABA 1.3mg/L+CCC 0.6mg/L+
蔗糖
15g/L+
甘露醇
35g/L
，
pH
为
6.3。
[0010]进一步的，所述复壮培养基配方为：
MS+NAA 0.06mg/L+KT 5.0mg/L+GA3 2.0 mg/L+
蔗糖
20g/L。
[0011]本专利技术中，无菌芽的获得采用本申请人专利
《
一种草果组培育苗方法
》
（公开号：
CN 111616049 A
）获得丛生芽
。
[0012]本专利技术的有益技术效果是：
1、
目前种质保存技术采用低温保存较为成熟，且复壮成活率高，复壮后能稳定达到原保存前生长速度，但低温保存存在能耗高，需要较大且专门的冷藏设施设备进行保存，投资较大，而本专利技术利用蔗糖和甘露醇调节渗透势和植物生长调节剂来使草果种质钝化，从而达到抑制生长的目的，可在常温条件下进行保存，最大程度的减少了能耗以及设施设备的投资，可批量性进行种质保存
。
[0013]2、
本专利技术采用前处理培养基和种质保存培养基相结合，可使草果种质在常温条件下保存
12
个月以上
。
[0014]3、
本专利技术的种质保存后，采用本专利技术的复壮培养基，其复壮率高达
78%
以上，同时复壮后的苗继续继代培养，其苗的状态以及增殖系数等，均达到种质保存前的数据
。
附图说明
[0015]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图
。
[0016]图1是本专利技术实施例1复壮时的苗
。
[0017]图2是本专利技术对比例1复壮时的苗
。
[0018]图3是本专利技术对比例2复壮时的苗
。
具体实施方式
[0019]下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚
、
完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例
。
基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围
。
[0020]实施例1[0021]一种草果种质资源离体保存方法，步骤包括：（1）参考本申本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种草果种质资源离体保存方法，其特征在于，步骤包括：（1）前处理培养：无菌芽接种于前处理培养基中，
25
±
2℃
条件下
、
光照强度
2000
～
3000lx
，单日光照时间
10h
进行光暗交替培养
15
～
20
天；所述前处理培养基配方为：
1/2MS+
蔗糖
55
～
65g/L+
甘露醇5～
15g/L
，
pH
为
6.2
～
6.4
；（2）种质保存培养：将前处理培养无菌芽去叶后接种于种质保存培养基中，
25
±
2℃
条件下
、
光照强度
2000
～
3000lx
，单日光照时间
8h
进行光暗交替培养；所述种质保存培养基配方为：
1/4MS+ABA 1.2
～
1.5mg/L+CCC 0.4
～
0.8mg/L+
蔗糖
10
～
20g/L+
甘露醇
30
～
40g/L
，
pH
为
6.2
～
6.4
；（3）复壮培养：种质保存培养以后无菌芽接种于复壮培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：张金渝，曾祥飞，杨维泽，赵露琴，起明菊，邓清，许宗亮，杨天梅，杨美权，
申请(专利权)人：云南植虫药生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：