【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物组培，具体来说是一种滇橄榄组培快繁育苗方法及应用。
技术介绍
1、滇橄榄( phyllanthus emblica linn .)又名云南余甘子，是大戟科落叶灌木或乔木植物余甘子的果实。植物春季开花，花小，单生黄色，雌雄同株。果实肉质，扁球形，熟时呈红色。产于亚洲热带地区，我国南部常见。为一种重要的药食两用植物资源。滇橄榄果汁风味独特，营养丰富，除了含有氨基酸和微量元素外，更为重要的是它vc含量高，且由于黄酮和单宁类物质的保护，滇橄榄经加工后其vc的留存率仍高达72％，远远高于其它果蔬。果实入药，具有清热利咽，润肺化痰，生津止渴之功效。现代研究，滇橄榄具有抗氧化、清除自由基、抗肿瘤、防衰老等作用。
2、随着现代加工技术的发展，滇橄榄相关的产品（饮料、泡酒、含片等）大量被开发并取得了积极的市场效果，因此滇橄榄的需求量越来越大，人工种植滇橄榄已经在云南很多地区迅速发展。传统的种植模式需要技术人员直接到野外进行选种，选定的品种采集以后，再通过种子繁殖、扦插、嫁接等模式获得滇橄榄的种苗。但利用种子、扦插、嫁接等方式对滇橄榄进行种苗繁育存在繁育周期长、死亡率高等问题。公开号为：cn107960328a的中国专利技术专利公开了一种余甘子组织培养的方法，该方法实现了余甘子的快速繁殖目标，但针对滇橄榄品种，在实际操作过程中仍然存在增殖系数低、生根率低等问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是针对
技术介绍
中指出的问题
2、为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：一种滇橄榄组培快繁育苗方法，步骤包括：
3、（1）外植体消毒：取野生滇橄榄未木质化的顶端幼嫩茎段，经清洁后依次用75%酒精消毒30～40s、无菌水冲洗3～4次，饱和漂白粉溶液消毒40～50min、无菌水冲洗2～3次，0.15%升汞溶液消毒2～3min、无菌水冲洗7～8次；
4、（2）初代诱导培养：消毒的外植体接种于初代诱导培养基中培养25～35天；
5、所述初代诱导培养基的配方为：wpm+naa 0.02～0.05mg/l+zt 1.0～1.2mg/l+6-ba 3.0～4.0mg/l+ga3 0.1～0.2mg/l+活性炭0.8～1.3g/l；
6、（3）继代增殖培养：初代诱导的丛生芽接种于继代增殖培养基中培养30～40天；
7、所述继代增殖培养基的配方为：wpm+naa 0.01～0.02mg/l+tdz 0.8～1.0mg/l+zt0.5～1.0mg/l+尿素0.05～0.1g/l；
8、（4）生根培养：继代增殖培养的丛生芽接种于生根培养基中培养30～40天；
9、所述生根培养基的配方为：sh+iba 0.2～0.4mg/l+iaa 1.0～1.5mg/l+ppp3330.02～0.05mg/l+蛋白胨 100～200mg/l+活性炭0.1～0.3g/l；
10、（5）生根苗驯化：将组培生根苗移栽于生根基质（生根基质为泥炭土、椰糠和珍珠岩，其重量比为4:6:1）中，驯化环境为65%～75%遮阴率的大棚下，移栽后喷施一次30～40mg/l的水杨酸，后每隔5～7天喷施一次30～40mg/l的水杨酸。
11、进一步的，步骤（2）、（3）和（4）中，培养条件为：温度为23±2℃，光照强度2500～3000lx，光照8～14h进行光暗交替培养。
12、进一步的，所述初代诱导培养基的配方为：wpm+naa 0.04mg/l+zt 1.1mg/l+6-ba3.5mg/l+ga3 0.15mg/l+活性炭1.0g/l。
13、进一步的，所述继代增殖培养基的配方为：wpm+naa 0.01mg/l+tdz 0.9mg/l+zt0.8mg/l+尿素0.08g/l。
14、进一步的，所述生根培养基的配方为：sh+iba 0.3mg/l+iaa 1.2mg/l+ppp3330.04mg/l+蛋白胨 150mg/l+活性炭0.2g/l。
15、本专利技术的有益技术效果是：
16、1、一般组培就无菌体系建立时消毒方法通常采用75%酒精以及0.1%升汞进行不同消毒时间组合，但在滇橄榄的外植体消毒时，当0.1%升汞消毒时间过短，其污染率极高，基本不能建立无菌体系，而当0.1%升汞消毒时间延长，其消毒污染率显著下降，但消毒死亡率却急剧上升，且即使外植体没有死亡，亦不能很好的诱导出丛生芽，本专利技术在常规消毒剂组合的基础上，创造性的添加了饱和漂白粉溶液，同时将常规升汞的0.1%浓度改成0.15%，可使外植体消毒污染率控制在15%以内，且死亡率控制在20%以内，同时辅以本专利技术的初代诱导培养基，可将褐化的发生或影响降到最低，且初代诱导率可高达62%以上。
17、2、本专利技术在初代诱导培养时，采用适宜浓度的naa、zt以及6-ba组合，同时添加一定浓度的ga3，可使初代诱导率达到60%以上，同时ga3的添加，节间可在很大程度的拉长，便于继代的接种操作。
18、3、本专利技术在继代增殖培养时，采用一定浓度的naa、tdz、zt搭配，同时创造性的添加一定浓度的尿素，可使增殖系数达到5.5左右，且增殖的丛生芽颜色鲜绿健壮，几乎无玻璃化现象发生，同时尿素的添加，还能很大程度的抑制花芽的发生。
19、4、本专利技术在生根培养时采用一定浓度的iba、iaa和和ppp333，可使滇橄榄的生根率达到95%以上，同时，生根时将原初代以及继代的wpm基本培养基改为sh培养基，并添加一定浓度的ppp333，可使植株以及根系更加粗壮，在进一步驯化炼苗时，有利于提高其成活率。
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1.滇橄榄组培快繁育苗方法，其特征在于，步骤包括：
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤（2）、（3）和（4）中，培养条件为：温度为23±2℃，光照强度2500～3000Lx，光照8～14h进行光暗交替培养。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述初代诱导培养基的配方为：WPM+NAA0.04mg/L+ZT 1.1mg/L+6-BA 3.5mg/L+GA3 0.15mg/L+活性炭1.0g/L。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述继代增殖培养基的配方为：WPM+NAA0.01mg/L+TDZ 0.9mg/L+ZT 0.8mg/L+尿素0.08g/L。
5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述生根培养基的配方为：SH+IBA 0.3mg/L+IAA 1.2mg/L+PPP333 0.04mg/L+蛋白胨 150mg/L+活性炭0.2g/L。
6.根据权利要求1-5任一项所述方法在滇橄榄组培快繁育苗中的应用。
【技术特征摘要】
1.滇橄榄组培快繁育苗方法，其特征在于，步骤包括：
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤（2）、（3）和（4）中，培养条件为：温度为23±2℃，光照强度2500～3000lx，光照8～14h进行光暗交替培养。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述初代诱导培养基的配方为：wpm+naa0.04mg/l+zt 1.1mg/l+6-ba 3.5mg/l+ga3 0.15mg/l+活性炭1.0g/l。
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【专利技术属性】
技术研发人员：曾祥飞，邓清，杨朝龙，魏春丽，杨如玉，
申请(专利权)人：云南植虫药生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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