一种含干细胞外泌体的组合物及其在制备含有修复作用的产品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种含干细胞外泌体的组合物及其在制备具有修复作用的产品中的应用，所述含干细胞外泌体的组合物按重量份计包括：

【技术实现步骤摘要】
一种含干细胞外泌体的组合物及其在制备含有修复作用的产品中的应用


[0001]本专利技术涉及护肤品领域，具体涉及一种含干细胞外泌体的组合物及其在制备含有修复作用的产品中的应用
。

技术介绍

[0002]皮肤覆于机体的表面其作为第一道天然屏障直接于外界接触，长时间的紫外线辐射，如果没有及时防护和修复，会导致脸部皮肤角质层变薄，容易出现过敏
、
红肿以及损伤等症状
。
[0003]间充质干细胞来源于中胚层，是一种具有自我更新和多向分化潜能的多能细胞，是组织再生
、
修复的重要干细胞群，干细胞外泌体同干细胞具有相似的生理学性能，能调节皮肤成纤维细胞增殖分化，更加安全稳定，基于此，借助干细胞外泌体修复组织的是目前研究的一大方向
。

技术实现思路

[0004]本专利技术首先提供一种含干细胞外泌体的组合物及其在制备含有修复作用的产品中的应用，所述组合物能够为皮肤提供所需要的营养，调节皮肤成纤维细胞增殖分化，修复肌肤屏障，改善肌肤状态
。
[0005]本专利技术解决技术问题采用如下技术方案：本专利技术提供一种含干细胞外泌体的组合物，其特征在于，所述组合物按重量份计包括：
0.05
‑
0.5
份脐带间充质干细胞外泌体
、2
‑6份马齿苋提取物
、1
‑3份海藻多糖
、3
‑7份玻色因
、0.6
‑
1.5
份四氢甲基嘧啶羧酸r/>、0.6
‑
1.2
份棕榈酰三肽
‑
5、0.25
‑
0.45
份透明质酸钠
、0.2
‑1份羟乙基纤维素
、0.1
‑
0.6
份神经酰胺
‑
2、0.08
‑
0.18
份1‑2戊二醇
、25
‑
35
份去离子水
。
[0006]优选地，所述含干细胞外泌体的组合物按重量份计包括：
0.21
‑
0.34
份脐带间充质干细胞外泌体
、3
‑5份马齿苋提取物
、1.5
‑
2.5
份海藻多糖
、4
‑6份玻色因
、0.9
‑
1.2
份四氢甲基嘧啶羧酸
、0.8
‑1份棕榈酰三肽
‑
5、0.3
‑
0.4
份透明质酸钠
、0.4
‑
0.8
份羟乙基纤维素
、0.3
‑
0.4
份神经酰胺
‑
2、0.12
‑
0.14
份1‑2戊二醇
、28
‑
32
份去离子水
。
[0007]优选地，所述含干细胞外泌体的组合物按重量份计包括：
0.28
份脐带间充质干细胞外泌体
、4
份马齿苋提取物
、2
份海藻多糖
、5
份玻色因
、1.1
份四氢甲基嘧啶羧酸
、0.9
份棕榈酰三肽
‑
5、0.35
份透明质酸钠
、0.6
份羟乙基纤维素
、0.35
份神经酰胺
‑
2、0.13
份1‑2戊二醇
、30
份去离子水
。
[0008]优选地，所述脐带间充质干细胞外泌体的制备方法为：
S1、
取脐带组织，放入
PBS
缓冲液中清洗3‑5次，每次7‑
10min
，去除动静脉得到沃顿胶，将沃尔顿胶剪碎成3‑
5mm
的组织块，用去离子水冲洗
15
‑
30min,
再用
PBS
缓冲液清洗4‑6次，每次5‑
7min
，得到组织块；
S2、
将组织块和复合酶溶液按照重量比
1:
（8‑
10
）混合，反应
30
‑
60min
，得到第一物
料；
S3、
将第一物料和胶原酶
I
溶液按照重量比1：（
0.2
‑
0.28
）混合，反应
15
‑
30min
，得到第二物料；
S4、
将第二物料置于
800
‑
1200r/min
条件下离心
20
‑
30min
，过
0.35
μ
m
无菌滤膜，得到细胞沉淀，用
PBS
缓冲液洗涤3次；
S5、
用平衡盐缓冲溶液洗涤细胞沉淀3次，再用2倍体积的平衡盐缓冲液重悬细胞，利用密度梯度离心法纯化细胞悬液，得到脐带间充质元代干细胞；
S6、
将脐带间充质元代干细胞以1×
10
个
/ml
的密度接种至培养基中，放置于培养箱中培养3‑
5d
，传代次数控制在
P10
以内，待细胞融合率达到
80
‑
90%
时，收集培养液上清液；
S7、
将培养液上清液于
4℃、1200r/min
条件下离心
20
‑
30min
，收集上清液，超滤浓缩去除小分子后，过
0.22
μ
m
无菌滤膜过滤除菌，得到脐带间充质干细胞外泌体
。
[0009]作为一种优选方案，所述的
PBS
缓冲液包含
1.5
‑
2.5wt%
的青霉素和1‑
3wt%
的硫酸链霉素；所述的复合酶溶液由弹性蛋白酶和中性蛋白酶按照重量比1：（
0.28
‑
0.32
）组成；所述的培养基为含8‑
10wt%FBS
的
DMEM
培养基；所述的培养箱培养条件为
35
‑
39℃、4.5
‑
5.5%CO2饱和湿度
。
[0010]优选地，所述马齿苋提取物的制备方法为：
S21、
将马齿苋用去离子水清洗，烘干，粉碎至
20
‑
40
目后，得到马齿苋粉末；
S22、
将马齿苋粉末
、
复合酶溶液按照重量比为1：（3‑6）混合后，用柠檬酸
‑
柠檬酸钠缓冲液调节提取体系的
pH...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种含干细胞外泌体的组合物，其特征在于，所述组合物按重量份计包括：
0.05
‑
0.5
份脐带间充质干细胞外泌体
、2
‑6份马齿苋提取物
、1
‑3份海藻多糖
、3
‑7份玻色因
、0.6
‑
1.5
份四氢甲基嘧啶羧酸
、0.6
‑
1.2
份棕榈酰三肽
‑
5、0.25
‑
0.45
份透明质酸钠
、0.2
‑1份羟乙基纤维素
、0.1
‑
0.6
份神经酰胺
‑
2、0.08
‑
0.18
份1‑2戊二醇
、25
‑
35
份去离子水
。2.
根据权利要求1所述的一种含干细胞外泌体的组合物，其特征在于，所述组合物按重量份计包括：
0.21
‑
0.34
份脐带间充质干细胞外泌体
、3
‑5份马齿苋提取物
、1.5
‑
2.5
份海藻多糖
、4
‑6份玻色因
、0.9
‑
1.2
份四氢甲基嘧啶羧酸
、0.8
‑1份棕榈酰三肽
‑
5、0.3
‑
0.4
份透明质酸钠
、0.4
‑
0.8
份羟乙基纤维素
、0.3
‑
0.4
份神经酰胺
‑
2、0.12
‑
0.14
份1‑2戊二醇
、28
‑
32
份去离子水
。3.
根据权利要求1所述的一种含干细胞外泌体的组合物，其特征在于，所述组合物按重量份计包括：
0.28
份脐带间充质干细胞外泌体
、4
份马齿苋提取物
、2
份海藻多糖
、5
份玻色因
、1.1
份四氢甲基嘧啶羧酸
、0.9
份棕榈酰三肽
‑
5、0.35
份透明质酸钠
、0.6
份羟乙基纤维素
、0.35
份神经酰胺
‑
2、0.13
份1‑2戊二醇
、30
份去离子水
。4.
根据权利要求1所述的一种含干细胞外泌体的组合物，其特征在于，所述脐带间充质干细胞外泌体的制备方法为：
S1、
取脐带组织，放入
PBS
缓冲液中清洗3‑5次，每次7‑
10min
，去除动静脉得到沃顿胶，将沃尔顿胶剪碎成3‑
5mm
的组织块，用去离子水冲洗
15
‑
30min,
再用
PBS
缓冲液清洗4‑6次，每次5‑
7min
，得到组织块；
S2、
将组织块和复合酶溶液按照重量比
1:
（8‑
10
）混合，反应
30
‑
60min
，得到第一物料；
S3、
将第一物料和胶原酶
I
溶液按照重量比1：（
0.2
‑
0.28
）混合，反应
15
‑
30min
，得到第二物料；
S4、
将第二物料置于
800
‑
1200r/min
条件下离心
20
‑
30min
，过
0.35
μ
m
无菌滤膜，得到细胞沉淀，用
PBS
缓冲液洗涤3次；
S5、
用平衡盐缓冲溶液洗涤细胞沉淀3次，再用2倍体积的平衡盐缓冲液重悬细胞，利用密度梯度离心法纯化细胞悬液，得到脐带间充质元代干细胞；
S6、
将脐带间充质元代干细胞以1×
10
个
/ml
的密度接种至培养基中，放置于培养箱中培养3‑
5d
，传代次数控制在
P10
以内，待细胞融合率达到
80
‑
90%
时，收集培养液上清液；
S7、
将培养液上清液于
4℃、1200r/min
条...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈忠平，
申请(专利权)人：朗姿赛尔生物科技广州有限公司，
类型：发明
国别省市：