靶向制造技术

本文公开了一种用于治疗受试者的肿瘤的组合物，该组合物包含治疗有效量的携带靶向

【技术实现步骤摘要】
靶向CSF1R的miRNA与溶瘤单纯疱疹病毒的组合疗法


[0001]本申请涉及用于癌症的治疗的组合疗法，并且具体地，涉及包含携带靶向集落刺激因子1受体
(CSF1R)
的
miRNA
的外泌体和溶瘤单纯疱疹病毒
(oHSV)
的药物组合物或试剂盒，以及使用该药物组合物和该试剂盒以用于治疗肿瘤的方法
。

技术介绍

[0002]溶瘤单纯疱疹病毒
(oHSV)
正被广泛研究以用于实体瘤的治疗
。
作为一个群体，它们具有优于传统癌症疗法的许多优点
。
具体地，
oHSV
通常包含突变，该突变使它们对先天免疫的某些方面的抑制敏感
。
因此，它们在其中对感染的一种或多种先天免疫应答受损的癌细胞中复制；但它们在其中这些先天免疫应答完整的正常细胞中不复制
。oHSV
通常被直接递送到病毒可在其中复制的肿瘤块中
。
因为它被递送到靶组织，而不是全身性施用，所以不存在抗癌药物的副作用特征
。
病毒的一个特征是诱导适应性免疫应答，这会削弱多次施用的效果
。
而
oHSV
多次用于肿瘤后，没有发现效力丧失或诱导不良反应诸如炎症反应的证据
。HSV
是能够将外源
DNA
掺入到其基因组中并在施用于肿瘤时调节这些基因的表达的大
DNA
病毒
。
适合与
oHSV
一起使用的外源基因是那些有助于诱导针对肿瘤的适应性免疫应答的基因
。
[0003]克服细胞先天免疫应答的缺陷决定了其中病毒表现出其溶瘤
oHSV
作为抗癌剂的肿瘤范围
。
缺失越广泛，则其中
oHSV
有效的癌细胞范围的限制性越大，这取决于所缺失的病毒基因的功能
。
最近的
oHSV
掺入至少一种细胞基因以增强其抗癌活性
。
[0004]基于
oHSV
的疗法的成功取决于癌细胞的破坏程度
。
在开发
oHSV
的早期，人们认识到单独的
HSV
不能杀死实体瘤中的所有癌细胞，并且
oHSV
治疗不太可能有效地消除所有癌细胞，并且在临床试验中
oHSV
对肿瘤的破坏必须涉及针对肿瘤的适应性免疫应答
。
进一步的研究表明，由感染的肿瘤细胞碎片产生的抗肿瘤免疫应答可通过掺入细胞因子来增强
。
失去细胞因子基因的
oHSV
与掺入免疫刺激性细胞因子的
oHSV
的比较证实了这一假说，并且最终导致将
GM
‑
CSF
掺入到为治疗黑素瘤而开发的
oHSV
中
。
[0005]微小
RNA(miRNA)
是一类非编码
RNA
分子，其通过与互补靶
mRNA
结合而在细胞分化
、
增殖和存活中起关键作用，导致
mRNA
翻译抑制或降解
。
仔细选择的
miRNA
靶向在疾病条件下改变的多种
mRNA
的能力使得这些分子成为作为治疗剂
(
以
miRNA
模拟物的形式
)
或作为治疗剂的靶标
(
以抗
miR
的形式
)
的令人感兴趣的候选物
。
同时，体内递送
RNA
分子的技术的进展使得基于
miRNA
的治疗剂可实行
。
这些构建体在其
RNA
骨架中具有各种修饰，以提供更高的稳定性和针对核酸酶的防护
。
[0006]尽管在临床前和临床环境中进行了广泛的研究和测试，但对治疗肿瘤的方法仍然存在未满足的需求
。

技术实现思路

[0007]在一个方面，本申请涉及一种药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的携带
靶向
CSF1R
的
miRNA
的外泌体和治疗有效量的溶瘤单纯疱疹病毒
I
型
(oHSV
‑
1)。
[0008]在一些实施方案中，该外泌体包含外泌体包装相关基序
(
下文中也称为“外泌体基序”)
，该外泌体基序任选地通过接头可操作地连接到靶向
CSF1R
的
miRNA。
在一个实施方案中，该外泌体包含抑制量的靶向
CSF1R
的
miRNA
和外泌体基序，其中该靶向
CSF1R
的
miRNA
具有与
CSF1R
的
mRNA
结合的种子序列；该外泌体基序可操作地连接到该靶向
CSF1R
的
miRNA
的种子序列，以增强将该靶向
CSF1R
的
miRNA
包装到外泌体中
。
在一些实施方案中，该外泌体基序位于该靶向
CSF1R
的
miRNA
的种子序列的下游，并且任选地通过接头与该种子序列共价连接
。
在一些实施方案中，该外泌体基序是通过使该靶向
CSF1R
的
miRNA
中除种子序列之外的一个或多个核酸突变而获得的
。
在一些实施方案中，该外泌体基序是通过组合两个单一外泌体基序而产生的双倍基序
。
在一些实施方案中，该靶向
CSF1R
的
miRNA
和该外泌体基序在可操作地连接时共享至少一个或两个核苷酸
。
[0009]在一些实施方案中，
oHSV
‑1有至少一个拷贝的
γ
34.5
基因缺失或失活
。
[0010]在一些实施方案中，
oHSV
‑1是
γ
34.5
缺陷型，其中有两个拷贝的
γ
34.5
基因缺失或失活
。
[0011]在一些实施方案中，将
oHSV
‑1进一步工程化以有一个或多个来自
UL
或
US
组分的独特基因缺失或失活
。
[0012]在一些实施方案中，
oHSV
‑1是表达免疫刺激剂
、
免疫治疗剂或二者的重组溶瘤
HSV
‑1，该免疫刺激剂选自
IL
‑
2、IL
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于治疗受试者的肿瘤的药物组合物或试剂盒，所述药物组合物或试剂盒包含
(a)
治疗有效量的外泌体，
(b)
治疗有效量的溶瘤单纯疱疹病毒
I
型
(oHSV
‑
1)
，和
(c1)
用于所述药物组合物的药学上可接受的载体，或
(c2)
任选的用于所述试剂盒的使用说明书，其中所述外泌体包含抑制量的靶向
CSF1R
的
miRNA
和外泌体基序，所述外泌体基序可操作地连接到所述靶向
CSF1R
的
miRNA
的种子序列，以增强将所述靶向
CSF1R
的
miRNA
包装到所述外泌体中
。2.
根据权利要求1所述的药物组合物或试剂盒，其中所述靶向
CSF1R
的
miRNA
的种子序列含有
SEQ ID NO.1
至
SEQ ID NO.5
的核酸序列中的任一个，或与
SEQ ID NO.1
至5的核苷酸序列中的任一个具有一个或两个核苷酸差异的核苷酸序列
。3.
根据权利要求1或2所述的药物组合物或试剂盒，其中所述外泌体基序选自
SEQ ID NO.11
至
SEQ ID NO.42
的核酸序列
。4.
根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物或试剂盒，其中所述外泌体基序位于所述靶向
CSF1R
的
miRNA
的种子序列的下游并且与其共价连接
。5.
根据权利要求1至4中任一项所述的药物组合物或试剂盒，其中所述外泌体基序是通过使所述靶向
CSF1R
的
miRNA
中除所述种子序列之外的一个或多个核酸突变而获得的
。6.
根据权利要求1至5中任一项所述的药物组合物或试剂盒，其中所述外泌体基序是通过组合两个单一外泌体基序而产生的双倍基序，其中所述两个单一外泌体基序中的任何一个选自
SEQ ID NO.11
至
SEQ ID NO.37
的核酸序列
。7.
根据权利要求1至6中任一项所述的药物组合物或试剂盒，其中所述靶向
CSF1R
的
miRNA
和所述外泌体基序在可操作地连接时共享至少一个核苷酸或两个核苷酸或者通过接头连接
。8.
根据权利要求7所述的药物组合物或试剂盒，其中所述接头由两个或更多个选自腺嘌呤
(A)、
鸟嘌呤
(G)、
胞嘧啶
(C)、
胸腺嘧啶
(T)
和尿嘧啶
(U)
的核苷酸组成
。9.
根据权利要求1至8中任一项所述的药物组合物或试剂盒，其中所述靶向
CSF1R
的
miRNA
和所述外泌体基序在可操作地连接时具有
SEQ ID NO.6
至
SEQ ID NO.10
的核酸序列中的任一个
。10.
根据权利要求1至9中任一项所述的药物组合物或试剂盒，其中所述
oHSV
‑1有至少一个拷贝的
γ
34.5
基因缺失或失活
。11.
根据权利要求1至
10
中任一项所述的药物组合物或试剂盒，其中所述
oHSV
‑1是
γ
34.5
缺陷型，其中有两个拷贝的
γ
34.5
基因缺失或失活
。12.
根据权利要求1至
11
中任一项所述的药物组合物或试剂盒，其中所述
oHSV
‑1被进一步工程化以有一个或多个来自
UL
或
US
组分的独特基因缺失或失活
。13.
根据权利要求1至
12
中任一项所述的药物组合物或试剂盒，其中所述
oHSV
‑1表达免疫刺激剂
、
免疫治疗剂或两者，所述免疫刺激剂选自
...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵晶，周旭莎，王蕾，陈晓庆，周国瑛，
申请(专利权)人：深圳市亦诺微医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：