人源抗鼠疫耶尔森菌制造技术

本发明专利技术公开了人源抗鼠疫耶尔森菌

【技术实现步骤摘要】
人源抗鼠疫耶尔森菌LcrV的抗体及其相关产品和用途


[0001]本专利技术属于生物医学
，涉及人源抗鼠疫耶尔森菌
LcrV
的抗体及其相关产品和用途
。

技术介绍

[0002]鼠疫俗称黑死病，是由鼠疫耶尔森菌
(Yersinia pestis
，以下简称鼠疫菌
)
感染引起的一种自然疫源性烈性传染病
。
人感染鼠疫后可表现为腺鼠疫
、
肺鼠疫和败血症鼠疫等，其中肺鼠疫发病急，传染性强
(
可通过飞沫传播
)
，不及时治疗病死率可达
100
％
。
鼠疫在人类历史上共引起三次大流行，共导致了约
1.6
亿人丧生
。
[0003]鼠疫菌属于耶尔森菌属
(Yersinia)
，该属的典型形态是短而粗
、
两极浓染的小杆菌，有荚膜，无鞭毛和芽孢的革兰阴性菌
。
鼠疫菌的主要保护性抗原为
F1
抗原和低钙应答
V
抗原
(low
‑
calcium response V antigen
，
LcrV)
，即
V
抗原
。
其中
F1
为细菌荚膜，是鼠疫的主要保护性抗原
。
抗
F1
抗体可协同干扰病原菌的类鞭状体结构
(injectosome)
头部的
V
抗原，同免疫细胞间的整合，从而对抗病菌的入侵
。V
抗原和其他分泌性耶氏菌外膜蛋白
(Yersinia outer protein
，
Yop)YopB
及
YopD
，由
75kb LCR
质粒编码，构成重要的
III
型分泌系统
(type III secretion system
，
T3SS)
，是鼠疫菌感染入侵的基本毒力因子和诱导机体产生保护性应答的重要抗原，抗
V
抗体可阻止效应蛋白
Yop
的递送
。V
抗原一直是鼠疫研究的热点，同样作为保护性抗原，
V
抗原和
F1
抗原具有协同保护效应，目前在研的鼠疫重组亚单位疫苗也都是采用
F1+V
的组合
。
同时针对
V
抗原的单克隆抗体也具有与
F1
抗体协同保护效果，甚至非保护性的
V
抗体也能明显提高
F1
抗体的保护效果
。
[0004]因此，本研究拟采用基因工程手段，拟从鼠疫疫苗临床试验受试者外周血中获得针对鼠疫
V
抗原的全人源单克隆抗体，初步评价鼠疫抗体与抗原结合特异性参数等，进而深入了解鼠疫的致病机制，为研究人体针对鼠疫抗原免疫应答奠定基础，为制备针对鼠疫的诊断及治疗提供候选分子
。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供人源抗鼠疫耶尔森菌
LcrV
的抗体及其相关产品和用途
。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
[0007]本专利技术的第一方面提供了一种抗鼠疫耶尔森菌
LcrV
的单克隆抗体
。
[0008]进一步，所述单克隆抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含
HCDR1
‑3，所述轻链可变区包含
LCDR1
‑3；
[0009]所述
HCDR1
‑3为如
SEQ ID NO:7
所示的重链可变区中的
HCDR1
‑3；
[0010]所述
LCDR1
‑3为如
SEQ ID NO:8
所示的轻链可变区中的
LCDR1
‑
3。
[0011]进一步，所述
HCDR1、HCDR2、HCDR3
的氨基酸序列分别如
SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3
所示或分别与
SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3
具有至少
70
％同源
性；
[0012]所述
LCDR1、LCDR2、LCDR3
的氨基酸序列分别如
SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6
所示或分别与
SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6
具有至少
70
％同源性
。
[0013]在某些实施方案中，与所述
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3
具有至少
70
％同源性的
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3
对应的抗体同样包含在本专利技术的保护范围内，其中，至少
70
％同源性包括至少
70
％同源性
、
至少
75
％同源性
、
至少
80
％同源性
、
至少
85
％同源性
、
至少
86
％同源性
、
至少
87
％同源性
、
至少
88
％同源性
、
至少
89
％同源性
、
至少
90
％同源性
、
至少
91
％同源性
、
至少
92
％同源性
、
至少
93
％同源性
、
至少
94
％同源性
、
至少
95
％同源性
、
至少
96
％同源性
、
至少
97
％同源性
、
至少
98
％同源性或者至少
99
％同源性
。
[0014]在本专利技术中，所述同源性是指一定程度的互补性
。
可以是部分同源
、
基本同源或完全同源
。
基本同源是指至少部分抑制相同序列与靶核酸杂交的部分互补序列
。
可在低严谨性条件下使用杂交实验
(Southern
或
northern
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种抗鼠疫耶尔森菌
LcrV
的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含
HCDR1
‑3，所述轻链可变区包含
LCDR1
‑3；所述
HCDR1
‑3为如
SEQ ID NO:7
所示的重链可变区中的
HCDR1
‑3；所述
LCDR1
‑3为如
SEQ ID NO:8
所示的轻链可变区中的
LCDR1
‑
3。2.
根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述
HCDR1、HCDR2、HCDR3
的氨基酸序列分别如
SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3
所示或分别与
SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3
具有至少
70
％同源性；所述
LCDR1、LCDR2、LCDR3
的氨基酸序列分别如
SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6
所示或分别与
SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6
具有至少
70
％同源性
。3.
一种双特异性抗体，其特征在于，所述双特异性抗体包含权利要求1或2所述的单克隆抗体；优选地，所述双特异性抗体还包含一个与其它抗原特异性结合的第二抗体；更优选地，所述第二抗体特异性结合鼠疫耶尔森菌
F1
抗原
。4.
一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码权利要求1或2所述的单克隆抗体或权利要求3所述的双特异性抗体；优选地，编码权利要求1或2所述单克隆抗体的重链可变区的多核苷酸序列如
SEQ ID NO:9
所示；优选地，编码权利要求1或2所述单克隆抗体的轻链可变区的多核苷酸序列如
SEQ ID NO:10
所示
。5.
一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包含权利要求4所述的多核苷酸；优选地，所述载体包括质粒
、
病毒来源的载体
、
噬菌粒
、
粘粒
、
人工染色体；更优选地，所述病毒来源的载体包括慢病毒载体
、
腺病毒载体
、
腺相关病毒载体
、
逆转录病毒载体
、
痘病毒载体
、
疱疹病毒载体
、
杆状病毒载体
。6.
一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求4所述的多核苷酸或权利要求5所述的表达载体；优选地，所述宿主细胞包括真核细胞
、
原核细胞；更优选地，所述真核细胞包括哺乳动物细胞
、
昆虫细胞
、
酵母细胞；更优选地，所述原核细胞包括大肠杆菌
、
枯草杆菌
、
假单胞菌
、
链球菌
、
放线菌；最优选地，所述哺乳动物细胞包括
NS0
细胞
、CHO
细胞
、COS
细胞
、HEK293
细胞
、Vero
细胞
、
卵母细胞
。7.
一种检测试剂或检测产品，其特征在于，所述检测试剂包含权利要求1或2所述的单克隆抗体和
/
或权利要求3所述的双特异性抗体；优选地，所述检测试剂还包含与权利要求1或2所述的单克隆抗体和
/
或权利要求3所述的双特异性抗体偶联或缀合的诊断剂；更优选地，所述诊断剂包括生物发光剂
、
化学发光剂

【专利技术属性】
技术研发人员：吴海生，张琪，吴海莲，杨晓艳，彭文轩，张黎，潘红星，
申请(专利权)人：青海省地方病预防控制所，
类型：发明
国别省市：