【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于鼠疫诊断，涉及一种特异性结合鼠疫耶尔森菌v抗原的全人源单克隆抗体，具体涉及一种特异性结合鼠疫耶尔森菌v抗原的全人源单克隆抗体rv-d1及其相关产品和应用。
技术介绍
1、鼠疫(plague)是指由鼠疫耶尔森菌(yersinia pestis)引起的自然疫源性疾病。通过鼠蚤媒介，经人的皮肤传入引起腺鼠疫，经呼吸道传入发生肺鼠疫。临床表现为发热、淋巴结肿大、肺炎、出血倾向。可发展为败血症，传染性强，死亡率高，是危害人类最严重的烈性传染病之一。鼠疫属国际检疫传染病和我国法定的甲类管理传染病。鼠疫的发生和流行直接关系到人群健康。因此，无论是预防还是治疗，都需要开发一种快速、灵敏和特异的方法来检测鼠疫耶尔森菌。经典的鼠疫耶尔森菌检测方法包括分离培养、pcr技术、全基因组和宏基因组测序等等，这些方法虽然在检测鼠疫耶尔森氏菌方面起着重要作用，但同时具有费时费力、时间周期长且效率低、需要专业人员及昂贵仪器、假阳性率高、不适于临场快速检测等问题。目前，本领域仍需要开发一种简单、快速和有效的鼠疫耶尔森菌检测方法。
2、鼠疫耶尔森菌v抗原，又称低钙反应蛋白v抗原(low-calcium response vantigen，lcrv)，是由鼠疫耶尔森菌合成并分泌的一种多功能的重要毒力因子，同时也是鼠疫耶尔森菌主要的保护性抗原，研究发现v抗原可以保护多种实验动物抵抗鼠疫耶尔森菌攻击，v抗原产生的免疫保护被特异性抗体所介导，抗v抗原的多抗血清或其单克隆抗体可以被动保护实验动物抵抗鼠疫耶尔森菌攻击。v抗原构成了ⅲ型分泌系统注射体的针
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题在于：为本领域提供一种能够特异性结合鼠疫耶尔森菌v抗原的全人源单克隆抗体，所述单克隆抗体为rv-d1，所述rv-d1的重链可变区中的hcdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no:1-3所示，轻链可变区中的lcdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no:4-6所示，其能够特异性识别鼠疫耶尔森菌v抗原，并且具有非常高的特异性和亲和力，在鼠疫耶尔森菌相关检测产品的开发和应用这一
具有重要的应用前景，基于此，专利技术人提出了本专利技术。本专利技术所要解决的以上技术问题采用以下技术方案来实现：
2、在一方面，本专利技术提供了一种特异性结合鼠疫耶尔森菌v抗原的抗体或其抗原结合片段。
3、进一步，所述抗体或其抗原结合片段包含氨基酸序列如seq id no:7所示的重链可变区中的hcdr1-3、氨基酸序列如seq id no:8所示的轻链可变区中的lcdr1-3。
4、进一步，所述hcdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no:1-3所示，所述lcdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no:4-6所示；
5、优选地，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no:7所示；
6、优选地，所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:8所示。
7、进一步，与本专利技术提供的hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3对应的氨基酸序列具有70％以上同源性的hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3对应的抗体同样包含在本专利技术的保护范围内。
8、在本专利技术中，对所述hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3的具体序列并无特别限制，只要是基于如seq id no:7所示的重链可变区、如seq id no:8所示的轻链可变区结合任何cdr编号方案(现有的cdr编号方案或将来产生的新的cdr编号方案)进行定义得到的hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3对应的抗体的氨基酸序列或核苷酸序列均在本专利技术的保护范围内。
9、在一些实施方案中，所述cdr编号方案包括但不限于：imgt编号方案、chothia编号方案、kabat编号方案、martin(增强型chothia)编号方案、abm编号方案、aho编号方案、contact编号方案中的任意一种定义或任意多种(两种或两种以上)组合，采用上述定义方式对如seq id no:7所示的重链可变区、如seq id no:8所示的轻链可变区进行定义得到的hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3对应的抗体均落入本专利技术的保护范围。
10、此外，本专利技术还提供了一种双特异性抗体或其抗原结合片段。
11、进一步，所述双特异性抗体或其抗原结合片段包含本专利技术第一方面所述的特异性结合鼠疫耶尔森菌v抗原的抗体或其抗原结合片段，以及与所述抗体或其抗原结合片段功能性连接的具有另一种抗原结合特性的抗体或其抗原结合片段。
12、在本专利技术中，对所述功能性连接的方式并无特别限制，所述功能性连接的方式包括但不限于：通过化学偶联、基因融合、非共价结合或其它方式连接。
13、在另一方面，本专利技术提供了一种核酸分子。
14、进一步，所述核酸分子编码本专利技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段、本专利技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段的重链可变区或本专利技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段的轻链可变区；
15、优选地，编码本专利技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段的重链可变区的核酸分子的核苷酸序列如seq id no:9所示；
16、优选地，编码本专利技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段的轻链可变区的核酸分子的核苷酸序列如seq id no:10所示。
17、在一些实施方案中，可以使用标准分子生物学技术来获得本专利技术所述的核酸分子。一旦获得编码vh区段的dna片段，进一步通过标准重组dna技术操作这些dna片段，以例如将可变区基因转变为全长抗体链基因、或抗原结合片段dna片段。在这些操作中，将编码vh的dna片段可操作的连接至编码另一蛋白质，诸如抗体恒定区或柔性接头的另一dna片段。
18、在一些实施方案中，本专利技术所述的核酸分子优选为分离的核酸分子，其中，分离的是指已经从其产生环境(例如，天然的或重组的)的组分中识别、分离和/或回收的核酸分子。其产生环境的污染组分通常是干扰其研究、诊断或治疗用途的物质，可以包括酶、激素和其他蛋白质或非蛋白质溶质。分离的核酸分子通常将通过至少一个纯化步骤来制备。
19、在另一方面，本专利技术提供了一种表达载体。
20、进一步，所述表达载体包含本专利技术第二方面所述的核酸分子；
21、优选地，所述表达载体中的核酸分子与启动子可操作性地连接；
22、更优选地，所述启动子包括tac启动子本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种特异性结合鼠疫耶尔森菌V抗原的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包含氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示的重链可变区中的HCDR1-3、氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示的轻链可变区中的LCDR1-3。
2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述HCDR1-3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1-3所示，所述LCDR1-3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4-6所示；
3.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段、权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段的重链可变区或权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段的轻链可变区；
4.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包含权利要求3所述的核酸分子；
5.一种基因改造的宿主细胞，其特征在于，所述基因改造的宿主细胞包含权利要求4所述的表达载体或其基因组中整合有权利要求3所述的核酸分子；
6.一种用于检测鼠疫耶尔森菌的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包含权利要求1或2所述的
7.一种用于检测鼠疫耶尔森菌的检测产品，其特征在于，所述检测产品包含权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段或权利要求6所述的检测试剂；
8.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段。
9.如下任一种方法，其特征在于，所述方法包括：
10.如下任一方面应用，其特征在于，所述应用包括：
...【技术特征摘要】
1.一种特异性结合鼠疫耶尔森菌v抗原的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包含氨基酸序列如seq id no:7所示的重链可变区中的hcdr1-3、氨基酸序列如seq id no:8所示的轻链可变区中的lcdr1-3。
2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述hcdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no:1-3所示，所述lcdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no:4-6所示；
3.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段、权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段的重链可变区或权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段的轻链可变区；
4.一种表达载体，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：张青雯，吴海生，张黎，周剑芳，李翔，吴海莲，张琪，辛有全，
申请(专利权)人：青海省地方病预防控制所，
类型：发明
国别省市：
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