抗安非他明抗体制造技术

本发明专利技术公开了一种抗安非他明抗体

【技术实现步骤摘要】
抗安非他明抗体、检测安非他明的试剂和试剂盒


[0001]本专利技术涉及抗体
，具体而言，涉及一种抗安非他明抗体
、
检测安非他明的试剂和试剂盒
。

技术介绍

[0002]安非他明
(Amphetamine
，
AMPH)
，也称苯基乙丙胺
、
α
‑
甲基苯乙胺
、
安非他命
、
苯丙胺，化学式为
C9H13N
，是一系列对中枢神经系统具有显著兴奋作用的合成药物的原型，是临床上常用的一种中枢兴奋及抗抑郁症药物
。
安非他明属于苯丙胺类兴奋剂毒品，早在
1971
年就被联合国反毒署列入违禁毒品名单，属于国家毒品行列
。
[0003][0004]目前，安非他明的检测方法主要有胶体金免疫层析法，具有快速，操作简单等优点，其是基于抗体和抗原的特异性反应，同时利用胶体金对被检测信号进行放大和显示的一种免疫学检测方法，而获得抗安非他明的抗体是研制胶体金免疫层析试纸的关键
。
因此，本领域对于有效且结合安非他明并对其进行检测的抗体存在着强列需求
。
[0005]有鉴于此，特提出本专利技术
。

技术实现思路

[0006]本申请提供一种亲和力和
/
或活性改善的抗安非他明抗体，以改善安非他明的检测，为安非他明的检测提供重要的原料来源
。
[0007]为了实现上述目的，根据本专利技术的一个方面，提供了一种抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如
SEQ ID NO:1
至
SEQ ID NO:3
所示的
HCDR1、HCDR2、HCDR3
，和氨基酸序列如
SEQ ID NO:4
或
15
所示的
LCDR1、SEQ ID NO:5
所示的
LCDR2、SEQ ID NO:6
所示的
LCDR3。
[0008]为了实现上述目的，根据本专利技术的第二个方面，提供了一种抗安非他明抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包含重链可变区和
/
或轻链可变区，所述重链可变区含有
HFR1
‑
HCDR1
‑ꢀ
HFR2
‑
HCDR2
‑
HFR3
‑
HCDR3
‑
HFR4
的序列结构，所述轻链可变区区含有
LFR1
‑
LCDR1
‑
LFR2
‑ꢀ
LCDR2
‑
LFR3
‑
LCDR3
‑
LFR4
的序列结构，所述
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR 1、LCDR2、 LCDR3
的氨基酸序列为上述的
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3
的氨基酸序列
。
[0009]为了实现上述目的，根据本专利技术的第三个方面，提供了一种抗安非他明抗体，包括重链和
/
或轻链，所述重链包括上述的重链可变区，所述轻链包括上述的轻链可变区
。
[0010]为了实现上述目的，根据本专利技术的第四个方面，提供了一种抗体偶联物，所述抗体偶联物包括上述的抗体或其功能性片段
。
[0011]为了实现上述目的，根据本专利技术的第五个方面，提供了一种检测安非他明的试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒包括上述的抗体或其功能性片段或上述的抗体偶联物
。
[0012]为了实现上述目的，本专利技术还提供了一种载体
、
一种细胞及一种制备上述抗体或
其功能性片段的方法
。
附图说明
[0013]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图
。
[0014]图1为
Anti
‑
AMPH
‑
35B3mut1
至
Anti
‑
AMPH
‑
35B3mut7
的还原性
SDS
‑
PAGE
的结果
。
具体实施方式
[0015]本专利技术提供了一种抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如
SEQ IDNO:1
至
SEQ ID NO:3
所示的
HCDR1、HCDR2、HCDR3
，和氨基酸序列如
SEQ ID NO:4
或
15
所示的
LCDR1、SEQ ID NO:5
所示的
LCDR2、SEQ ID NO:6
所示的
LCDR3。
上述抗体具有改善的亲和力和
/
或活性
。
[0016]在本专利技术中，术语“抗体”在最广义上使用，其可以包括全长单克隆抗体，双特异性或多特异性抗体，以及嵌合抗体，只要它们展示所需的生物学活性
。
[0017]在本专利技术中，术语“互补性决定区”、“CDR”或“CDRs”是指免疫球蛋白的重链和轻链的高度可变区，指包含一种或多种或者甚至全部的对抗体或抗原结合片段与其识别的抗原或表位的结合起作用的主要氨基酸残基的区域
。
在本专利技术具体实施方式中，
CDRs
是指所述抗体的重链和轻链的高度可变区
。
[0018]在本专利技术中，重链互补决定区用
HCDR
表示，其包括
HCDR1、HCDR2
和
HCDR3
；轻链互补决定区用
LCDR
表示，其包括
LCDR1、LCDR2
和
LCDR3。
本领域常用的
CDR
标示方法包括： Kabat
编号方案
、IMGT
编号方案
、Chothia
和
Lesk
编号方案以及
1997
年
Lefranc
等人为免疫球蛋白超家族的所有蛋白质序列引入的新的标准化编号系统
。Kabat
等人是第一个为免疫球蛋白可变区提出标准化编号方案的人
。
在过去的几十年中，序列的积累导致了
KABATMAN
数据库的创建， Kabat
编号方案通常被认为是编号抗体残基广泛采用的标准
。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种抗安非他明抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如
SEQ ID NO:1
至
SEQ ID NO:3
所示的
HCDR1、HCDR2、HCDR3
，和氨基酸序列如
SEQ ID NO:4
或
15
所示的
LCDR1、SEQ ID NO:5
所示的
LCDR2、SEQ ID NO:6
所示的
LCDR3。2.
根据权利要求1所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包括氨基酸序列如
SEQ ID NO:7
至
SEQ ID NO:10
所示的
HFR1、HFR2、HFR3、HFR4
和氨基酸序列如
SEQ ID NO:11
至
SEQ ID NO:14
所示的
LFR1、LFR2、LFR3
和
LFR4
，或与所述各序列具有至少
80
％同一性的氨基酸序列；可选地，所述抗体或其功能性片段以
KD≤10
‑9M
的亲和力结合安非他明；可选地，所述抗体或其功能性片段的
LFR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:16
所示；可选地，所述抗体或其功能性片段的
LFR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:17
所示
。3.
一种抗安非他明抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包含重链可变区和
/
或轻链可变区，所述重链可变区含有
HFR1
‑
HCDR1
‑
HFR2
‑
HCDR2
‑
HFR3
‑
HCDR3
‑
HFR4
的序列结构，所述轻链可变区区含有
LFR1
‑
LCDR1
‑
LFR2
‑
LCDR2
‑
LFR3
‑
LCDR3
‑
LFR4
的序列结构，所述
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3
的氨基酸序列为权利要求1所述的
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3
的氨基酸序列，所述
HFR1、HFR2、HFR3、HFR4、LFR1、LFR2、LFR3、LFR4
的氨基酸序列为权利要求2所述的
HFR1、HFR2、HFR3、HFR4、LFR1、LFR2、LFR3、LFR4
的氨基酸序列；可选地，所述重链可变区氨基酸序列如
SEQ ID NO:20
所示；可选地，所述轻链可变区氨基酸序列如
SEQ ID NO:21
至
28
任一所示
。4.
根据权利要求1至3任一所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包含恒定区；可选地，所述恒定区包括重链恒定区和
/
或轻链恒定区；可选地，所述重链恒定区选自
IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgM、IgE
或
IgD
的重链恒定区；所述轻链恒定区选自
κ
型或
λ
型轻链恒定区；可选地，所述恒定区的种属来源为牛
、
马
、
猪
、
绵羊
、
山羊
、
大鼠
、
小鼠
、
狗
、
猫
、
兔
、
驴
、
鹿
、
貂
、
鸡
、
鸭
、
鹅或人；可选地，所述恒定区的种属来源为小鼠；可选地，所述重链恒定区序列如
SEQ ID NO:18
所示或与其具有至少
...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟媛，钟冬梅，游辉，曹慧方，覃文新，
申请(专利权)人：东莞市朋志生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：