抗苯二氮卓抗体制造技术

本发明专利技术公开了一种抗苯二氮卓抗体

【技术实现步骤摘要】
抗苯二氮卓抗体、检测苯二氮卓的试剂和试剂盒


[0001]本专利技术涉及抗体
，具体而言，涉及一种抗苯二氮卓抗体
、
检测苯二氮卓的试剂和试剂盒
。

技术介绍

[0002]苯二氮卓
(Benzodiazepines
，
BZO)
类药物是临床广泛使用的一类药物，多为1，4‑
苯并二氮的衍生物，主要包括地西泮
(
安定
)、
氟西泮
(
氟安定
)、
氯氮
、
奥沙西泮和三唑仑等，是一类作用于中枢神经系统的镇静剂
。
苯二氮卓类药物多为1，4‑
苯并二氮的衍生物，其基本结构是由两个苯环和一个含有7个原子的杂环组成
。
具有镇静催眠
、
抗焦虑
、
抗惊厥
、
肌肉松弛等作用，且毒性较小
。
然而，大剂量使用苯二氮卓类药物会致共济失调，过量急性中毒可致昏迷和呼吸抑制，久服会产生身体和精神依赖性，产生依赖性的风险随剂量的增加及治疗期的延长而增加
。
一旦出现身体依赖性，立即停药会出现戒断症状，包括头痛
、
肌肉痛
、
极度焦虑紧张
、
烦躁
、
兴奋和谵妄
。
严重时会出现失眠
、
意识障碍
、
失去理智
、
听觉过敏
、r/>麻木
、
四肢麻刺感，出现幻觉和癫痫发作
。
[0003]鉴于其严重的危害性，苯二氮卓类药物已被国家列入精神药品进行管理
。
苯二氮卓类药物的代谢物消除缓慢，清除时间很长，数月或数年使用此药物的个体，即使在停止用药后的几周甚至几个月里都能在尿液中持续检测到苯二氮卓
。
[0004]目前，苯二氮卓的检测方法主要有胶体金免疫层析法，具有快速，操作简单等优点，其是基于抗体和抗原的特异性反应，同时利用胶体金对被检测信号进行放大和显示的一种免疫学检测方法，而获得抗苯二氮卓的抗体是研制胶体金免疫层析试纸的关键
。
因此，本领域对于有效且结合苯二氮卓并对其进行检测的抗体存在着强列需求
。
[0005]有鉴于此，特提出本专利技术
。

技术实现思路

[0006]本申请提供一种亲和力和
/
或活性改善的抗苯二氮卓抗体，以改善苯二氮卓的检测，为苯二氮卓的检测提供重要的原料来源
。
[0007]为了实现上述目的，根据本专利技术的一个方面，提供了一种抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如
SEQ ID NO:1
所示的
HCDR1、SEQ ID NO:2
所示的
HCDR2、SEQ ID NO:3
或
15
所示的
HCDR3
，和氨基酸序列如
SEQ ID NO:4
或
16
所示的
LCDR1、SEQ ID NO:5
所示的
LCDR2、SEQ ID NO:6
所示的
LCDR3。
[0008]为了实现上述目的，根据本专利技术的第二个方面，提供了一种抗苯二氮卓抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包含重链可变区和
/
或轻链可变区，所述重链可变区含有
HFR1
‑
HCDR1
‑
HFR2
‑
HCDR2
‑
HFR3
‑
HCDR3
‑
HFR4
的序列结构，所述轻链可变区区含有
LFR1
‑
LCDR1
‑
LFR2
‑
LCDR2
‑
LFR3
‑
LCDR3
‑
LFR4
的序列结构，所述
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR 1、LCDR2、LCDR3
的氨基酸序列为上述的
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3
的氨基酸序列
。
[0009]为了实现上述目的，根据本专利技术的第三个方面，提供了一种抗苯二氮卓抗体，包括重链和
/
或轻链，所述重链包括上述的重链可变区，所述轻链包括上述的轻链可变区
。
[0010]为了实现上述目的，根据本专利技术的第四个方面，提供了一种抗体偶联物，所述抗体偶联物包括上述的抗体或其功能性片段
。
[0011]为了实现上述目的，根据本专利技术的第五个方面，提供了一种检测苯二氮卓的试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒包括上述的抗体或其功能性片段或上述的抗体偶联物
。
[0012]为了实现上述目的，本专利技术还提供了一种载体
、
一种细胞及一种制备上述抗体或其功能性片段的方法
。
附图说明
[0013]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图
。
[0014]图1为
Anti
‑
BZO
‑
9C238mut1
至
Anti
‑
BZO
‑
9C238mut5
的还原性
SDS
‑
PAGE
的结果
。
具体实施方式
[0015]本专利技术提供了一种抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如
SEQ ID NO:1
所示的
HCDR1、SEQ ID NO:2
所示的
HCDR2、SEQ ID NO:3
或
15
所示的
HCDR3
，和氨基酸序列如
SEQ ID NO:4
或
16
所示的
LCDR1、SEQ ID NO:5
所示的
LCDR2、SEQ ID NO:6
所示的
LCDR3。
上述抗体具有改善的亲和力和
/
或活性
。
[0016]在本专利技术中，术语“抗体”在最广义上使用，其可以包括全长单克隆抗体，双特异性或多特异性抗体，以及嵌合抗体，只要它们展示所需的生物学活性
。
[0017]在本专利技术中，术语“互补性决定区”、“CDR”或“CDRs”是指免疫球蛋白的重链和轻链的高度可变区，指包含一种或多种或者甚至本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种抗苯二氮卓抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如
SEQ ID NO:1
所示的
HCDR1、SEQ ID NO:2
所示的
HCDR2、SEQ ID NO:3
或
15
所示的
HCDR3
，和氨基酸序列如
SEQ ID NO:4
或
16
所示的
LCDR1、SEQ ID NO:5
所示的
LCDR2、SEQ ID NO:6
所示的
LCDR3。2.
根据权利要求1所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包括氨基酸序列如
SEQ ID NO:7
至
SEQ ID NO:10
所示的
HFR1、HFR2、HFR3、HFR4
和氨基酸序列如
SEQ ID NO:11
至
SEQ ID NO:14
所示的
LFR1、LFR2、LFR3
和
LFR4
，或与所述各序列具有至少
80
％同一性的氨基酸序列；可选地，所述抗体或其功能性片段以
KD≤10
‑9M
的亲和力结合苯二氮卓；可选地，所述抗体或其功能性片段的
HFR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:17
所示；可选地，所述抗体或其功能性片段的
HFR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:18
所示
。3.
一种抗苯二氮卓抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包含重链可变区和
/
或轻链可变区，所述重链可变区含有
HFR1
‑
HCDR1
‑
HFR2
‑
HCDR2
‑
HFR3
‑
HCDR3
‑
HFR4
的序列结构，所述轻链可变区区含有
LFR1
‑
LCDR1
‑
LFR2
‑
LCDR2
‑
LFR3
‑
LCDR3
‑
LFR4
的序列结构，所述
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3
的氨基酸序列为权利要求1所述的
HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3
的氨基酸序列，所述
HFR1、HFR2、HFR3、HFR4、LFR1、LFR2、LFR3、LFR4
的氨基酸序列为权利要求2所述的
HFR1、HFR2、HFR3、HFR4、LFR1、LFR2、LFR3、LFR4
的氨基酸序列；可选地，所述重链可变区氨基酸序列如
SEQ ID NO:21
至
28
任一所示；可选地，所述轻链可变区氨基酸序列如
SEQ ID NO:29
至
30
任一所示
。4.
根据权利要求1至3任一所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包含恒定区；可选地，所述恒定区包括重链恒定区和
/
或轻链恒定区；可选地，所述重链恒定区选自
IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgM、IgE
或
IgD
的重链恒定区；所述轻链恒定区选自
κ
型或
λ
型轻链恒定区；可选地，所述恒定区的种属来源为牛
、
马
、
猪
、
绵羊
、
山羊
、
大鼠
、
小鼠
、
狗
、
猫
、
兔
、
驴
、
鹿
、
貂
、
鸡
、
鸭
、
鹅或人；可选地，所述恒定区的种属来源为小鼠；可选地，所述重链恒定区序列如
SEQ ID NO...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟媛，钟冬梅，覃文新，游辉，曹慧方，
申请(专利权)人：东莞市朋志生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：