本说明书实施例提供了一种结合依托咪酯的抗体或抗原结合片段，所述抗体或抗原结合片段包括：重链可变区，其包括氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的CDRH1、氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的CDRH2和氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的CDRH3；轻链可变区，其包括氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示的CDRL1、氨基酸序列为LTS的CDRL2和氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示的CDRL3。NO:7所示的CDRL3。
【技术实现步骤摘要】
一种结合依托咪酯的抗体及其应用
[0001]本说明书涉及生物医药
，特别涉及一种结合依托咪酯的抗体及其应用。
技术介绍
[0002]依托咪酯(etomidate)是一种催眠性静脉全麻药，属于咪唑类衍生物，安全性好，是麻醉诱导常用的药物之一。依托咪酯应用于门诊、手术室外麻醉具有较好的安全性和可控性，应用前景广泛。目前，对依托咪酯的检测主要依靠高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(G C)、薄层色谱法(TLC)、质谱法(MS)等，但仪器昂贵，检测费时，并且需要专业技术人员进行操作。
[0003]因此，需要提供一种快速、灵敏、准确的检测依托咪酯的技术。
技术实现思路
[0004]根据本说明书的第一方面，提供一种结合依托咪酯的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段包括：重链可变区，其包括氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的C DRH1、氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的CDRH2和氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的CDRH3；轻链可变区，其包括氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示的CDRL1、氨基酸序列为LTS的CDRL2和氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示的CDRL3。
[0005]在一些实施例中，所述抗体为鼠源抗体、兔源抗体或人源化抗体。
[0006]在一些实施例中，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。
[0007]在一些实施例中，所述抗体为单克隆抗体、双特异性抗体或多特异性抗体。
[0008]在一些实施例中，所述抗原结合片段选自下组：Fab、Fab'、F(ab)2、F(ab')2、Fv、scFv、dAb。
[0009]根据本说明书的第二方面，提供一种核酸分子，其包含编码如前文所述的抗体或抗原结合片段的核苷酸序列。
[0010]在一些实施例中，所述核酸分子包括：编码重链可变区的核苷酸序列，其包括如SEQ ID NO:9所示的CDRH1的编码序列、如SEQ ID NO:10所示的CDRH2的编码序列和如SEQ ID NO:11所示的CDRH3的编码序列；编码轻链可变区的核苷酸序列，其包括如SEQ ID NO:13所示的CDRL1的编码序列、序列为CTCACATCC的CDRL2的编码序列和如S EQ ID NO:14所示的CDRL3的编码序列。
[0011]在一些实施例中，所述编码重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示；所述编码轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO:12所示。
[0012]根据本说明书的第三方面，提供一种重组载体，其包括如前文所述的核酸分子。
[0013]根据本说明书的第四方面，提供一种宿主细胞，其包括如前文所述的核酸分子或者如权利要求8所述的重组载体。
[0014]根据本说明书的第五方面，提供一种制备结合依托咪酯的抗体或抗原结合片段的
方法，所述方法包括：培养如前文所述的宿主细胞；从所述宿主细胞的细胞培养物中分离所述抗体或抗原结合片段。
[0015]根据本说明书的第六方面，提供一种检测样品中依托咪酯的方法，所述方法包括：使所述样品和能够与依托咪酯结合形成抗原抗体复合物的抗体或抗原结合片段接触，所述抗体或抗原结合片段是如前文所述的抗体或抗原结合片段；检测所述抗原抗体复合物，以定性检测或定量检测所述样品中的依托咪酯。
[0016]在一些实施例中，所述抗体或抗原结合片段是带有可检测标记的，通过可检测标记产生的信号来检测所述抗原抗体复合物；或者所述抗体或抗原结合片段是未标记的，使所述抗原抗体复合物中作为捕获抗体的所述抗体或抗原结合片段与带有可检测标记的检测抗体结合，通过可检测标记产生的信号来检测所述抗原抗体复合物。
[0017]在一些实施例中，所述定量检测包括：对比获自所述样品的第一检测信号和获自对照品或校准品的第二检测信号，其中，所述第一检测信号由所述样品与所述抗体或抗原结合片段接触形成的抗原抗体复合物产生，所述第二检测信号由所述对照品或校准品与所述抗体或抗原结合片段接触形成的抗原抗体复合物产生，所述对照品或校准品中含有预定浓度的依托咪酯；基于对比结果和所述预定浓度，确定所述样品的依托咪酯浓度。
[0018]在一些实施例中，所述样品包括外周血、尿液、唾液和毛发中的一种或多种。
[0019]根据本说明书的第七方面，提供一种检测依托咪酯的试剂盒，其包含如前文所述的抗体或抗原结合片段。
[0020]在一些实施例中，所述试剂盒选自下组：胶体金检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、酶联免疫检测试剂盒、化学发光试剂盒、免疫比浊检测试剂盒。
[0021]根据本说明书的第八方面，提供如前文所述的抗体或抗原结合片段、核酸分子、重组载体或者宿主细胞在检测依托咪酯或制备检测依托咪酯的试剂盒中的应用。
具体实施方式
[0022]应当理解，尽管术语“第一”、“第二”、“第三”等可以在本文中用于描述各种元素，但这些元素不应受这些术语的限制。这些术语仅用于将一个元素与另一个元素区分开来。例如，第一检测信号可以被称为第二检测信号，并且类似地，在不脱离本说明书的示例性实施例的范围的情况下，第二检测信号可以被称为第一检测信号。
[0023]如本说明书和权利要求书中所示，除非上下文明确提示例外情形，“一”、“一个”、“一种”和/或“该”等词并非特指单数，也可包括复数。一般说来，术语“包括”与“包含”仅提示包括已明确标识的步骤和元素，而这些步骤和元素不构成一个排它性的罗列，方法或者设备也可能包含其它的步骤或元素。
[0024]除另有定义外，本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同的含义。
[0025]依托咪酯在全麻诱导时血液动力学稳定性好，术后恢复快，目前广泛运用于老年人以及并发心血管疾病和危重症患者的麻醉诱导。本说明书提出一种结合依托咪酯的抗体及其应用。在一些实施例中，依托咪酯的药物治疗效果需要受到监测，本说明书提供的一种结合依托咪酯的抗体及其应用可运用于依托咪酯的治疗监测，例如用于检测患者生物样本中依托咪酯的浓度，可辅助医疗人员调整/优化治疗方案。在一些实施例中，依托咪酯存在
药物滥用风险，本说明书提供的一种结合依托咪酯的抗体及其应用可运用于依托咪酯的药品管理，例如用于检测受试者生物样本中是否存在依托咪酯。具体地，本说明书一些实施例使用化学合成的依托咪酯半抗原免疫Balb/c小鼠，选取免疫成功的小鼠脾脏淋巴细胞，通过细胞融合技术将淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合，经过二轮亚克隆筛选后获得稳定分泌抗依托咪酯的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，通过培养和再免疫获得大量小鼠腹水，再通过分离及纯化获得高特异性的抗依托咪酯的单克隆抗体。本说明书提供的抗体或抗原结合片段可以为基于免疫学原理的检测依托咪酯胶体金免疫层析技术等方法提供稳定可靠的原料来源，降低产品成本，同时提高依托咪酯快速诊断商品如金标试纸条、本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种结合依托咪酯的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段包括：重链可变区，其包括氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的CDRH1、氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的CDRH2和氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的CDRH3；轻链可变区，其包括氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示的CDRL1、氨基酸序列为LTS的CDRL2和氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示的CDRL3。2.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。3.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体为单克隆抗体、双特异性抗体或多特异性抗体。4.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗原结合片段选自下组：Fab、Fab'、F(ab)2、F(ab')2、Fv、scFv、dAb。5.一种核酸分子，其包含编码如权利要求1
‑
3中任一项所述的抗体或抗原结合片段的核苷酸序列。6.如权利要求5所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包括：编码重链可变区的核苷酸序列，其包括如SEQ ID NO:9所示的CDRH1的编码序列、如SEQ ID NO:10所示的CDRH2的编码序列和如SEQ ID NO:11所示的CDRH3的编码序列；编码轻链可变区的核苷酸序列，其包括如SEQ ID NO:13所示的CDRL1的编码序列、序列为C...
【专利技术属性】
技术研发人员：魏文涛，上官科科，成含锋，魏昕洋，
申请(专利权)人：杭州旭科生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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