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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生化分离纯化介质制备,具体是涉及一种琼脂糖微球及其制备方法,尤其是一种不含有机溶剂的高流速琼脂糖微球及其制备方法。
技术介绍
1、生物技术的飞速发展对生物分离纯化技术提出了更高的要求,其中层析分离技术具有选择性高、分离效率高、使用条件温和、适用性广、易于自动化和程序化操作等特点,被应用于生物分离工程等各个领域。以琼脂糖微球为载体的层析分离介质具备多孔结构、亲水性好、非特异性吸附低、生物相容性优好、易于衍生等优势,是目前最广泛应用的一类层析介质。然而,相比于无机物微球和有机聚合物微球,琼脂糖微球的机械强度差,能够耐受的流速低,无法满足工业化层析高流速高负载量的要求。
2、琼脂糖凝胶微球可通过化学交联反应,在微球中引入链段长度不等的交联分子,显著提升其机械强度及化学稳定性,常用的交联剂包括双环氧或多环氧化合物、二乙烯基砜、环氧氯丙烷、2,3-二溴丙醇等。更进一步的,琼脂糖微球依次用长链交联剂和短链交联剂完成多糖纤维束间和纤维束内的交联,所得交联琼脂糖微球的流速得到了显著提升(典型产品如sepharose fast flow系列)。然而,现有的两步交联法通常采用有机溶剂如二甲基亚砜、丙酮等,后处理复杂且对环境影响较大;此外,两步交联反应中途需对微球进行清洗,操作步骤繁琐。
3、cn103937013a公开了一种琼脂凝胶微球及其制备方法属于生化分离纯化介质制备
琼脂凝胶微球以琼脂裸球为原料先后经过两次交联制得,其中长交联剂ⅰ为1,4-丁二醇二缩水甘油醚;短交联剂ⅱ为环氧氯丙烷。该方法虽然在一
4、cn101218023a公开了一种制备分离基质的方法,述方法包括提供可胶凝的天然多糖的水溶液;降低所述多糖溶液的温度至其胶凝点以下;通过向所得多糖中添加至少一种盐进行盐处理;并使经过所述盐处理的多糖交联。所述多糖可制备为例如微粒、膜或块料。该方法采用90℃以上高温盐处理,且只利用短链交联剂进行单次交联;微球的流速及机械强度提升有限。
5、有鉴于此,特提出本专利技术。
技术实现思路
1、本专利技术的目的之一在于提供一种琼脂糖微球,所述琼脂糖微球的制备原料包括以下组分:琼脂糖裸球、水溶性无机盐、长链交联剂、短链交联剂、碱、还原剂、水。本专利技术以琼脂糖微球裸球为制备原料,以水的盐溶液为分散介质,同时采用长链交联剂和短链交联剂进行交联,使制备得到的琼脂糖微球的流速和机械强度得到了显著提升;且制备原料不含有机溶剂,对环境友好。
2、本专利技术的目的之二在于提供一种琼脂糖微球的制备方法,所述制备方法包括以下步骤:将琼脂糖裸球、水溶性无机盐和水混合,得到含琼脂糖裸球的无机盐水溶液;向所述含琼脂糖裸球的无机盐水溶液中添加长链交联剂,进行搅拌,再添加碱液,进行长链交联反应;向上述反应体系中添加短链交联剂,并添加碱液,进行短链交联反应,得到琼脂糖微球成品。本专利技术以水的盐溶液为分散介质,同时采用长链交联剂和短链交联剂进行交联,且短链交联反应需至少重复1次,从而进一步提升了微球的流速及机械强度。
3、为了实现本专利技术的上述目的,特采用以下技术方案:
4、第一方面,本专利技术提供一种琼脂糖微球,所述琼脂糖微球的制备原料包括以下组分:琼脂糖裸球、水溶性无机盐、长链交联剂、短链交联剂、碱、还原剂、水。
5、本专利技术以琼脂糖微球裸球为制备原料,以水的盐溶液为分散介质,同时采用长链交联剂和短链交联剂进行交联,使制备得到的琼脂糖微球的流速和机械强度得到了显著提升;且制备原料不含有机溶剂,对环境友好。
6、优选地,所述琼脂糖微球的制备原料按重量份数计包括以下组分:
7、琼脂糖裸球80~120份、水溶性无机盐10~60份、长链交联剂10~60份、短链交联剂10~60份、碱10~50份、还原剂0.5~5份、水80~120份。
8、在所述琼脂糖微球的制备原料中,琼脂糖裸球的含量为80~120份,例如可以是80份、82份、84份、86份、88份、90份、92份、94份、96份、98份、100份、102份、105份、110份、120份等。
9、在所述琼脂糖微球的制备原料中,水溶性无机盐的含量为10~60份,例如可以是10份、15份、20份、25份、30份、35份、40份、45份、50份、55份、60份等。
10、在所述琼脂糖微球的制备原料中,长链交联剂的含量为10~60份,例如可以是10份、15份、20份、25份、30份、35份、40份、45份、50份、55份、60份等。
11、在所述琼脂糖微球的制备原料中,短链交联剂的含量为10~60份,例如可以是10份、15份、20份、25份、30份、35份、40份、45份、50份、55份、60份等。
12、在所述琼脂糖微球的制备原料中,碱的含量为10~50份,例如可以是10份、15份、20份、25份、30份、35份、40份、45份、50份等。
13、在所述琼脂糖微球的制备原料中,还原剂的含量为0.5~5份,例如可以是0.5份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份、5份等。
14、在所述琼脂糖微球的制备原料中,水的含量为80~120份,例如可以是80份、82份、84份、86份、88份、90份、92份、94份、96份、98份、100份、102份、105份、110份、120份等。
15、优选地,所述琼脂糖裸球中琼脂糖的含量为2~10%,例如可以是2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%等。
16、优选地,所述琼脂糖裸球中琼脂糖的平均粒径为30~300μm,例如可以是30μm、40μm、60μm、80μm、100μm、120μm、140μm、160μm、180μm、200μm、220μm、240μm、260μm、280μm、300μm等。
17、在本专利技术中,所述琼脂糖裸球可按照反相悬浮法、喷雾法、膜乳化法等标准方法制得。
18、优选地,所述水溶性无机盐选自碱金属硫酸盐、碱土金属硫酸盐或硫酸铵盐中的任意一种或至少两种的组合。
19、优选地,所述碱金属硫酸盐选自硫酸锂、硫酸钠或硫酸钾中的任意一种或至少两种的组合,优选为硫酸钠。
20、优选地,所述碱土金属硫酸盐选自硫酸镁。
21、优选地,所述长链交联剂选自缩水甘油醚类化合物。
22、优选地,所述缩水甘油醚类化合物选自1,4-丁二醇二缩水甘油醚、季戊四醇三缩水甘油醚或季戊四醇四缩水甘油醚中的任意一种或至少两种的组合。
23、优选地,所述短链交联剂选自卤代环氧化合物。
24、优选地,所述短链交联剂选自环氧氯丙烷。
25、优选地,所述环氧氯丙烷为环氧氯丙烷。
26、优选地,所述碱选自碱金属的氢氧化本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种琼脂糖微球,其特征在于,所述琼脂糖微球的制备原料包括以下组分:琼脂糖裸球、水溶性无机盐、长链交联剂、短链交联剂、碱、还原剂、水。
2.根据权利要求1所述的琼脂糖微球,其特征在于,所述琼脂糖微球的制备原料按重量份数计包括以下组分:
3.根据权利要求1或2所述的琼脂糖微球,其特征在于,所述琼脂糖裸球中琼脂糖的含量为2~10%;所述琼脂糖裸球中琼脂糖的平均粒径为30~300μm。
4.根据权利要求1或2所述的琼脂糖微球,其特征在于,所述水溶性无机盐选自碱金属硫酸盐、碱土金属硫酸盐或硫酸铵盐中的任意一种或至少两种的组合;
5.根据权利要求1或2所述的琼脂糖微球,其特征在于,所述长链交联剂选自缩水甘油醚类化合物,进一步优选为1,4-丁二醇二缩水甘油醚、季戊四醇三缩水甘油醚或季戊四醇四缩水甘油醚中的任意一种或至少两种的组合;
6.根据权利要求1或2所述的琼脂糖微球,其特征在于,所述碱选自碱金属的氢氧化物;
7.一种根据权利要求1~6中任一项所述琼脂糖微球的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
< ...【技术特征摘要】
1.一种琼脂糖微球,其特征在于,所述琼脂糖微球的制备原料包括以下组分:琼脂糖裸球、水溶性无机盐、长链交联剂、短链交联剂、碱、还原剂、水。
2.根据权利要求1所述的琼脂糖微球,其特征在于,所述琼脂糖微球的制备原料按重量份数计包括以下组分:
3.根据权利要求1或2所述的琼脂糖微球,其特征在于,所述琼脂糖裸球中琼脂糖的含量为2~10%;所述琼脂糖裸球中琼脂糖的平均粒径为30~300μm。
4.根据权利要求1或2所述的琼脂糖微球,其特征在于,所述水溶性无机盐选自碱金属硫酸盐、碱土金属硫酸盐或硫酸铵盐中的任意一种或至少两种的组合;
5.根据权利要求1或2所述的琼脂糖微球,其特征在于,所述长链交联剂选自缩水甘油醚类化合物,进一步优选为1,4-丁二醇二缩水...
【专利技术属性】
技术研发人员:方进伟,
申请(专利权)人:杭州旭科生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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