一株降解玉米赤霉烯酮的解淀粉芽孢杆菌制造技术

本发明专利技术公开了解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)CGGB 283

【技术实现步骤摘要】
一株降解玉米赤霉烯酮的解淀粉芽孢杆菌


[0001]本专利技术涉及了一种降解玉米赤霉烯酮的解淀粉芽孢杆菌及应用，属于生物


技术介绍

[0002]玉米赤霉烯酮(Zenralenone，ZEN)，又称F
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2毒素，是一种非甾体雌激素真菌毒素，主要是由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)、粉红镰刀菌(Fusarium rpmoseum)等多种镰刀菌属产生。ZEN广泛存在于污染的小麦、玉米等农作物中。因其结构与内源性雌激素的结构相似，具有强烈的雌激素活性，被人和动物摄入后，会与雌激素受体结合影响摄入者的生殖功能，还会损害肝脏和肾脏，降低免疫功能，从而导致细胞毒性和免疫毒性。随着全球气候变化，霉菌毒素污染已成为一个全球性问题。因此，迫切需要寻找切实可行的方法对霉变产品进行脱毒处理，以避免由此带来的经济损失和公共健康问题。
[0003]目前，国内外主要采取物理、化学和生物脱毒的方法降低ZEN毒性，物理脱毒法主要包括人工剔除、水洗、脱壳、高温和吸附剂吸附等。化学法包括臭氧解毒、过氧化氢处理、碱处理和碳酸钠浸泡处理，但由于化学试剂对食品安全的影响，易产生二次污染，使得化学法受到限制。生物脱毒主要是通过微生物降解和酶法降解两种途径达到脱毒的目的。微生物降解法主要是利用微生物对ZEN进行转化成低毒物质或对ZEN进行吸附从而降低对动物的毒性，某些益生菌细胞壁中的特殊结构使它们能够吸附ZEN毒素，降低ZEN对动物的毒性。酶法降解法主要是通过酶水解或氧化作用，将毒素分子的毒性基团破坏，产生低毒或者无毒产物。相比之下，生物脱毒法脱毒效率高，作用条件温和且对环境基本无污染，因此生物脱毒逐渐成为真菌毒素脱毒的研究重点。

技术实现思路

[0004]本专利技术的第一个目的在于提供一株能降解玉米赤霉烯酮的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)CGGB 283
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1：
[0005]本专利技术的第二个目的在于提供目的一所述解淀粉芽孢杆菌降解ZEN的最适pH和温度条件；为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术所利用的解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1，已于2021年11月17日保藏于广东省广州市越秀区先烈中路100号大院59号楼的广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为：GDMCC No.62069。该菌株已经获批中国专利技术专利，专利号2022102026458，专利技术名称为：一株高产抗菌活性物质macrolactinA的解淀粉芽孢杆菌及其应用。
[0007]解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1在降解ZEN时的最适pH和温度条件的确定。
[0008]本专利技术的有益效果在于：本专利技术提供的解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1能够高效降解ZEN，降解率可达到约84％，解毒活性高，可用于饲料等产品中ZEN的降解，极大地降低了ZEN对动物繁殖性能等的危害，改善动物生产性能，且不会影响饲料的感官特征，该菌具有广阔的应用前景。
附图说明
[0009]图1为解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1降解ZEN的液相色谱图(a为ZEN的空白对照组，b为ZEN加解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1处理组)；
[0010]图2为不同pH条件下解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1对ZEN的降解情况；
[0011]图3为不同温度条件下解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1对ZEN的降解情况。
具体实施方式
[0012]下面结合说明书附图及具体实施例对本专利技术作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
[0013]实施例1
[0014]本申请所提供的玉米赤霉烯酮降解菌株为本实验室前期从黑山羊瘤胃中分离筛选得到，其于2021年11月17日保藏于广东省广州市越秀区先烈中路100号大院59号楼的广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为：GDMCC No.62069。
[0015]将含有浓度为30％甘油的保藏号GDMCC No.62069解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1菌株在LB固体培养基上活化，菌液与甘油的体积比为1∶1，将得到的解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1挑至LB液体培养基中，37℃、180rpm培养24h得解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1活化种子液。
[0016]将解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1种子液以1％接种量接种于200μL的LB培养基中，加入终浓度为10μg/mL的ZEN。37℃，180rpm，培养24h。培养结束后，用乙酸乙酯萃取，再用氮吹仪吹干，最后用甲醇重溶残留的ZEN，采取高效液相色谱分析，统计产物峰面积，计算相对活性。HPLC检测的色谱柱型号为ZORBAX SB
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C18(4.6mm*250mm，5μm)Agilent公司，流动相：乙腈∶水(60∶40)；流速：0.6mL/min；柱温：27℃；在紫外波长为254nm的检测条件下，对照组的检测结果如图1(a)所示，ZEN的保留时间为12.213min。实施例2pH对解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1降解ZEN的影响
[0017]为探究在不同pH条件下解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1降解ZEN的活性，采用稀HCL来调节培养基的pH，使反应的pH分别为4.0，5.0，6.0；采用NaOH来调节pH，使反应的pH分别为7.0，8.0，9.0；以1％的接种量将解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1分别接入到不同pH的培养基中，加入终浓度为10μg/mL的ZEN，于37℃，180rpm，培养24h。培养结束后，用乙酸乙酯萃取，再用氮吹仪吹干，最后用甲醇重溶残留的ZEN，采取高效液相色谱分析，统计产物峰面积，计算相对活性。结果如图2所示，解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1降解ZEN的反应更适合在弱酸性或中性条件下，最适作用pH为6.0。
[0018]实施例3温度对解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1降解ZEN的影响
[0019]为探究在不同温度条件下解淀粉芽孢杆菌CGGB 283
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1降解ZEN的活性，在接种量1％，ZEN的浓度为10μg/mL条件下，180rpm，反应温度分别设置为20℃，25℃，32℃，37℃，42℃，培养24h。用乙酸乙酯萃取，再用氮吹仪吹干，甲醇重溶后，采取高效液相色谱分析，统计产物峰面积，计算相对活性。结果如图3所示，在20～42℃条件下，解淀粉芽孢杆菌CGGB 283...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)CGGB 283
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1在降解玉米赤霉烯酮的应用，其特征在于该菌株CGGB 283
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1可以有效的对玉米赤霉烯酮进行降解，用于降解玉米赤霉烯酮。2.一种如权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌CGGB 283

【专利技术属性】
技术研发人员：汪玲玲，金美铃，邓诣群，吴玉婷，邓子锋，
申请(专利权)人：岭南现代农业科学与技术广东省实验室，
类型：发明
国别省市：