抗AXL拮抗抗体制造技术

本发明专利技术涉及特异性结合Axl蛋白上的新表位的抗体。本发明专利技术还公开了制备和使用抗Axl抗体的方法。的方法。的方法。

【技术实现步骤摘要】
抗AXL拮抗抗体
[0001]本申请是申请号为201780038590.9，申请日为2017年6月21日，专利技术名称为“抗AXL拮抗抗体”的专利申请的分案申请。


[0002]本专利技术涉及特异性结合Axl蛋白的抗体。还涉及抗Axl抗体的制备方法和用途。

技术介绍

[0003]Axl是共享维生素K依赖性配体Gas6(生长停滞特异性蛋白6)的TAM(Tyro3
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Axl
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Mer)受体酪氨酸激酶(RTK)的成员。TAM家族RTK调节各种各样的细胞反应，包括细胞存活、增殖、自噬、迁移、血管生成、血小板聚集和自然杀伤细胞分化。Axl在许多胚胎组织中表达并且被认为涉及间叶细胞和神经的发育，在成体组织中的表达主要限于平滑肌细胞(MGI Gene Expression Database；www.informatics.jax.org)。Axl活化与几种信号转导途径关联，包括Akt、MAP激酶、NF
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κB、STAT等。自从最初被鉴定为来自于慢性骨髓性白血病患者的转化基因以来，Axl一直与各种高等级癌症相关并且与不良预后有关联。
[0004]已经在各种各样的实体瘤和髓性白血病中检测出Axl受体过表达(Linger等，Adv Cancer Res.100:35,2008；Linger等，Expert Opin Ther Targets.14:1073,2010)。
[0005]Axl表达与恶性进展相关联并且是在包括胰腺(Song等，Cancer.117:734,2011)、前列腺(Paccez等，Oncogene.32:698,2013)、肺(Ishikawa等，Ann Surg Oncol.2012；Zhang等，Nat Genet.44:852,2012)、乳腺(Gjerdrum,Proc natl Acad Sci USA 107:1124,2010)、结肠癌(Yuen等，PLoS One,8:e54211,2013)和急性髓性白血病(AML)(Ben
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Batalla等，Blood 122:2443,2013)在内的几种恶性肿瘤中对患者较差存活的独立预测因子。
[0006]Axl信号转导受肿瘤相关巨噬细胞(Loges等，Blood.115:2264,2010)或自分泌机制(Gjerdrum，Proc natl Acad Sci USA 107:1124,2010)分泌的蛋白配体(Gas6)激活，所述蛋白配体驱动受体二聚化、自体磷酸化和下游信号传导，例如经由PI3激酶(PI3K)
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AKT，特别是AKT和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径(Korshunov，Clinical Science.122:361,2012)。还报道称会发生其它酪氨酸激酶受体，例如表皮生长因子受体(EGFR)的异源二聚化(Linger等，Expert Opin Ther Targets.14:1073,2010；Meyer等，Science Signalling 6:ra66,2013)。
[0007]肿瘤细胞中Axl的异常活化与对体外和体内靶向治疗剂的获得性耐药性广泛相关(Zhang等，Nat Genet.44:852,2012；Byers等，Clin Cancer Res.19:279,2013)。在几种癌症实验模型，包括三阴性乳腺癌、激素抗性前列腺癌和肺腺癌中，Axl靶向剂通过逆转EMT/CSC特征而阻断肿瘤形成、转移和逆转耐药性(例如，对埃罗替尼(erlotinib))(Holland等，Cancer Res 70:1544,2010；Gjerdrum，Proc natl Acad Sci USA 107:1124,2010；Zhang等，Nat Genet.44:852,2012；Paccez等，Oncogene.32:698,2013)。
[0008]涉及Axl和抗Axl抗体的其它申请包括EP2267454A2[Diagnosis and prevention of cancer cell invasion measuring...Axl
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Max Planck]；WO2009063965[anti Axl
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Chugai Pharmaceutical]；WO2011159980A1[anti
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Axl
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Genentech]；WO2011014457A1[combination treatments Axl and VEGF antagonists
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Genentech],Oncogene(2009)28,3442
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3455,Oncogene(2010)29,5254
–
5264[anti
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Axl
‑
Genentech]；WO2012
‑
175691A1[Anti Axl20G7
‑
D9
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INSERM]；WO2012
‑
175692A1[Anti Axl 3E3E8
‑
INSERM],Oncogene 33,5405
‑
5414(2014年11月20日,doi:10.1038/onc.2013.487)；WO2009/062690A1[anti Axl
‑
U3 Pharma]和WO2010/130751A1[humanised anti Axl
‑
U3 Pharma]。
[0009]上述文献中描述的抗Axl抗体具有不同的性质。例如，Oncogene(2009)28，3442
‑
3455描述了来自Genentech的三种抗Axl抗体，被命名为3G9、8B5和12A11；作者报道，虽然所有三种抗体均诱导Axl表达的下调，但只有3G9和8B5阻断配体与Axl受体的结合(参见同上，第3453页，右栏，上部)。许多相同作者的后续论文(Oncogene(2010)29，5254
‑
5264)报道，阻断配体结合的抗体(YW327.6S2)能够减弱MDA
‑
MB
‑
231异种移植肿瘤生长并增强抗vEGF治疗的作用，而12A11抗体则不是(见同上，图4)。
[0010]在另一个实例中，据报道Oncogene 33，5405
‑
5414(2014年11月20日，doi:10.1038/onc.2013.487)中描述的
‘
D9
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和
‘
E8
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抗体抑制AXL及其下游靶AKT的磷酸化而不影响生长停滞特异性因子6(GAS6)的结合(参见同上，摘要)。相同作者还描述了WO2016/091891中的D4抗体(参见该公开的SEQ ID No.1和2)。
[0011]在最后一个实本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗体，其结合Axl且包含:选自以下的抗体VH结构域：10G5 VH(GH2)结构域(SEQ ID NO.2)和10G5 VH(GH1)结构域(SEQ ID NO.1)；和/或选自以下的抗体VL结构域：10G5 VL(GL1)结构域(SEQ ID NO.3)和10G5 VL(GL2)结构域(SEQ ID NO.4)。2.根据权利要求1的抗体，其包含10G5 VH(GH2)结构域(SEQ ID NO.2)和10G5 VL(GL1)结构域(SEQ ID NO.3)。3.根据权利要求1的抗体，其包含10G5 VH(GH1)结构域(SEQ ID NO.1)和10G5 VL(GL2)结构域(SEQ ID NO.4)。4.根据权利要求1至3任一项的抗体，其中所述抗体包含:(i)抗体重链恒定区的全部或一部分和/或抗体轻链恒定区的全部或一部分；(ii)全抗体；或(iii)结合抗原的抗体片段。5.根据权利要求4的抗体，其中所述全抗体为IgG抗体；或其中所述结合抗原的抗体片段为单结构域抗体、Fv、scFv、dsFv、Fd、Fab、F(ab
’
)2...

【专利技术属性】
技术研发人员：D，
申请(专利权)人：卑尔根生物股份公司，
类型：发明
国别省市：