一种核苷代谢因子培养基发酵生产腺苷的方法技术

本发明专利技术属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种核苷代谢因子培养基发酵生产腺苷的方法。其步骤为，培养腺苷发酵菌株，以体积比5

【技术实现步骤摘要】
一种核苷代谢因子培养基发酵生产腺苷的方法


[0001]本专利技术属于微生物发酵
，具体涉及一种核苷代谢因子培养基发酵生产腺苷的方法。

技术介绍

[0002]腺苷，又称“腺嘌呤核苷”。腺苷是一种杂环分子，分子量为267.25，由腺嘌呤、核糖和三个磷酸基团连接成，是生物体内最直接的能量来源。腺苷有促进冠状血管扩张及心肌代谢的机能，扩张血管，增加冠状血管血量的药理作用，因此可以用于冠状血管障、狭心症、动脉硬化症及高血压症等疾病的治疗。此外，也可以用于食品、保健品添加剂，有很好的市场前景。
[0003]目前，现有技术用于生产腺苷的方法由酶法、化学法以及发酵法。酶法和化学法成本较高，发酵法具备成本低、副产物小，对环境更加友好。文献1“有机氮源对腺苷发酵的影响，发酵科技通讯2014年”，主要研究了玉米浆、豆饼水解液和酵母粉等有机氮源对腺苷发酵产苷的影响,在5L发酵罐上通过添加不同浓度的有机氮源，考察枯草杆菌XGL在不同条件下的菌体生长与产苷情况，通过实验优化，获得最佳的有机氮源为玉米浆20mL/L、豆饼水解液30mL/L、酵母粉16g/L，在此条件下发酵50h，比初始发酵条件提高65.1％。文献2“响应面设计法优化腺苷发酵培养基，华东理工大学学报2005年”对发酵培养基进行了优化，包括酵母粉、玉米浆、硫酸铵以及硫酸镁等组分，较初始条件提高了28.6％。有机氮源，酵母粉类，大豆蛋白类混合使用，延迟菌种衰亡，减弱衰亡速度，提供菌种生长需要的营养物质提高腺苷产量，延长了发酵时间。但这些发酵基相对单一，由于菌株基因缺陷型带来的代谢因子缺失，菌体在单一的发酵基内发酵，菌体生产活力小，产腺苷效率不高。

技术实现思路

[0004]针对现有技术的缺陷，根据核苷发酵途径菌株的遗传特性，利用其相同发酵代谢途径HMP(磷酸戊糖途径)和EMP(糖酵解途径)进行发酵，从而弥补核苷菌株间不同基因缺陷型带来的代谢因子缺失，进行营养互补，从而提高菌体生产活力。本专利技术提供了一种核苷代谢因子培养基发酵生产腺苷的方法。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术的技术方案是：一种核苷代谢因子培养基发酵生产腺苷的方法，其步骤为,
[0006]培养腺苷发酵菌株，以体积比5
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15％的接种量将腺苷种子液接入到装有腺苷发酵培养基的发酵罐中，培养温度35
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37℃，溶氧值为15
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25％，通过流加氨水控制pH，0
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12h，控制pH在6.7
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6.8；12h至结束，控制pH为6.4
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6.5；发酵总时间为40
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42h，得到腺苷发酵液；
[0007]所述腺苷发酵培养基为核苷代谢因子培养基；所述核苷代谢因子培养基的组分为肌苷发酵生长因子和鸟苷发酵生长因子的混合物。
[0008]进一步：在上述核苷代谢因子培养基发酵生产腺苷的方法中，培养腺苷发酵菌株，以体积比10％的接种量将腺苷种子液接入到装有腺苷发酵培养基的发酵罐中。
[0009]所述的肌苷发酵生长因子的制备步骤为，以产肌苷菌为发酵菌株，以体积比5
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15％的接种量将种子液接入到装有肌苷发酵培养基的发酵罐中，培养温度35
‑
37℃，溶氧量为15
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25％，通过流加氨水控制pH在6.7
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6.8；发酵总时间为12
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13h，得到肌苷发酵生长因子。
[0010]所述的肌苷发酵生长因子的制备步骤为，以产肌苷菌为发酵菌株，以体积比10％的接种量将种子液接入到装有肌苷发酵培养基的发酵罐中。
[0011]所述肌苷发酵培养基组成为，葡萄糖含量60g
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70g/L、硫酸铵10
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15g/L、玉米浆干粉15
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20g/L、酵母浸粉5
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10g/L、大豆蛋白胨2
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4g/L、谷氨酸钠3
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8g/L、七水硫酸镁2
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4g/L、磷酸二氢钾0.5
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1.5g/L、一水硫酸锰50
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200mg/L、七水硫酸亚铁30
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100mg/L、pH为6.7。
[0012]所述的鸟苷发酵生长因子的制备步骤为，以产鸟苷菌为发酵菌株，以体种比5
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15％的接种量将种子液接入到装有鸟苷发酵培养基的发酵罐中，培养温度35
‑
37℃，溶氧量为15
‑
25％，通过流加氨水控制pH在6.7
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6.8；发酵总时间为12
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13h，得到鸟苷发酵生长因子；
[0013]所述的鸟苷发酵生长因子的制备步骤为，以产鸟苷菌为发酵菌株，以体种比10％的接种量将种子液接入到装有鸟苷发酵培养基的发酵罐中。
[0014]所述鸟苷发酵培养基的组成为葡萄糖含量60g
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70g/L，硫酸铵10
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15g/L，玉米浆干粉15
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20g/L，酵母浸粉5
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10g/L,大豆蛋白胨2
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4g/L,谷氨酸钠3
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8g/L，七水硫酸镁2
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4g/L，磷酸二氢钾0.5
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1.5g/L，一水硫酸锰50
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200mg/L，七水硫酸亚铁30
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100mg/L，pH为6.7。
[0015]所述核苷代谢因子培养基是需要将肌苷发酵生长因子和肌苷发酵生长因子通过超滤膜过滤除菌后再混合，所述的混合体积比的比例为1:1；0.5:1.5；1.5:0.5；0.8:1.2；1.2:0.8。优选的混合比例为1:1。
[0016]与现有技术相比，上述核苷代谢因子培养基发酵生产腺苷的方法，其步骤为，培养腺苷发酵菌株，以体积比5
‑
15％的接种量将腺苷种子液接入到装有腺苷发酵培养基的发酵罐中，培养温度35
‑
37℃，溶氧值为15
‑
25％，通过流加氨水控制pH，0
‑
12h，控制pH在6.7
‑
6.8；12h至结束，控制pH为6.4
‑
6.5；发酵总时间为40
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42h，得到腺苷发酵液；所述腺苷发酵培养基为核苷代谢因子培养基；所述核苷代谢因子培养基的组分为肌苷发酵生长因子和鸟苷发酵生长因子的混合物。由于肌苷、鸟苷、腺苷同为一条核苷合成代谢途径的三个分支，拥有共同代谢前体。其最终目标产物的差异取决于基因缺陷型带来的发酵过程代谢因子的变化。本专利技术根据腺苷的生物代谢调控途径对发酵方法的改进，发酵培养基为核苷代谢因子培养基。本专利技术根据腺苷的生物代谢调控途径对发酵方法的改进，发酵培养基为核苷代谢因子培养基。其同源代谢途径有利于营养互补，提高腺苷菌体活力和代谢能力，进一步提高腺苷的产量。即本专利技术通过优化培本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种核苷代谢因子培养基发酵生产腺苷的方法，其步骤为，培养腺苷发酵菌株，以体积比5
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15％的接种量将腺苷种子液接入到装有腺苷发酵培养基的发酵罐中，培养温度35
‑
37℃，溶氧值为15
‑
25％，通过流加氨水控制pH，0
‑
12h，控制pH在6.7
‑
6.8；12h至结束，控制pH为6.4
‑
6.5；发酵总时间为40
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42h，得到腺苷发酵液；所述腺苷发酵培养基为核苷代谢因子培养基；所述核苷代谢因子培养基的组分为肌苷发酵生长因子和鸟苷发酵生长因子的混合物。2.根据权利要求1所述的核苷代谢因子培养基发酵生产腺苷的方法，其特征在于：培养腺苷发酵菌株，以体积比10％的接种量将腺苷种子液接入到装有腺苷发酵培养基的发酵罐中。3.根据权利要求2所述的核苷代谢因子培养基发酵生产腺苷的方法，其特征在于：所述的肌苷发酵生长因子的制备步骤为，以产肌苷菌为发酵菌株，以体积比5
‑
15％的接种量将种子液接入到装有肌苷发酵培养基的发酵罐中，培养温度35
‑
37℃，溶氧量为15
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25％，通过流加氨水控制pH在6.7
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6.8；发酵总时间为12
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13h，得到肌苷发酵生长因子。4.根据权利要求3所述的核苷代谢因子培养基发酵生产腺苷的方法，其特征在于：所述的肌苷发酵生长因子的制备步骤为，以产肌苷菌为发酵菌株，以体积比10％的接种量将种子液接入到装有肌苷发酵培养基的发酵罐中。5.根据权利要求4所述的核苷代谢因子培养基发酵生产腺苷的方法，其特征在于：所述肌苷发酵培养基组成为，葡萄糖含量60g
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70g/L、硫酸铵10
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15g/L、玉米浆干粉15
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20g/L、酵母浸粉5
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10g/L、大豆蛋白胨2
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4g/L、谷氨酸钠3
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8g/L、七水硫酸镁2
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【专利技术属性】
技术研发人员：徐达，任洪发，黄誉钊，严盟，黄励坚，王少华，王海波，
申请(专利权)人：肇东星湖生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：