一种用于非靶代谢检测中的质控品配制及应用方法技术

技术编号:39053021 阅读:11 留言:0更新日期:2023-10-12 19:45
本发明专利技术属于分析检测领域,提供了一种用于非靶代谢检测中的质控品配制及应用方法,包括:取母液浓度为10~15μg/mL的Octanoic acid、L

【技术实现步骤摘要】
一种用于非靶代谢检测中的质控品配制及应用方法


[0001]本专利技术属于分析检测领域,特别涉及一种用于非靶代谢检测中的质控品配制及应用方法。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解,而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]代谢组学是继基因组学、转录组学、蛋白质组学后出现的新兴组学技术,是系统生物学的重要组成部分。代谢组学主要考察生物体系(细胞、组织等)受到刺激或扰动后,其代谢产物的变化或随时间发生的变化,通过筛选实验组与对照组的差异代谢物,研究差异代谢物参与的生物过程,揭示其参与的生命活动机制。
[0004]代谢组学相比于基因组学、转录组学和蛋白质组学,能够更直接、更准确地反映生物体当前的生理状态。如果说基因组学和蛋白质组学告诉你可能会发生什么,那么代谢组学则告诉你确实发生了什么。
[0005]非靶代谢是一种常用的代谢组学研究方法,用于代谢途径及代谢网络的解析,在临床疾病、生物医药、农林畜牧、海洋水产等领域具有广泛应用。
[0006]检测过程中,整套检测体系运行过程中是否稳定会影响检索结果的准确性,目前,采用质控方法来判别检测结果的稳定性。但现有质控方法存在以下问题:
[0007]1、不能用具体数值来判别检测结果的稳定性,只能用叠加图的重叠情况来主观判断。
[0008]2、现有质控方法因项目不同,样本类型会改变,不能长久记录和监控仪器不同时期稳定性。

技术实现思路

[0009]为了解决上述问题,本专利技术提供一种用于非靶代谢检测中的质控品配制及应用方法。
[0010]为了实现上述目的,本专利技术采用如下技术方案:
[0011]本专利技术的第一个方面,提供了一种用于非靶代谢检测中的质控品配制方法,包括:
[0012]取母液浓度为10~15μg/mL的Octanoic acid、L

Tryptophan、Cholic acid、Ursonic acid、Maltotetraose、L

Thyroxine、LactμLose、Lactobionic acid、Maltopentaose溶液50~60μL,加入650~700μL的50~60%甲醇水溶液,混匀,制得浓度为0.5~0.6μg/mL的混标质控溶液。
[0013]本专利技术的第二个方面,提供了一种用于非靶代谢检测中仪器及系统的稳定性的评价方法,包括:
[0014]按照上述的方法配置混标质控溶液;
[0015]配制混样质控溶液;
[0016]对样本进行前处理,进行液质联用检测,收集检测数据;
[0017]根据混合标准品质控的峰面积变异系数CV%和保留时间RT的偏差判别整套检测体系运行过程中是否稳定,即得。
[0018]本专利技术的第三个方面,提供了一种用于非靶代谢检测中的质控品配制的试剂盒,含有上述的配置方法制备的混标质控溶液。
[0019]本专利技术的有益效果
[0020](1)本专利技术的方法用混合标准品质控的峰面积变异系数(CV%)和保留时间(RT)的偏差来判别整套检测体系运行过程中是否稳定,数值变化观测直观,判别简单。
[0021](2)本专利技术的方法可以作为长期质控品监测仪器及系统状态,不受项目和样本类型的局限,适用于所有仪器和样本类型。
附图说明
[0022]构成本专利技术的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解,本专利技术的示例性实施例及其说明用于解释本专利技术,并不构成对本专利技术的不当限定。
[0023]图1为正模式Maltopentaose(1.37min)、L

Thyroxine(11.05min)、Lactulose(12.49min)、Lactobionic acid(14.45min)图谱;
[0024]图2为负模式Maltotetraose(1.35min)、L

Tryptophan(5.54min)、Octanoic acid(10.53min)、L

Thyroxine(11.21min)、Cholic acid(11.87min)、Ursonic acid(14.10min)图谱;
[0025]图3为实施例1的排机顺序图。
具体实施方式
[0026]应该指出,以下详细说明都是示例性的,旨在对本专利技术提供进一步的说明。除非另有指明,本专利技术使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。
[0027]一种用于非靶代谢检测中的质控品配制方法,包括:
[0028]取母液浓度为10~15μg/mL的Octanoic acid、L

Tryptophan、Cholic acid、Ursonic acid、Maltotetraose、L

Thyroxine、LactμLose、Lactobionic acid、Maltopentaose溶液50~60μL,加入650~700μL的50~60%甲醇水溶液,混匀,制得浓度为0.5~0.6μg/mL的混标质控溶液。
[0029]一种用于非靶代谢检测中仪器及系统的稳定性的评价方法,包括:
[0030]按照上述的方法配置混标质控溶液;
[0031]配制混样质控溶液;
[0032]对样本进行前处理,进行液质联用检测,收集检测数据;
[0033]根据混合标准品质控的峰面积变异系数CV%和保留时间RT的偏差判别整套检测体系运行过程中是否稳定,即得。
[0034]在一些实施例中,包括:
[0035]移取100~120μL样本,加到离心管中,向所述离心管中加入5~6倍体积的甲醇,混
匀,沉淀去掉蛋白,冰浴放置5~10min后在4~4.5℃条件下,第一次离心,移取上述上清溶液500~600μL,加入1/2~1/2体积的超纯水即250μL,混匀后在4~4.5℃条件下,二次离心,取上清溶液至上样管中备用上机。
[0036]在一些实施例中,所述第一次离心的具体条件为10000~12000rpm下,离心20~25min。
[0037]在一些实施例中,二次离心的具体条件为10000~12000rpm下,离心5~8min。
[0038]在一些实施例中,液相色谱的检测条件为色谱柱:Thermo Hypesil Gold,柱温:38~40℃,流速:0.3~0.5mL/min。
[0039]在一些实施例中,正模式:流动相A:0.1%甲酸水溶液;
[0040]流动相B:甲醇;
[0041]负模式:流动相A:5mM乙酸铵水溶液;
[0042]流动相B:甲醇。
[0043]在一些实施例中,色谱梯度洗脱程序:0—1.5min,流动相A比例为98%;
[0044]1.5—12min,流动相本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于非靶代谢检测中的质控品配制方法,其特征在于,包括:取母液浓度为10~15μg/mL的Octanoic acid、L

Tryptophan、Cholic acid、Ursonic acid、Maltotetraose、L

Thyroxine、LactμLose、Lactobionic acid、Maltopentaose溶液50~60μL,加入650~700μL的50~60%甲醇水溶液,混匀,制得浓度为0.5~0.6μg/mL的混标质控溶液。2.一种用于非靶代谢检测中仪器及系统的稳定性的评价方法,其特征在于,包括:按照权利要求1的方法配置混标质控溶液;配制混样质控溶液;对样本进行前处理,进行液质联用检测,收集检测数据;根据混合标准品质控的峰面积变异系数CV%和保留时间RT的偏差判别整套检测体系运行过程中是否稳定,即得。3.如权利要求2所述的用于非靶代谢检测中的质控品配制方法,其特征在于,包括:移取100~120μL样本,加到离心管中,向所述离心管中加入5~6倍体积的甲醇,混匀,沉淀去掉蛋白,冰浴放置5~10min后在4~4.5℃条件下,第一次离心,移取上述上清溶液500~600μL,加入1/2~1/2体积的超纯水即250μL,混匀后在4~4.5℃条件下,二次离心,取上清溶液至上样管中备用上机。4.如权利要求2所述的用于非靶代谢检测中的质控品配制方法,其特征在于,所述第一次离心的具体条件为10000~12000rpm下,离心20~25min;或,所述二次离心的具体条件为10000~12000rpm下,离心5~8min。5.如权利要求2所述的用于非靶代谢检测中的质控品配制方法,其特征在于,液相色谱的检测条件为色谱柱:Thermo Hypes...

【专利技术属性】
技术研发人员:弭兆元王劲松郭启雷
申请(专利权)人:山东英盛生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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