一种易黄汤指纹图谱的构建方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种易黄汤指纹图谱的构建方法及其应用，包括以下步骤：(1)将易黄汤样品与醇溶液混合超声，得到供试品溶液；(2)将对照品与醇溶液混合，得到对照品溶液，所述对照品包括尿囊素、没食子酸、京尼平苷酸、盐酸黄柏碱或盐酸小檗碱中任意一种或至少两种的组合；(3)将供试品溶液、对照品溶液分别进行液相检测，根据结果中筛选出特征峰，并在特征峰中选择S峰，计算其他特征峰相对S峰的相对保留时间和/或相对峰面积，即得到所述易黄汤指纹图谱。本发明专利技术提供的构建方法得到的指纹图谱能够对易黄汤进行有效准确的质量鉴定，同时通过对特征图谱中的各个峰进行了归属，专属性强，能够有效提高质量控制的准确度。有效提高质量控制的准确度。有效提高质量控制的准确度。

【技术实现步骤摘要】
一种易黄汤指纹图谱的构建方法及其应用


[0001]本专利技术属于中药质量控制领域，具体涉及一种易黄汤指纹图谱的构建方法及其应用，尤其涉及一种准确的易黄汤指纹图谱的构建方法及其应用。

技术介绍

[0002]易黄汤来源于清
·
傅山的《傅青主女科卷一带下》，处方由山药(炒)、芡实(炒)、黄柏(盐水炒)、车前子(酒炒)、白果组成。炒山药、炒芡实补脾益肾、固涩止带，《本草求真》曰：“山药之补，本有过于芡实，而芡实之涩，更有胜于山药，”故共为君药。白果收涩止带，兼除湿热，为臣药。用少量黄柏苦寒入肾，清热燥湿；车前子甘寒，清热利湿，均为佐药。诸药合用，重在补涩，辅以清利，使肾虚得复，热清湿祛，则带下自愈。
[0003]中药及制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的方法。而现有的方法大多只是针对单一成分或单一种类成分的研究，对于整体复方汤剂的研究较少。易黄汤作为复方制剂，化学成分复杂，是多种成分的混合体，有效成分包括黄酮类、萜类化合物等，有必要对其中的化学成分进行检测，因此，如何提供一种能够有效把控研究易黄汤的主要成分，把控其质量，成为了亟待解决的问题。

技术实现思路

[0004]针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种易黄汤指纹图谱的构建方法及其应用，尤其提供一种准确的易黄汤指纹图谱的构建方法及其应用。本专利技术提供的构建方法得到的指纹图谱能够对易黄汤进行有效准确的质量鉴定，同时通过对特征图谱中的各个峰进行了归属，专属性强，能够有效提高质量控制的准确度。
[0005]为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0006]一方面，本专利技术提供了一种易黄汤指纹图谱的构建方法，所述构建方法包括以下步骤：
[0007](1)将易黄汤样品与醇溶液混合超声，得到供试品溶液；
[0008](2)将对照品与醇溶液混合，得到对照品溶液，所述对照品包括尿囊素、没食子酸、京尼平苷酸、盐酸黄柏碱或盐酸小檗碱中任意一种或至少两种的组合；
[0009](3)将供试品溶液、对照品溶液分别进行液相检测，根据结果在供试品溶液液相检测结果中筛选出对照品峰和峰形好、分离度高的峰为特征峰，并在特征峰中选择成分确定、峰形较好的为S峰，计算其他特征峰相对S峰的相对保留时间和/或相对峰面积，即得到所述易黄汤指纹图谱。
[0010]步骤(1)、(2)不区分先后顺序。
[0011]本专利技术通过将特定对照品与供试品进行检测、比对，能够有效建立易黄汤的指纹图谱，实现了对易黄汤质量的有效鉴别。
[0012]优选地，所述醇溶液为甲醇水溶液，所述甲醇水溶液的体积分数为40
‑
60％。
[0013]优选地，步骤(1)所述易黄汤样品与醇溶液的料液比为1:(40
‑
60)g/mL。
[0014]优选地，步骤(2)所述对照品包括至少两种时，每种对照品制成单标对照品溶液，所述单标对照品溶液的浓度为10
‑
50μg/mL。
[0015]其中，甲醇水溶液的体积分数可以是40％、45％、50％、55％或60％等，，易黄汤样品与醇溶液的料液比可以是1:40g/mL、1:45g/mL、1:50g/mL、1:55g/mL或1:60g/mL等，单标对照品溶液的浓度可以是10μg/mL、15μg/mL、20μg/mL、25μg/mL、30μg/mL、35μg/mL、40μg/mL、45μg/mL或50μg/mL等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。
[0016]优选地，所述步骤(3)之前还包括将对照药材分别与水混合煎煮，得到对照药材溶液，所述对照药材包括山药、芡实、黄柏、车前子和白果。
[0017]优选地，所述步骤(3)还包括将对照药材溶液进行液相检测，将检测结果与特征峰结合，对特征峰与对照药材进行对应归属。
[0018]上述步骤建立了特征峰与易黄汤中各药味的对照关系，具有明确的专属性，能够进一步提高质量控制的准确性。
[0019]优选地，所述液相检测的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为乙腈，所述流动相B为磷酸水溶液，所述磷酸水溶液的质量分数为0.08
‑
0.12％，例如0.08％、0.09％、0.1％、0.11％或0.12％等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。
[0020]优选地，所述液相检测采用梯度洗脱，所述梯度洗脱具体如下：
[0021]第0
‑
10min，流动相A的体积分数为0，流动相B的体积分数为100％，流速0.4mL/min；
[0022]第10
‑
11min，流动相A的体积分数由0匀速变为5％，流动相B的体积分数由100％匀速变为95％，流速由0.4mL/min变为1mL/min；
[0023]第11
‑
60min，流动相A的体积分数由5％匀速变为15％，流动相B的体积分数由95％匀速变为85％，流速1mL/min；
[0024]第60
‑
90min，流动相A的体积分数由15％匀速变为30％，流动相B的体积分数由85％匀速变为70％，流速1mL/min；
[0025]第90
‑
100min，流动相A的体积分数由30％匀速变为0％，流动相B的体积分数由70％匀速变为100％，流速1mL/min。
[0026]优选地，所述液相检测的色谱柱为C18
‑
AQ色谱柱，柱温为25
‑
35℃。
[0027]优选地，所述特征图谱中，特征峰的数量为13，按保留时间从小到大排序，以9号峰为S峰，1
‑
8、10
‑
13号峰的相对保留时间分别为0.1499
‑
0.1832、0.2939
‑
0.3592、0.3066
‑
0.3748、0.3469
‑
0.4240、0.4508
‑
0.5510、0.6871
‑
0.8398、0.7448
‑
0.9130、0.7805
‑
0.9540、1.0175
‑
1.2436、1.0510
‑
1.2846、1.1001
‑
1.3445、1.6506
‑
2.0174。
[0028]所述9号峰成分为黄柏碱。
[0029]优选地，所述特征图谱中，以9号峰为S峰，1
‑
8、10
‑
13号峰的相对峰面积分别为1.4209
‑
1.7367、0.6654
‑
0.8133、0.1616
‑
0.1975、0.1883
‑
0.2301、0.0961
‑
0.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种易黄汤指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：(1)将易黄汤样品与醇溶液混合超声，得到供试品溶液；(2)将对照品与醇溶液混合，得到对照品溶液，所述对照品包括尿囊素、没食子酸、京尼平苷酸、盐酸黄柏碱或盐酸小檗碱中任意一种或至少两种的组合；(3)将供试品溶液、对照品溶液分别进行液相检测，根据结果在供试品溶液液相检测结果中筛选出对照品峰和峰形好、分离度高的峰为特征峰，并在特征峰中选择成分确定、峰形较好的为S峰，计算其他特征峰相对S峰的相对保留时间和/或相对峰面积，即得到所述易黄汤指纹图谱；步骤(1)、(2)不区分先后顺序。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述醇溶液为甲醇水溶液，所述甲醇水溶液的体积分数为40
‑
60％。3.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)所述易黄汤样品与醇溶液的料液比为1:(40
‑
60)g/mL。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)所述对照品包括至少两种时，每种对照品制成单标对照品溶液，所述单标对照品溶液的浓度为10
‑
50μg/mL。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的构建方法，其特征在于，所述步骤(3)之前还包括将对照药材分别与水混合煎煮，得到对照药材溶液，所述对照药材包括山药、芡实、黄柏、车前子和白果；优选地，所述步骤(3)还包括将对照药材溶液进行液相检测，将检测结果与特征峰结合，对特征峰与对照药材进行对应归属。6.根据权利要求1
‑
5中任一项所述的构建方法，其特征在于，所述液相检测的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为乙腈，所述流动相B为磷酸水溶液，所述磷酸水溶液的质量分数为0.08
‑
0.12％。7.根据权利要求6所述的构建方法，其特征在于，所述液相检测采用梯度洗脱，所述梯度洗脱具体如下：第0
‑
10min，流动相A的体积分数为0，流动相B的体积分数为100％，流速0.4mL/min；第10
‑
11min，流动相A的体积分数由0匀速变为5％，流动相B的体积分数由100％匀速变为95％，流速由0.4mL/min变为1mL/min；第11
‑
60min，流动相A的体积分数由5％匀速变为15％，流动相B的体积分数由95％匀速变为85％，流速1mL/min；第60
‑
90min，流动相A的体积分数由15％匀速变为30％，流动相B的体积分数由85％匀速变为70％，流速1mL/min；第90
‑
100min，流动相A的体积分数由30％匀速变为0％，流动相B的体积分数由70％匀速变为100％，流速1mL/min。8.根据权利要求1
‑
7中任一项...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩豫，王亚茹，成亮，魏茂陈，
申请(专利权)人：上海硕方医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：