T细胞和嵌合刺激受体及其应用制造技术

本申请描述了免疫细胞，所述免疫细胞包含：T细胞受体(TCR)和嵌合刺激受体(CSR)，所述嵌合刺激受体包含(i)能够结合或与靶配体相互作用的配体结合模块；(ii)跨膜域；和(iii)CD30共刺激结构域，其中所述免疫细胞中的CSR缺乏功能性初级信号传导结构域。本申请还提供了使用上述免疫细胞或其组分(例如CSR)以用于癌症(例如实体瘤癌症)的治疗性治疗的方法。(例如实体瘤癌症)的治疗性治疗的方法。(例如实体瘤癌症)的治疗性治疗的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】T细胞和嵌合刺激受体及其应用
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求2020年7月29日递交的第63/058,046号美国临时申请的优先权，其公开内容在此通过引用整体并入本文中，用于所有目的。

技术介绍

[0002]在过继性T细胞免疫疗法中，患者自身的T淋巴细胞被改造成表达各种重组抗原受体，如嵌合抗原受体(CARs)，其在治疗血液恶性肿瘤方面显示出巨大的前景，但在实体瘤方面却没有那么大的前景。另外，CAR本身通常不够有效，尤其是对于实体瘤，即使利用常用的共刺激片段如CD28、4
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1BB或DAP10，无论是以顺式还是反式表达。因此，需要更有效且更持久的T细胞免疫疗法。
[0003]由于癌症的检查点抑制剂和过继性T细胞疗法(ACT)在临床上的成功，癌症免疫疗法正在成为癌症治疗的一线方法之一。尽管利用来自外周血的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、CAR T细胞或TCR T细胞进行的ACT疗法已显示出一些临床结果(Phan和Rosenberg,Cancer Control20(4):289
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297,2013；和Sch本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.免疫细胞，其包含：(a)αβT细胞受体(TCR)，和(b)嵌合刺激受体(CSR)，所述嵌合刺激受体包含：(i)能够与靶配体结合或相互作用的配体结合模块；(ii)跨膜域(CSR跨膜域)；和(iii)CD30共刺激结构域，其中所述CSR缺乏来源于CD3ζ的胞内信号传导序列的功能性初级信号传导结构域，任选地，其中：所述CD30共刺激结构域包含能结合胞内TRAF信号传导蛋白的序列，例如，对应于具有SEQ ID NO:228的序列的全长CD30的残基561
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573或578
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586；和/或所述CD30共刺激结构域包含与SEQ ID NO:228的残基561
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573或578
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586具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的序列或与SEQ ID NO:238的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％同一性的序列。2.如权利要求1所述的免疫细胞，其中所述CSR包含超过一个CD30共刺激结构域；或者所述CSR还包含至少一个共刺激结构域，所述共刺激结构域包含与CD30不同的共刺激分子的胞内序列，任选地，其中与CD30不同的所述共刺激分子选自CD27、CD28、4
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1BB(CD137)、OX40、CD40、PD
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1、ICOS、淋巴细胞功能相关的抗原1(LFA
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1)、CD2、CD7、LIGHT、NKG2C、B7
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H3、和与CD83特异性结合的配体。3.如权利要求1或2所述的免疫细胞，其中所述CSR的配体结合模块来源于受体的胞外域；或者所述CSR的配体结合模块包含抗体部分(CSR抗体部分)，任选地，其中CSR抗体部分是单链抗体片段，如单链Fv(scFv)、单链Fab、单链Fab
’
、单结构域抗体片段、单结构域多特异性抗体、胞内抗体、纳米抗体或单链免疫因子。4.如权利要求3所述的免疫细胞，其中所述CSR抗体部分是单结构域多特异性抗体，任选地，其中所述单结构域多特异性抗体是单结构域双特异性抗体；和/或所述CSR抗体部分是单链Fv(scFv)，任选地串联scFv。5.如权利要求1
‑
4中任一项所述的免疫细胞，其中所述TCR和/或所述CSR抗体部分特异性结合疾病相关的MHC限制性抗原，任选地，其中所述疾病相关的抗原是癌症相关的抗原。6.如权利要求3
‑
5中任一项所述的免疫细胞，其中所述TCR和所述CSR抗体部分均特异性结合MHC限制性抗原，任选地，其中所述TCR和所述CSR抗体部分特异性结合同一抗原，所述TCR和所述CSR抗体部分特异性结合来自同一抗原的不同肽；或者所述TCR和所述CSR抗体部分特异性结合不同的抗原。7.如权利要求1
‑
6中任一项所述的免疫细胞，其中所述TCR和/或所述CSR抗体部分特异性结合包含肽和MHC蛋白的复合物，并且其中所述肽来源于选自以下的蛋白质：WT
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1、AFP、HPV16
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E7、NY
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ESO
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1、PRAME、EBV
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LMP2A、KRAS、FoxP3、组蛋白H3.3、PSA、COL18A1、SRPX、KIF16B、TFDP2、KIAA1279、XPNPEP1、UGGT2、PHKA1、KIF16B、SON、GNB5、FBXO21、CORO7、RECQL5、TFDP2、KIAA1967、KIF16B、NUP98、GPD2、CASP8、SKIV2L、H3F3B、MAGE
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A4、MAGEA6、PDS5A、MED13、SLC3A2、KIAA0368、CADPS2、CTSB、DPY19L4、RNF19B、ASTN1、CDK4、MLL2、SMARCD3、p53、RAD21、RUSC2、VPS16、MGA、ARHGAP35、HER2、5T4，和以上的变体或突变体。8.如权利要求7所述的免疫细胞，其中所述TCR特异性结合所述复合物；和/或所述CSR
抗体部分特异性结合细胞表面抗原，任选地，其中所述细胞表面抗原选自蛋白质、碳水化合物和脂质。9.如权利要求7或8所述的免疫细胞，其中所述TCR特异性结合包含MHC蛋白和来源于细胞表面抗原的肽的复合物，并且其中所述CSR抗体部分特异性结合同一细胞表面抗原，任选地，其中所述细胞表面抗原是Glypican 3(GPC3)、HER2/ERBB2、EpCAM、MUC16、叶酸受体α(FRα)、MUC1、EGFR、EGFRvIII、HER3、DLL3、c
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Met、ROR2、CD70、MCT4、MSLN、PSMA或以上的变体或突变体；和/或所述TCR特异性结合包含α
‑
甲胎蛋白(AFP)肽和MHC I类蛋白的复合物，任选地，其中所述AFP肽包含SEQ ID NOS:26
‑
36中任一项的氨基酸序列。10.如权利要求1
‑
9中任一项所述的免疫细胞，其中所述TCR包含：(1)包含分别为SEQ ID NOS:305
‑
307的CDR1、CDR2和CDR3序列的抗AFP
‑
TCRα链；或(2)包含分别为SEQ ID NOS:308
‑
310的CDR1、CDR2和CDR3的序列的抗AFP
‑
TCRβ链；或(3)包含分别为SEQ ID NOS:311
‑
313的CDR1、CDR2和CDR3的序列的抗AFP
‑
TCRα链；任选地，其中所述TCR包含：(1)包含SEQ ID NO:314的序列的抗AFP
‑
TCRα链可变区；或(2)包含SEQ ID NO:315的序列的抗AFP
‑
TCRβ链可变区；或(3)包含SEQ ID NO:316的序列的抗AFP
‑
TCRα链可变区；和/或所述TCR包含SEQ ID NOS:1
‑
3中任一项的序列。11.如权利要求1
‑
9中任一项所述的免疫细胞，其中所述TCR包含SEQ ID NOS:6
‑
19和178
‑
180中任一项的序列。12.如权利要求1
‑
11中任一项所述的免疫细胞，其中所述CSR特异性结合glypican 3(GPC3)，任选地，其中所述CSR包含：(1)分别为SEQ ID NOS:317
‑
322的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列；或(2)分别为SEQ ID NOS:323
‑
328的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列；或(3)分别为SEQ ID NOS:329
‑
334的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列；或(4)分别为SEQ ID NOS:335
‑
340的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列；或(5)分别为SEQ ID NOS:341
‑
346的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列；或(6)分别为SEQ ID NOS:347
‑
352的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列；或(7)分别为SEQ ID NOS:353
‑
358的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列；和/或所述CSR包含具有SEQ ID NOS:274、276、278、280、282、284和286中任一项的序列的重链可变区和具有SEQ ID NOS:275、277、279、281、283、285和287中任一项的序列的轻链可变区；和/或所述CSR包含具有SEQ ID NOS:212
‑
213和269
‑
273中任一项的序列的scFv；和/或所述CSR包含SEQ ID NOS:181
‑
211和288
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293中任一项的氨基酸序列。13.如权利要求1
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11中任一项所述的免疫细胞，其中所述CSR特异性结合MSLN。14.如权利要求1
‑
7中任一项所述的免疫细胞，其中所述TCR特异性结合包含KRAS、p53或MSLN肽以及MHC I类蛋白的复合物，任选地，其中所述CSR特异性结合MSLN，且进一步任选地，其中所述CSR包含：分别为SEQ ID NOS:71
‑
73的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和/或具有SEQ ID NO:70的序列的重链可变区；和/或分别为SEQ ID NOS:75
‑
77的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:74的序列的轻链可变区。
15.如权利要求1
‑
7中任一项所述的免疫细胞或权利要求14所述的免疫细胞，其中所述TCR特异性结合包含KRAS、p53或MSLN肽以及MHCI类蛋白的复合物，其中所述CSR特异性结合ROR1；并且任选地，其中：所述CSR特异性结合具有SEQ ID NOS:443
‑
446中任一项的序列的ROR1肽；并且进一步任选地，其中所述CSR包含：分别为SEQ ID NOS:447
‑
449的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和/或具有SEQ ID NO:450的序列的重链可变区；和/或分别为SEQ ID NOS:451
‑
453的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和/或具有SEQ ID NO:454的序列的轻链可变区；和/或任选地具有SEQ ID NO:441的序列的scFv；或者所述CSR包含分别为SEQ ID NOS:455
‑
457的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:458的序列的重链可变区；和/或分别为SEQ ID NOS:459
‑
461的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:462的序列的轻链可变区；和/或任选地具有SEQ ID NO:442的序列的scFv。16.如权利要求1
‑
7中任一项所述的免疫细胞，其中所述TCR特异性结合包含PSA肽和MHCI类蛋白的复合物，任选地其中：所述CSR特异性结合PSMA；或所述CSR特异性结合ROR1，任选地其中，所述CSR特异性结合具有SEQ ID NOS:443
‑
446中任一项的序列的ROR1肽；和/或所述CSR包含分别为SEQ ID NOS:447
‑
449的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:450的序列的重链可变区；和/或分别为SEQ ID NOS:451
‑
453的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:454的序列的轻链可变区；和/或任选地具有SEQ ID NO:441的序列的scFv；或者所述CSR包含分别为SEQ ID NOS:455
‑
457的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:458的序列的重链可变区；和/或分别为SEQ ID NOS:459
‑
461的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:462的序列的轻链可变区；和/或任选地具有SEQ ID NO:442的序列的scFv；和/或所述TCR包含SEQ ID NOS:20
‑
25中任一项的序列；并且任选地，其中所述CSR包含分别为SEQ ID NOS:373
‑
375的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:376的序列的重链可变区；和/或所述CSR包含分别为SEQ ID NOS:377
‑
379的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:380的序列的轻链可变区；或者其中所述CSR包含SEQ ID NO:214的序列；或者所述CSR包含分别为SEQ ID NOS:381
‑
383的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:384的序列的重链可变区；和/或所述CSR包含分别为SEQ ID NOS:385
‑
387的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:388的序列的轻链可变区，或者其中所述CSR包含SEQ ID NO:215的序列。17.如权利要求1
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7中任一项所述的免疫细胞，其中所述TCR特异性结合包含以下肽和MHC I类蛋白的复合物：COL18A1、SRPX、KIF16B、TFDP2、KIAA1279、XPNPEP1、UGGT2、PHKA1、KIF16B、SON、GNB5、FBXO21、CORO7、RECQL5、TFDP2、KIAA1967、KIF16B、MAGEA6、PDS5A、MED13、ASTN1、CDK4、MLL2、SMARCD3、NY
‑
ESO
‑
1或PRAME肽。18.如权利要求1
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7和17中任一项所述的免疫细胞，其中所述CSR特异性结合ROR2。19.如权利要求17或18所述的免疫细胞，其中所述TCR特异性结合包含NY
‑
ESO
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1和所述MHCI类蛋白的复合物，并且包含：(1)分别为SEQ ID NOS:359
‑
361的CDR1、CDR2和CDR3的序
列，和任选地具有SEQ ID NO:362的序列的可变区，和进一步任选地SEQ ID NO:4的序列；或(2)分别为SEQ ID NOS:363
‑
365的CDR1、CDR2和CDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:366的序列的可变区，和进一步任选地SEQ ID NO:5的序列；任选地，其中所述CSR包含：(1)分别为SEQ ID NOS:91
‑
93的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:90的序列的重链可变区；或(2)分别为SEQ ID NOS:95
‑
97的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:94的序列的重链可变区；或(3)分别为SEQ ID NOS:99
‑
101的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:98的序列的重链可变区；或(4)分别为SEQ ID NOS:103
‑
105的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:102的序列的重链可变区；或(5)分别为SEQ ID NOS:107
‑
109的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:106的序列的重链可变区；和/或所述CSR包含：(1)分别为SEQ ID NOS:111
‑
113的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:110的序列的轻链可变区；或(2)分别为SEQ ID NOS:115
‑
117的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:114的序列的轻链可变区；或(3)分别为SEQ ID NOS:119
‑
121的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:118的序列的轻链可变区；或(4)分别为SEQ ID NOS:123
‑
125的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:122的序列的轻链可变区；或(5)分别为SEQ ID NOS:127
‑
129的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:126的序列的轻链可变区。20.如权利要求1
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7中任一项所述的免疫细胞，其中所述TCR特异性结合包含以下肽和MHCI类蛋白的复合物：NUP98、GPD2、CASP8、KRAS、SKIV2L、H3F3B、RAD21或PRAME肽。21.如权利要求1
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7和20中任一项所述的免疫细胞，其中所述CSR特异性结合ROR2，任选地，其中所述CSR包含：(1)分别为SEQ ID NOS:91
‑
93的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:90的序列的重链可变区；或(2)分别为SEQ ID NOS:95
‑
97的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:94的序列的重链可变区；或(3)分别为SEQ ID NOS:99
‑
101的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:98的序列的重链可变区；或(4)分别为SEQ ID NOS:103
‑
105的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:102的序列的重链可变区；或(5)分别为SEQ ID NOS:107
‑
109的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:106的序列的重链可变区；和/或所述CSR包含：(1)分别为SEQ ID NOS:111
‑
113的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:110的序列的轻链可变区；或(2)分别为SEQ ID NOS:115
‑
117的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:114的序列的轻链可变区；或(3)分别为SEQ ID NOS:119
‑
121的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:118的序列的轻链可变区；或(4)分别为SEQ ID NOS:123
‑
125的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:122的序列的轻链可变区；或(5)分别为SEQ ID NOS:127
‑
129的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:126的序列的轻链可变区。22.如权利要求1
‑
7中任一项所述的免疫细胞，其中所述TCR特异性结合包含以下肽和MHCI类蛋白的复合物：SLC3A2、KIAA0368、CADPS2、CTSB、PRAME、p53或PSA肽。23.如权利要求1
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7和22中任一项所述的免疫细胞，其中所述CSR特异性结合HER2、EpCAM或ROR1。24.如权利要求22或23所述的免疫细胞，其中所述TCR包含SEQ ID NOS:20
‑
25中任一项
的序列，任选地，其中：所述CSR结合HER2，并且包含分别为SEQ ID NOS:389
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391的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:41的序列的重链可变区；和/或所述CSR结合HER2，并且包含分别为SEQ ID NOS:392
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394的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:42的序列的轻链可变区；或者所述CSR特异性结合EpCAM，并且包含分别为SEQ ID NOS:403
‑
405的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:60的序列的重链可变区；和/或所述CSR结合EpCAM，并且包含分别为SEQ ID NOS:406
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408的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:61的序列的轻链可变区；或者所述CSR结合ROR1，并且包含分别为SEQ ID NOS:447
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449的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:450的序列的重链可变区；和/或分别为SEQ ID NOS:451
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453的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:454的序列的轻链可变区；和/或任选地具有SEQ ID NO:441的序列的scFv。25.如权利要求22或23中任一项所述的免疫细胞，其中所述TCR包含SEQ ID NOS:20
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25中任一项的序列，并且进一步任选地，其中所述CSR包含分别为SEQ ID NOS:455
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457的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:458的序列的重链可变区；和/或分别为SEQ ID NOS:459
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461的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:462的序列的轻链可变区；和/或任选地具有SEQ ID NO:442的序列的scFv。26.如权利要求25所述的免疫细胞，其中所述CSR特异性结合具有SEQ ID NOS:443
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446中任一项的序列的ROR1肽。27.如权利要求1
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7中任一项所述的免疫细胞，其中所述TCR特异性结合包含以下肽和MHC I类蛋白的复合物：WT1、NY
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ESO
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1、p53、DPY19L4或RNF19B。28.如权利要求1
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7和27中任一项所述的免疫细胞，其中所述CSR特异性结合MUC1、MUC16、FRα或ROR1。29.如权利要求27或28所述的免疫细胞，其中所述TCR特异性结合包含NY
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ESO
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1和所述MHCI类蛋白的复合物，并且包含：(1)分别为SEQ ID NOS:359
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361的CDR1、CDR2和CDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:362的序列的可变区，和进一步任选地SEQ ID NO:4的序列；或(2)分别为SEQ ID NOS:363
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365的CDR1、CDR2和CDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:366的序列的可变区，和进一步任选地SEQ ID NO:5的序列。30.如权利要求27
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29中任一项所述的免疫细胞，其中所述CSR：特异性结合MUC1，并且包含分别为SEQ ID NOS:417
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419的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:367的序列的重链可变区；和/或所述CSR特异性结合MUC1，并且包含分别为SEQ ID NOS:420
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422的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:368的序列的轻链可变区；或者特异性结合MUC16，并且包含：(1)分别为SEQ ID NOS:131
‑
133的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:130的序列的重链可变区；或(2)分别为SEQ ID NOS:135
‑
137的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:134的序列的重链可变区；(3)分别为SEQ ID NOS:429
‑
431的HCDR1、HCDR2和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NOS:146
‑
147中任一项的序列的重链可变区；或(4)分别为SEQ ID NOS:435
‑
437的HCDR1、HCDR2
和HCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NOS:148
‑
149中任一项的序列的重链可变区；和/或包含：(1)分别为SEQ ID NOS:139
‑
141的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:138的序列的轻链可变区；或(2)分别为SEQ ID NOS:143
‑
145的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NO:142的序列的轻链可变区；(3)分别为SEQ ID NOS:432
‑
434的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NOS:150
‑
151中任一项的序列的轻链可变区；或(4)分别为SEQ ID NOS:438
‑
440的LCDR1、LCDR2和LCDR3的序列，和任选地具有SEQ ID NOS:152
‑
153中任一项的序列的轻链可变区。31...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘诚，张红兵，杨智源，张鹏博，徐义翔，熊光焰，崔自由，
申请(专利权)人：优瑞科生物技术公司，
类型：发明
国别省市：