靶向B7-H3抗体-MMAE偶联物及其应用制造技术

本申请涉及生物制药及生物技术领域，特别涉及靶向B7

【技术实现步骤摘要】
靶向B7
‑
H3抗体
‑
MMAE偶联物及其应用


[0001]本申请涉及生物制药及生物
，特别涉及靶向B7
‑
H3抗体
‑
MMAE偶联物及其应用。

技术介绍

[0002]B7
‑
H3(CD276)，是一种跨膜蛋白，在血管生成和转移、肿瘤迁移侵袭以及肿瘤生长等中发挥着非常重要的作用。研究表明B7
‑
H3在多种实体瘤中高表达，包括脑胶质瘤、非小细胞肺癌、肾细胞癌、乳腺癌以及前列腺癌等等，而在正常组织中B7
‑
H3表达量低。因此B7
‑
H3是一个合适的靶点用于抗癌药物研发。
[0003]抗体
‑
药物偶联物(ADCs)由三部分组成：抗体、连接子以及高活性药物分子。通过抗体的靶向作用可以将高活性药物分子特异性的输送到肿瘤部位，从而起到高效低毒的作用，可用于肿瘤靶向治疗。目前已有14个ADCs被FDA被准上市，另外还有100多个ADCs处于临床研究。基于B7
‑
H3的药物开发，目前已有抗体药物、双抗、CAR
‑
T、小分子药物等多种手段，但到目前为止，尚未有针对该靶点的上市药物。靶向B7
‑
H3的ADCs药物也开始逐渐兴起。

技术实现思路

[0004]为解决现有技术中的技术问题，本申请的目的在于提供靶向B7
‑
H3抗体
‑
MMAE偶联物及其应用。本专利技术提供一种通过桥联手段制备一种均一的靶向于B7
‑
H3的抗体
‑
药物偶联物(ADC)并将其用于在癌症靶向治疗中，尤其是脑胶质瘤的治疗中。
[0005]为实现上述目的及其他相关目的，本申请一方面提供一种抗体
‑
药物偶联物，包括式Ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物：
[0006][0007]其中，Anti
‑
B7
‑
H3为抗B7
‑
H3抗体，D为药物，L为连接基团；n表示药物抗体比DAR，n为1～5的自然数。
[0008]在本申请的具体实方式中，抗体
‑
药物偶联物选自SS
‑
401，结构式为：
[0009][0010]本申请另一方面提供一种抗体
‑
药物偶联物的制备方法，包括以下步骤：
[0011]1)将化合物1、11
‑
叠氮基
‑
3,6,9
‑
三氧代十一酸、N
‑
甲基吗啉、1
‑
(3
‑
二甲胺基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺和1
‑
羟基苯并三氮唑以溶液形式反应，得到化合物2：
[0012][0013]2)化合物2溶液中加入化合物3，无水硫酸铜和抗坏血酸钠，反应后过滤除去不溶物，分离得到化合物4：
[0014][0015]3)将B7
‑
H3单抗401溶液和三(2
‑
羧乙基)膦溶液进行第一次振荡反应，再加入化合物4溶液进行第二次振荡反应，除去小分子化合物，得到抗体
‑
药物偶联物SS
‑
401：
[0016][0017]本申请另一方面提供前述的抗体
‑
药物偶联物在制备癌症靶向治疗产品或制备治疗增殖性疾病产品中的应用。
[0018]与现有技术相比，本申请的有益效果为：
[0019]1、本专利技术是基于双乙烯磺酰胺连接子技术，以及特异性靶向于B7
‑
H3的抗体合成靶向于B7
‑
H3的抗体
‑
药物偶联物。
[0020]2、本专利技术基于抗体内在的硫
‑
硫键断开后，再通过双乙烯磺酰胺连接子与药物桥联，可得到DAR为4左右的均一性好的偶联产物。
[0021]3、本专利技术提供的抗体
‑
药物偶联物，在体内外具有很好的效果。
[0022]4、本专利技术提供了所制备的抗体药物偶联物在治疗高增殖性疾病或病灶的用途，尤其是在脑胶质瘤治疗中的用途。
附图说明
[0023]图1为本专利技术中涉及的典型的药物
‑
连接子的制备路线及结构。
[0024]图2为本专利技术中涉及的ADC SS
‑
401的HR
‑
ESI
‑
MS谱图。
[0025]图3为本专利技术中涉及的细胞U251,U87和U87/B7
‑
H3 KO中B7
‑
H3表达图。
[0026]图4为本专利技术中涉及的ADC SS
‑
401、单抗401和MMAE对细胞U251的体外增殖抑制作用。
[0027]图5为本专利技术中涉及的ADC SS
‑
401、单抗401和MMAE对细胞U87的体外增殖抑制作用。
[0028]图6为本专利技术中涉及的ADC SS
‑
401、单抗401和MMAE对细胞U87/B7
‑
H3 KO的体外增殖抑制作用。
[0029]图7为本专利技术中涉及的ADC SS
‑
401和单抗401在不同浓度梯度下与细胞U87的亲和力。
[0030]图8为本专利技术中涉及的ADC SS
‑
401和单抗401在细胞U87中的内吞效应。
[0031]图9为本专利技术中涉及的荧光标记偶联物Cy5.5
‑
SS
‑
401在脑胶质瘤异种移植瘤中的活体成像图。
[0032]图10为本专利技术中涉及的荧光标记偶联物Cy5.5
‑
SS
‑
401在脑胶质瘤异种移植瘤中，小鼠肿瘤部位、心脏、脾、肝、胃和肾脏的成像图。
[0033]图11为本专利技术中涉及的ADC SS
‑
401和单抗401对脑胶质瘤U87异种移植瘤的抑制作用。
[0034]图12为本专利技术中涉及的ADC SS
‑
401和单抗401对脑胶质瘤U87异种移植瘤小鼠体重的影响。图13为本专利技术抗体
‑
药物偶联物SS
‑
401的结构图。
具体实施方式
[0035]为了使本申请的专利技术目的、技术方案和有益效果更加清晰，下面结合实施例对本申请作进一步说明。应理解，所述实施例只用于解释本申请，并非用于限定申请的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法，熟悉此技术的人士可由本说明所揭露的内容容易地了解本申请的其他优点及功效。
[0036]本申请的专利技术人经过大量探索研究，发现了靶向B7
‑
H3抗体
‑
MMAE偶联物及其应用，在此基础上完成本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗体
‑
药物偶联物，其特征在于，包括式Ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物：其中，Anti
‑
B7
‑
H3为抗B7
‑
H3抗体，D为药物，L为连接基团；n表示药物抗体比DAR，n为1～5的自然数。2.如权利要求1所述的抗体
‑
药物偶联物，其特征在于，所述L选自羧基、胺基、炔基、或叠氮中的一种或多种的组合；和/或，所述n为4；和/或，所述Anti
‑
B7
‑
H3经内在的二硫键通过连接基团与药物相连；和/或，所述抗B7
‑
H3抗体为抗B7
‑
H3单克隆抗体；和/或，药物选自一甲基澳瑞他汀E、一甲基澳瑞他汀F、康普瑞汀A、阿糖胞苷、吉西他滨、美登素、DM1、DM4、卡奇霉素及其衍生物、阿霉素、倍癌霉素及其衍生物、吡咯并苯并二氮杂卓(PBD)、SN
‑
38、喜树碱类似物、α
‑
安曼丁以及微管蛋白裂解素类似物。3.如权利要求2所述的抗体
‑
药物偶联物，其特征在于，所述抗体
‑
药物偶联物选自SS
‑
401，结构式为：4.如权利要求3所述的抗体
‑
药物偶联物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将化合物1、11
‑
叠氮基
‑
3,6,9
‑
三氧代十一酸、N
‑
甲基吗啉、1
‑
(3
‑
二甲胺基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺和1
‑
羟基苯并三氮唑以溶液形式反应，得到化合物2：2)化合物2溶液中加入化合物3，无水硫酸铜和抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈红莉，姜标，张学光，
申请(专利权)人：苏州旭光科星抗体生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：