一种人源化的鼠抗人B7-H3单克隆抗体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种人源化的鼠抗人B7

【技术实现步骤摘要】
一种人源化的鼠抗人B7
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H3单克隆抗体及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种人源化的鼠抗人B7
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H3单克隆抗体及其制备方法、肿瘤抑制功能以及功能阻断位点。

技术介绍

[0002]B7
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H3于2001年从人树突状细胞cDNA文库中首次克隆出来。早期的B7
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H3被认为是一种正性共刺激分子，能够正性调控T细胞产生免疫活化效应。但随着研究的深入，越来越多的研究显示B7
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H3更多地展现出负性共刺激分子的效应，包括抑制Th1细胞活性，促进免疫抑制细胞因子产生，促进肿瘤免疫逃逸等。遗憾的是，B7
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H3的受体至今尚未发现。曾有研究发现TLT
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2可以作为B7
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H3的受体发挥功能，但存在争议，并且也应该不是唯一的受体，因为B7
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H3具有正性和负性的双重作用，很可能通过不同受体发挥功能。除了受体的研究，B7
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H3还被发现可以与一些结合蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人源化的鼠抗人B7
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H3单克隆抗体，包括重链可变区和轻链可变区，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述SEQ ID NO.1的序列为：QVQLQESGAELVKPGASVKLSCKTSGYTFTNYPIHWVKQSPGQGLEWIARI YWGIDSIYYNEIFRGKVTLTADTSTSTAYMQLSSLKSEDTAVYFCANSGYTDYGT YYLMDYWGQGTTVTVSS；所述SEQ ID NO.2的序列为：DIVMTQSALSVSVTPGESVSISCRSTRSLLHSNGCTYLYWFLQRPGQSPQLLIY WMYNLASGVPDRFSGSGSGTTFTLKISRVEAEDVGVYYCMSNLEYLFTFGGGTK LEIK。2.根据权利要求1所述一种人源化的鼠抗人B7
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H3单克隆抗体，其特征在于，所述重链可变区具有三个高变区，具体为：GYTFTNYP、IYWGIDSI、ANSGYTDYGTYYLMDY。3.根据权利要求1所述一种人源化的鼠抗人B7
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H3单克隆抗体，其特征在于，所述轻链可变区具有三个高变区，具体为：RSTRSLLHSNGCTYLY、WMYNLA、MSNLEYLFT。4.权利要求1
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3任意一项所述的人源化的鼠抗人B7
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H3单克隆抗体在重链可变区和轻链可变区的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制备B7
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H3单克隆抗体的杂交瘤；(2)制备B7
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H3鼠/人嵌合抗体：(2.1)提取杂交瘤细胞的cDNA：从该杂交瘤细胞株中提取RNA，并使用RT
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PCR技术，将获得的RNA反转录为cDNA，进一步PCR获得单抗重链可变区和轻链可变区；(2.2)将步骤2.1所述重链可变区和轻链可变区分别与克隆载体pJET连接，连接产物转化感受态细菌DH5a，由于pJET载体带有氨苄抗性基因，将转化菌液涂在氨苄青霉素抗性的LB固体...

【专利技术属性】
技术研发人员：张学光，曹磊，傅丰庆，
申请(专利权)人：苏州旭光科星抗体生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：